HE染色原理:一,、細(xì)胞核染色原理:蘇木精為堿性天然染料,,可使細(xì)胞核著色。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是DNA,,在DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中,,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外。使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷,,呈酸性,,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性燃料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色,。二,、細(xì)胞漿染色原理:細(xì)胞漿內(nèi)主要成分是蛋白質(zhì),為兩性化合物,、細(xì)胞漿的染色與pH值有密切關(guān)系,,當(dāng)pH調(diào)到蛋白質(zhì)等電點(diǎn)4.7-5.0時(shí),胞漿對(duì)外不顯電性,,此時(shí)酸或堿性染料不易染色,。當(dāng)pH調(diào)到6.7-6.8時(shí),大于蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)pH值,,表現(xiàn)酸性電離,,而帶負(fù)電荷的陰離子,可被帶正電荷的染料染色,,現(xiàn)時(shí)胞核也被染色,,核和胞漿難以區(qū)分。因此必須把pH調(diào)至胞漿等電點(diǎn)以下,,在染液中加入醋酸使胞漿帶正電荷(陽離子),,就可被帶負(fù)電荷(陰離子)的染料染色。伊紅Y是一種化學(xué)合成的酸性染料,,在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子,,與蛋白質(zhì)的氨基正電荷(陽離子)結(jié)合而使細(xì)胞漿染色,細(xì)胞漿,、紅細(xì)胞,、肌肉、結(jié)締組織,,嗜伊紅顆料等被***成不同程度的紅色或粉紅色,,與藍(lán)色的細(xì)胞核形成鮮明的對(duì)比HE染色技術(shù)幾種常見的染色問題。江蘇結(jié)果客觀的HE染色分析
HE染色注意事項(xiàng):1.組織切片的脫蠟步驟應(yīng)徹底,,否則無論進(jìn)行那種染色都會(huì)發(fā)生困難,。脫蠟時(shí)間要充分,若溶蠟劑使用過久應(yīng)及時(shí)更換以免效率降低,,若室溫過低,,可將溶蠟劑置于溫箱中進(jìn)行脫蠟。 2.蘇木素染液使用一段時(shí)間后表面易出現(xiàn)亮晶狀飄浮物,,這可能是液體表面的過氧化物,,必須過濾除去,以防沉渣污染組織切片,。蘇木素液一般染過三,、四百?gòu)埱衅?,著色力?huì)減弱,著色不鮮艷,,呈灰藍(lán)色時(shí)應(yīng)及時(shí)更換新液,。 3.染色的時(shí)間長(zhǎng)短需依據(jù):染劑對(duì)組織的染色作用,室溫條件,,切片厚薄,固定液的類別,,染液的新舊而進(jìn)行調(diào)節(jié),。所以在染色時(shí)必須使用顯微鏡觀察染色程度以利掌握時(shí)間。 4.分化十分重要,。分化步驟的準(zhǔn)確也是染色成敗的關(guān)鍵,,若分化失當(dāng)則必然引起染色不勻或過淡,過深等現(xiàn)象,,因此分化后一定要鏡檢,,觀察胞核是否清晰,胞漿呈淡白色,。否則需再次分化,,不然一旦復(fù)染后,組織會(huì)呈紫藍(lán)色即“藍(lán)蓋紅”現(xiàn)象,。 5.還原液不宜過濃,,若堿性太強(qiáng)易使組織脫落故以淡為宜。 6.伊紅宜淡染,,復(fù)染過深胞核會(huì)不清晰,,影響鏡檢。 寧夏病理HE染色分析讓您放心的實(shí)驗(yàn)外包公司,,專業(yè)HE染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺(tái),。
