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安徽外泌體芯片

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2023-08-15

Vlassov等人發(fā)表的一篇外泌體的提取方法及組成的專利文獻(xiàn)中介紹,,通過(guò)終濃度為8%的PEG6000與生物體液共孵育14h后,,10000xg離心1h,,可將直徑在30-150nm之間,且包含豐富RNA的外泌體沉淀下來(lái),。因此采用終濃度為8%的PEG6000沉淀血清中的外泌體,,為了進(jìn)一步純化胎盤相關(guān)外泌體,將獲得的包含外泌體的沉淀用PBS重新懸浮后,,加入非線性蔗糖密度梯度層,,10000xg超速離心5h,將分層液采用PEG6000進(jìn)行2次沉淀,。經(jīng)過(guò)多次實(shí)驗(yàn)反復(fù)驗(yàn)證,,確定同時(shí)表達(dá)外泌體標(biāo)志蛋白分子及胎盤特異性蛋白分子的胎盤來(lái)源外泌體所在密度層。在從體液中提取外泌體后,,體液可長(zhǎng)期穩(wěn)定保存,。安徽外泌體芯片

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在利用外泌體運(yùn)輸PTX進(jìn)行抗中流的研究中,由于間充質(zhì)干細(xì)胞可以歸巢(homing)至中流細(xì)胞微環(huán)境并且可以不通過(guò)基因操作即可對(duì)PTX運(yùn)輸,,因此Pessina等采用間充質(zhì)干細(xì)胞SR4987作為分泌外泌體的母代細(xì)胞,,而后將SR4987與PTX共混,使SR4987分泌的外泌體含有PTX,,再利用超速離心法將載有PTX的外泌體分離出來(lái),,研究其對(duì)體外人胰腺ai細(xì)胞株的影響,。結(jié)果表明外泌體可以有效的運(yùn)載PTX并不破壞其功能,,小泡(主要指外泌體)溶液的蛋白質(zhì)濃度在0.047~0.095mg/mL之間時(shí)可以誘導(dǎo)中流細(xì)胞凋亡50%,,這種抑制效果與純PTX對(duì)體外ai細(xì)胞的抑制效果相當(dāng)。umibio公司干細(xì)胞外泌體對(duì)多種類型的免疫細(xì)胞均具有免疫調(diào)節(jié)作用,。

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雖然系統(tǒng)遞送的外泌體主要在肝臟,、腎臟和脾臟中積累,但通過(guò)在外泌體的外表面上展示特定的靶向分子,。例如,,識(shí)別靶抗原的肽或抗體片段,可以獲得靶向外泌體,;通過(guò)在細(xì)胞分泌囊泡上展示糖基磷脂酰肌醇(GPI)錨定的納米抗體,,可以使細(xì)胞分泌囊泡顯示多種蛋白,包括抗體,、熒光蛋白和信號(hào)分子,。自然分泌的外泌體分離純化直接作為藥物的潛力有限,但是,,將自然的外泌體分泌所需組分摻入合成脂質(zhì)體或納米顆粒中,,并且使用可控程序組裝后的工程化外泌體模擬物在藥學(xué)上擁有更大的應(yīng)用潛力。

外泌體(Exosome)開始被認(rèn)為是毫無(wú)作用的“垃圾”,,但隨著研究的不斷深入,,人們發(fā)現(xiàn)事實(shí)并非如此,外泌體(Exosome)是具有功能活性并可進(jìn)行細(xì)胞間信息傳遞的微囊泡,。外泌體(Exosome)介導(dǎo)瘤細(xì)胞的免疫耐受,。瘤細(xì)胞來(lái)源的外泌體(Exosome)本身可作為瘤抗原,因此,,瘤來(lái)源的外泌體(Exosome)既是一種抗原呈遞系統(tǒng),,同時(shí)也是瘤排斥抗原的來(lái)源。瘤來(lái)源的外泌體(Exosome)能夠通過(guò)傳遞某些抑制信號(hào),,在機(jī)體免疫應(yīng)答過(guò)程中起負(fù)性調(diào)節(jié)作用,,誘導(dǎo)瘤細(xì)胞形成免疫耐受,從而逃避免疫細(xì)胞的殺傷,。外泌體作為核酸分子的藥物載體主要用于基因治理,。

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所有真核細(xì)胞類型包括造血細(xì)胞、上皮細(xì)胞,、神經(jīng)細(xì)胞,、干細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和病癥細(xì)胞均可在培養(yǎng)條件下分泌外泌體,。體內(nèi)所有體液,,包括血液、唾液、腦脊液,、腹水,,甚至尿液中都可以分離得到外泌體。這些外泌體傳輸多種信號(hào)分子,,包括蛋白質(zhì),、信使核糖核酸(mRNA)和非編碼核糖核酸(RNA),其攜帶的分子可以被其他細(xì)胞吸收,。因此,,外泌體可以將生物信息轉(zhuǎn)移到相鄰細(xì)胞。這種細(xì)胞間通信不只涉及生理功能,,還涉及一些疾病的發(fā)病機(jī)理,,包括瘤、心血管疾病和神經(jīng)退行性疾病等,。與正常細(xì)胞來(lái)源外泌體在結(jié)構(gòu)分子上的差異倍受矚目,。外泌體是胞內(nèi)還是胞外

外泌體又存在檢測(cè)時(shí)需使用大量外泌體和難以檢測(cè)到低表達(dá)水平的標(biāo)記蛋白。安徽外泌體芯片

外泌體在神經(jīng)系統(tǒng)中與神經(jīng)回路的控制相關(guān),,同時(shí)各種神經(jīng)退行性疾病的致病蛋白還可以通過(guò)外泌體釋放到細(xì)胞外并傳遞到其他細(xì)胞,,與病情發(fā)展密切相關(guān)。病細(xì)胞釋放的外泌體含有許多與血管新生和免疫逃逸相關(guān)的分子,,構(gòu)建適合病細(xì)胞生長(zhǎng)的微環(huán)境,,促進(jìn)病細(xì)胞的發(fā)展。另外,,病細(xì)胞來(lái)源的外泌體上粘著分子的表達(dá)形式?jīng)Q定著癥狀向身體部位的轉(zhuǎn)移途徑,。近,有報(bào)告指出脂肪細(xì)胞釋放的外泌體對(duì)肝臟的遺傳基因表達(dá)有控制作用,。許多病毒利用外泌體的產(chǎn)生路徑傳播細(xì)胞,,受病毒傳播的細(xì)菌和寄生蟲通過(guò)外泌體控制其他受細(xì)胞傳播的細(xì)菌、寄生蟲的活動(dòng),。安徽外泌體芯片

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