流式細(xì)胞技術(shù)針對外泌體的表面抗原標(biāo)記物進(jìn)行檢測，能夠?qū)崿F(xiàn)外泌體的高通量、多通道分析,。但是由于外泌體的粒徑小、折射率低,，所以采用常規(guī)的流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測時(shí)往往需要將外泌體與beads連接以增大表面積、增強(qiáng)反射,，操作耗時(shí)又費(fèi)力,。Tian等搭建了一種高靈敏度的流式細(xì)胞儀(HSFCM)，將可檢測的外泌體粒徑降至40nm,，能夠在不連接beads的情況下實(shí)現(xiàn)每分鐘10000個(gè)外泌體的檢測,，并且能夠結(jié)合免疫熒光的方法進(jìn)行外泌體標(biāo)志蛋白質(zhì)的定量檢測，目前該儀器已商品化,。必須慎重分析得到的是否是外泌體。吉林外泌體circRNA測序

外泌體mirRNA和蛋白質(zhì)被認(rèn)為是NSCLC的預(yù)后因子。Dejima等在研究NSCLC患者預(yù)后的生物標(biāo)志物時(shí)發(fā)現(xiàn),，外泌體miR-4257和miR-21的含量顯著上升,。此外，還有研究表明,，低水平miR-146a-5p的NSCLC患者較高水平miR-146a-5p的NSCLC患者有更高的復(fù)發(fā)率,。Sandfeld-Paulsen等在研究276例NSCLC患者血漿的外泌體時(shí)發(fā)現(xiàn)，NY-ESO-1是單獨(dú)對低生存率有顯著影響的標(biāo)志物,。Silva等利用TaqMan低密度芯片的方法系統(tǒng)分析了28位NSCLC患者體內(nèi)的365種miRNA,，其中l(wèi)et-7f、miR-30e-3p和miR-20b表達(dá)均下調(diào),，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),，let-7f和miR-30e-3p水平可以區(qū)分早期和晚期NSCLC患者，高水平let-7f和miR-30e-3p與不良預(yù)后密切相關(guān),。體液外泌體脂質(zhì)組學(xué)外泌體的形成始于細(xì)胞內(nèi)陷,，成熟于多囊泡胞內(nèi)體，終于膜融合,。

外泌體的組成較為復(fù)雜,，其內(nèi)含有多種生物大分子，如：核酸（雙鏈DNA和各種RNA亞型）,、蛋白質(zhì)和脂質(zhì),。這些分子被外泌體攜帶進(jìn)入血液循環(huán)，而后被靶細(xì)胞吸收,，從而調(diào)節(jié)靶細(xì)胞基因表達(dá)和細(xì)胞功能,。此外，外泌體相關(guān)的miRNA作為短單鏈和非編碼RNA分子,，調(diào)節(jié)致病基因或抑病基因的表達(dá),，參與細(xì)胞分化、細(xì)胞凋亡及細(xì)胞信號的傳導(dǎo),。有研究表明,，外泌體能影響種瘤微環(huán)境的形成、增強(qiáng)種瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移能力,、介導(dǎo)種瘤免疫壓制及參與種瘤放化療抵抗進(jìn)而促進(jìn)種瘤的發(fā)展,。

妊娠期間胎盤可釋放外泌體到全身循環(huán)系統(tǒng)，參與妊娠期間母胎界面的免疫調(diào)節(jié),、子宮螺旋動脈重塑和胎盤屏障的形成等重要事件調(diào)控,，在正常妊娠過程維持中發(fā)揮重要作用。而很多妊娠并發(fā)癥,，如子癇前期等胎盤功能紊亂相關(guān)疾病的發(fā)生,，很可能與胎盤來源外泌體異常密切相關(guān),。目前外泌體分離方法主要包括：多步差速離心、蔗糖密度梯度離心,、試劑盒沉淀,、免疫磁珠分選、色譜法,、過濾離心等方法,。其中，多步差速離心是制備外泌體的經(jīng)典方法,，該方法是根據(jù)外泌體的沉降系數(shù)差速離心將其分離出來,，然而妊娠期母血清中除含有胎盤組織釋放的外泌體，還包括許多其他種類細(xì)胞釋放的外泌體,，如樹突狀細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞等，且血清中可能還存在一些大小類似的物質(zhì)混雜其中,，這些因素都會影響胎盤來源外泌體的分離純化,。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間交流可以改變瘤的生長、細(xì)胞遷移,、抗病毒等生理過程,。

外泌體是各種細(xì)胞外泌的直徑在30-100nm之間的膜囊泡。因外泌體內(nèi)含mRNA,、microRNA等核酸和蛋白質(zhì)對相鄰細(xì)胞具有交換信息的功能,。作為細(xì)胞間信號傳導(dǎo)的通訊工具和作為病等各種疾病的生物標(biāo)記話題比較熱門。近些年關(guān)于外泌體研究很普遍,，但是關(guān)于外泌體相關(guān)的實(shí)驗(yàn)技術(shù),，關(guān)于需要改進(jìn)的課題存在很多。例如,，外泌體提純方法中,，超速離心法和聚合物沉淀法（市售試劑盒）混入多種雜質(zhì)，給后續(xù)實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生了許多障礙,?？贵w親和法和密度梯度離心法，雖然可以提取到高純度的外泌體,，但不能提取完整外泌體,，無法分析外泌體具有的生理功能，也是兩種提取方法的問題所在,。而免疫印跡法（WB）和Elisa檢測法作為被普遍應(yīng)用的外泌體檢測的一般方法,，又存在檢測時(shí)需使用大量外泌體和難以檢測到低表達(dá)水平的標(biāo)記蛋白。確認(rèn)外泌體生理作用的單獨(dú)方法就是明確外泌體的釋放機(jī)制,，通過促進(jìn)或壓制釋放機(jī)制,。江蘇外泌體label free

結(jié)果表明,，PS親和法可以檢測到許多目前為止都無法檢測的外泌體蛋白質(zhì)和RNA。吉林外泌體circRNA測序

與干細(xì)胞不同的是：干細(xì)胞外泌體對受損的微環(huán)境不響應(yīng),，但它可以通過改變細(xì)胞外基質(zhì),，改變受體細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄組和蛋白質(zhì)組，來調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡,，生長，增殖和分化途徑,。因此,，干細(xì)胞外泌體具有減少細(xì)胞凋亡、減輕炎癥反應(yīng),、促進(jìn)血管生成,、抑制纖維化、提高組織修復(fù)潛力等重要生物學(xué)功能,，在調(diào)控組織再生方面存在良好的臨床應(yīng)用前景,。干細(xì)胞外泌體的優(yōu)點(diǎn)，體積?。杭{米級粒子,，大小約為細(xì)胞的1/200，因此能很好地被人體所利用,。免疫反應(yīng)程度低：外泌體不是細(xì)胞,，只作為載具，外膜的表層上呈現(xiàn)較少的抗原,，免疫系統(tǒng)難識別,，對人體影響小?？纱┩秆X障壁：體積小加上脂質(zhì)外膜的特性,，使其可以通過血腦障壁，抵達(dá)腦部組織,。吉林外泌體circRNA測序