HE染色標(biāo)本一般是針對(duì)石蠟標(biāo)本,脂滴和石蠟都是的有機(jī)物,, 都具有非極,,脂滴應(yīng)該可以溶解石蠟的。 HE染色就是用蘇木精和伊紅對(duì)細(xì)胞內(nèi)的核糖體和細(xì)胞質(zhì)染色的方法,。 H:Hematoxylin,,蘇木精 E:Eosin,伊紅 蘇木精(Hematoxylin,H)是一種堿染料,,可將細(xì)胞核和細(xì)胞內(nèi)核糖體染成藍(lán)紫色,,被堿染料染色的結(jié)構(gòu)具有嗜堿。 伊紅(,,E)是一種酸染料,,能將細(xì)胞質(zhì)染成紅色或淡紅色,,被酸染料染色的結(jié)構(gòu)具有嗜酸。染色前,,須用二甲苯脫去切片中的石蠟,,再經(jīng)由高濃度到低濃度酒精,***入蒸餾水,,就可染色,。南京英瀚斯生物
HE染色法的話,不能準(zhǔn)確說出細(xì)胞器的顏色,,實(shí)驗(yàn)記錄或考試時(shí)只能說染色效果為 :細(xì)胞核藍(lán)色,,胞質(zhì)、肌纖維,、膠原纖維和紅細(xì)胞呈深淺不一的紅色,。或者詳細(xì)說明如下:細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色,,軟骨基質(zhì),、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,粘液呈灰藍(lán)色,。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,,胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強(qiáng)的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,,彈力纖維呈亮粉紅色,,紅血球呈橘紅色,蛋白性液體呈粉紅色,。蘇木精染液為堿性 ,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色 ,;伊紅為酸性染料 ,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。HE染色,,即是蘇木精-伊紅染色法,,是形態(tài)學(xué)比較常用的染色方法。
HE染色法,,,。蘇木精染液為堿 ,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色 ,;伊紅為酸染料 ,,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。而線粒體用HE染色不可見,,活細(xì)胞通常要求活細(xì)胞近似無色線粒體需要用健那綠來染色,,再在高倍鏡下觀察。從人或動(dòng)物新鮮尸體上取下塊(一般厚度不超過0.5厘米)投入預(yù)先配好的固定液中(10%福爾馬林,,Bouin氏固定液等)使,、細(xì)胞的蛋白質(zhì)變凝固,,以防止細(xì)胞后的自溶或細(xì)菌的分解,,從而保持細(xì)胞本來的形態(tài)結(jié)構(gòu),。一般用由低濃度到高濃度酒精作脫水劑,,逐漸脫去塊中的水份,。再將塊置于既溶于酒精,又溶于石蠟的透明劑二甲苯中透明,,以二甲苯替換出塊的中酒精,,才能浸蠟包埋,。HE染色中固定液如何配置,。廣西靠譜的HE染色分析
HE染色小攻略技巧分析,。江蘇結(jié)果客觀的HE染色分析
HE染色是目前國(guó)內(nèi)外病理診斷上***采用的常規(guī)染色方法。切片質(zhì)量的好壞,,可直接影響疾病診斷的及時(shí)與準(zhǔn)確性。因此,,能制作出一張高質(zhì)量的HE染色切片,,是必須掌握的技術(shù)之一。送檢樣本經(jīng)4%多聚甲醛固定,,固定狀態(tài)良好后,,嚴(yán)格按照本單位病理實(shí)驗(yàn)檢測(cè)SOP程序進(jìn)行修剪、脫水,、包埋,、切片、染色,、封片***鏡檢合格的樣片,。在顯微鏡下瀏覽切片或?yàn)g覽數(shù)字切片,在不同倍數(shù)下詳細(xì)觀察組織切片情況,,對(duì)切片中基本病理改變?nèi)绯溲?、淤血、出血,、水腫,、變性、壞死,、增生,、纖維化、機(jī)化,、肉芽組織,、炎性變化等情況文字描述,并反映出片子之間的差異,。對(duì)典型病變部位成像并在word文檔中用箭頭標(biāo)識(shí),。江蘇結(jié)果客觀的HE染色分析