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外泌體可以由體內(nèi)或體外培養(yǎng)的幾乎所有類型的細(xì)胞分泌,并廣fan存在于血漿,、膽汁、尿液,、母乳,、唾液、胸腔積液,、淋巴,、胃酸、支氣管肺泡灌洗液,、腦脊液,、眼淚、滑膜液,、羊水,、腹水、鼻分泌物和子宮抽吸物液體等體液中,。目前,基于不同的分離原理,研究者建立了五種主要的提取純化技術(shù),分別為基于質(zhì)量密度的超速離心技術(shù),、基于粒徑大小的分離技術(shù)、基于溶解性質(zhì)的聚合物沉淀技術(shù),、基于免疫親和原理的分離技術(shù)和基于流體性質(zhì)的微流控技術(shù),。干細(xì)胞外泌體對(duì)多種類型的免疫細(xì)胞均具有免疫調(diào)節(jié)作用。組織外泌體提取試劑盒
瘤釋放的外泌體可以通過削弱免疫效應(yīng)細(xì)胞的反應(yīng)和激發(fā)免疫抑制細(xì)胞的擴(kuò)增,,來營(yíng)造一個(gè)免疫抑制的環(huán)境,。瘤釋放的外泌體可以替代瘤細(xì)胞接受免疫系統(tǒng)的攻擊,從而幫助瘤細(xì)胞逃過免疫系統(tǒng)的識(shí)別,。瘤釋放的外泌體可以引發(fā)炎癥,,利用基質(zhì)浸潤(rùn)細(xì)胞的反應(yīng)營(yíng)造出利于瘤生長(zhǎng)的微環(huán)境。研究表明,,在過去短短的5年里,,對(duì)外泌體的研究已經(jīng)取得了比較好的的進(jìn)展,。如今,收集并分析瘤釋放的外泌體已經(jīng)成為液體活檢的一個(gè)重要研發(fā)方向,。靶向瘤釋放外泌體的治理策略將對(duì)改善病癥患者的命運(yùn)發(fā)揮出舉足輕重的影響,。外周血提取試劑盒有報(bào)導(dǎo)指出,外泌體內(nèi)miRNA參與促進(jìn)血管新生,、抗癥性和促進(jìn)膠原蛋白沉淀等一系列過程,。
除運(yùn)輸藥物進(jìn)行疾病zhiliao之外,外泌體還能進(jìn)行免疫zhiliao,,外泌體免疫zhiliao和載藥zhiliao,。進(jìn)行免疫調(diào)節(jié)時(shí),外泌體通常運(yùn)載TGF-β1,、粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)或MAGE抗原等物質(zhì),。在這些研究中,分泌外泌體的母代細(xì)胞往往選用具有很好抗原遞呈(antigenpresentation)能力的樹突細(xì)胞或者中流細(xì)胞,。Cao等采用鼠B淋巴瘤細(xì)胞作為母代細(xì)胞,,通過熱處理的方式使淋巴瘤細(xì)胞分泌的外泌體含有更多的熱休克蛋白(HSP60和HSP90)和其他一些刺激免疫的分子,如主要組織相容性復(fù)合物(MHC-I和MHC[1]II)以及CD40,、CD86等,,與未熱處理的鼠B淋巴瘤細(xì)胞分泌的外泌體相比,熱處理后分泌的外泌體可以增強(qiáng)對(duì)T細(xì)胞的激huo能力,,從而增強(qiáng)這種基于外泌體的疫苗的抗中流能力,。
膜封閉的囊泡釋放到周圍環(huán)境中已經(jīng)成為近幾年來越來越受關(guān)注的問題。令人信服的證據(jù)表明囊泡可交換復(fù)雜的信息有助于這種興趣的興起,。但是,,也已經(jīng)清楚,不同類型的分泌囊泡共存,,具有不同的細(xì)胞內(nèi)起源和形成模式,,因此可能具有不同的組成和功能。外泌體是分泌囊泡的一種亞型,。它們?cè)谡婧思?xì)胞內(nèi)的多泡小體中形成,,并且當(dāng)這些多泡小體與質(zhì)膜融合時(shí)分泌到細(xì)胞外。有趣的是,,不同的分子家族已被證明參與細(xì)胞內(nèi)形成外泌體及其隨后的分泌,,這表明即使在外泌體中也存在不同的亞型??茖W(xué)家也嘗試?yán)猛饷隗w的壓制發(fā)病機(jī)制功能,。
Knepper等通過對(duì)透射電鏡得到的200個(gè)囊泡進(jìn)行粒徑分析,結(jié)果表明尿液中外泌體的粒徑分布約為35~40nm,磷脂雙分子層厚度約為直徑的1/5~1/10,。透射電鏡結(jié)合免疫金標(biāo)記法能夠得到外泌體表面特征分子的信息,,有助于揭示外泌體的產(chǎn)生機(jī)制與來源。動(dòng)態(tài)光散射(dynamiclightscattering,,DLS)和納米顆粒跟蹤分析(nanoparticletrackinganaly[1]sis,,NTA)都是利用光學(xué)手段獲得囊泡粒徑分布的方法。兩者的不同之處在于動(dòng)態(tài)光散射通過檢測(cè)散射光的強(qiáng)度計(jì)算得到顆粒粒徑,,而納米顆粒跟蹤分析通過追蹤單個(gè)粒子的運(yùn)動(dòng)軌跡計(jì)算得到樣品濃度,、粒徑分布等信息。外泌體與各種疾病的相關(guān)性被檢測(cè)出,,特別是血液中釋放的病細(xì)胞來源的外泌體。血細(xì)胞提取試劑盒銷售
以前無法用超速離心法提取的微囊泡,,也通過運(yùn)用PS親和法實(shí)現(xiàn)高純度提取,。組織外泌體提取試劑盒
血清中的miR-122和miR-145非常不穩(wěn)定,將血清在4°C短期保存期間即發(fā)生降解,這可能是由外泌體的異質(zhì)性所導(dǎo)致的。–80°C保存被公認(rèn)是保存各種生物標(biāo)本如尿,、牛奶,、血液和支氣管肺泡灌洗液適宜的保存環(huán)境,雖然這樣保存血漿可能產(chǎn)生含有大量“污染物”的外泌體。4°C保存雖然容易導(dǎo)致外泌體中蛋白和核酸的損失,但卻能夠避免凍融過程造成的囊泡破壞,。外泌體雖然建議保存于-80°C環(huán)境下,但在處理或運(yùn)輸過程中有時(shí)很難維持這種低溫條件,。CHAROENVIRIYAKUL等提出一種凍干法以保存外泌體,在冷凍過程中使用海藻糖作為保護(hù)劑,海藻糖可以提供生物保護(hù)作用,如穩(wěn)定蛋白質(zhì)、細(xì)胞膜和脂質(zhì)體;減少冷凍過程中冰的形成;防止蛋白質(zhì)以及外泌體的聚集;減少分離和保存過程中細(xì)胞外囊泡的損失等,。組織外泌體提取試劑盒