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廈門(mén)藥理學(xué)腦片膜片鉗哪家好

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2023-05-27

膜片鉗技術(shù)在通道研究中的重要作用:1.與藥物作用有關(guān)的心肌離子通道:心肌細(xì)胞通過(guò)各種離子通道對(duì)膜電位和動(dòng)作電位穩(wěn)態(tài)的維持而保持正常的功能,。近年來(lái),,國(guó)外學(xué)者在人類心肌細(xì)胞離子通道特性的研究中取得了許多進(jìn)展,使得心肌藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)由動(dòng)物細(xì)胞模型向人心肌細(xì)胞成為可能,。2.對(duì)離子通道生理與病理情況下作用機(jī)制的研究:通過(guò)對(duì)各種生理或病理情況下細(xì)胞膜某種離子通道特性的研究,,了解該離子的生理意義及其在疾病過(guò)程中的作用機(jī)制,。膜片鉗使用的注意事項(xiàng):向玻璃微電極灌注內(nèi)液時(shí)切勿灌太多,以防液體進(jìn)入銀絲底部增加噪聲,。廈門(mén)藥理學(xué)腦片膜片鉗哪家好

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膜片鉗技術(shù)本質(zhì)上也屬于電壓鉗范疇,,兩者的區(qū)別關(guān)鍵在于:①膜電位固定的方法不同;②電位固定的細(xì)胞膜面積不同,,進(jìn)而所研究的離子通道數(shù)目不同,。電壓鉗技術(shù)主要是通過(guò)保持細(xì)胞跨膜電位不變,并迅速控制其數(shù)值,,以觀察在不同膜電位條件下膜電流情況,。因此只能用來(lái)研究整個(gè)細(xì)胞膜或一大塊細(xì)胞膜上所有離子通道活動(dòng)。目前電壓鉗主要用于巨大細(xì)胞的全性能電流的研究,,特別在分子克隆的卵母細(xì)胞表達(dá)電流的鑒定中發(fā)揮著其他技術(shù)不能替代的作用,。連云港藥理學(xué)膜片鉗方案膜片鉗的應(yīng)用:心肌細(xì)胞通過(guò)各種離子通道對(duì)膜電位和動(dòng)作電位穩(wěn)態(tài)的維持而保持正常的功能。

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膜片鉗使用的注意事項(xiàng):工作原理膜片鉗是一種能夠直接觀察單一的離子通道蛋白質(zhì)分子對(duì)相應(yīng)離子通透難易程度等特性的一種實(shí)驗(yàn)技術(shù),。它的基本原理是以一個(gè)光潔,,直徑約為0.5~3um的玻璃微電極同神經(jīng)或肌細(xì)胞的膜接觸,之后對(duì)微電極另一端開(kāi)口處施加適當(dāng)?shù)呢?fù)壓用電極的纖細(xì)開(kāi)口將與電極接觸的那一小片膜輕度吸入,,如此在微電極開(kāi)口處的玻璃邊沿以及這一小片膜周邊會(huì)形成緊密的封接,,它的電阻能夠達(dá)到數(shù)個(gè)或數(shù)十個(gè)千兆歐,這世界上就是在化學(xué)上完全隔離了吸附在微電極開(kāi)口處的那一片膜同膜的其余部分,,通過(guò)微電極記錄到的電流變化光光和該膜片中通道分子的功能狀態(tài)相關(guān)聯(lián),。膜片鉗技術(shù)用特制的玻璃微吸管吸附于細(xì)胞表面,使之形成10~100MΩ的高阻封接,,被孤立的小膜片面積為微米數(shù)量級(jí),,因此封接范圍內(nèi)細(xì)胞膜光有少數(shù)離子通道。

膜片鉗使用的注意事項(xiàng):1.為了防止塵埃,、靜電傷害機(jī)器,,每天做實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)用清水拖地。2.拉制儀使用前需預(yù)熱15-30min,。3.銀絲電極及地線發(fā)白時(shí),,請(qǐng)先用砂紙輕微打磨,再浸入新鮮的次氯酸鈉溶液鍍氯化銀,如果銀絲電極30min未變黑,,則考慮更換次氯酸鈉,。4.先開(kāi)放大器,后開(kāi)軟件,;先關(guān)軟件,,后關(guān)放大器。5.非必須用到汞燈時(shí)請(qǐng)不要打開(kāi)汞燈電源,,打開(kāi)后至少需1個(gè)小時(shí)才可關(guān)閉,。6.在放大器打開(kāi)時(shí)不能用手、金屬物品或其它導(dǎo)電的物品接觸電極絲(包括地線),,在取放細(xì)胞片時(shí)請(qǐng)關(guān)閉放大器,。膜片鉗技術(shù)用特制的玻璃微吸管吸附于細(xì)胞表面,使之形成10~100MΩ的高阻封接,,被孤立的小膜片面積為微米數(shù)量級(jí),,因此封接范圍內(nèi)細(xì)胞膜光有少數(shù)離子通道。膜片鉗技術(shù)可用于研究特殊制備的巨型球狀體中的細(xì)菌離子通道,。

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膜片鉗技術(shù)基本原理與特點(diǎn):又由于玻璃微電極管徑很小,,其下膜面積光約1 μm2,,在這么小的面積上離子通道數(shù)量很少,,一般只有一個(gè)或幾個(gè)通道,經(jīng)這一個(gè)或幾個(gè)通道流出的離子數(shù)量相對(duì)于整個(gè)細(xì)胞來(lái)講很少,,可以忽略,,也就是說(shuō)電極下的離子電流對(duì)整個(gè)細(xì)胞的靜息電位的影響可以忽略,那么,,只要保持電極內(nèi)電位不變,,則電極下的一小片細(xì)胞膜兩側(cè)的電位差就不變,從而實(shí)現(xiàn)電位固定另外,,高阻封接技術(shù)還很大降低了電流記錄的背景噪聲,,從而戲劇性地提高了時(shí)間、空間及電流分辨率,,如時(shí)間分辨率可達(dá)10 μs,、空間分辨率可達(dá)1平方微米及電流分辨率可達(dá)10-12 A。在大多數(shù)膜片鉗實(shí)驗(yàn),,要求所有實(shí)驗(yàn)儀器及設(shè)備均具有良好的機(jī)械穩(wěn)定性,。無(wú)錫細(xì)胞生物學(xué)膜片鉗實(shí)驗(yàn)網(wǎng)站

膜片鉗使用操作注意:用儀器的同學(xué)必須履行實(shí)驗(yàn)室相關(guān)要求,完成值日等相關(guān)工作,。廈門(mén)藥理學(xué)腦片膜片鉗哪家好

電壓鉗與膜片鉗有什么區(qū)別,?電壓鉗技術(shù)是通過(guò)向細(xì)胞內(nèi)注射一定的電流,抵消離子通道開(kāi)放時(shí)所產(chǎn)生的離子流,,從而將細(xì)胞膜電位固定在某一數(shù)值,。由于注射電流的大小與離子流的大小相等,、方向相反,因此它可以反映離子流的大小和方向,。膜片鉗技術(shù)鉗制的是膜片,,是指采用尖銳端經(jīng)過(guò)處理的微電極與細(xì)胞膜發(fā)生緊密接觸,使尖銳端下的這片細(xì)胞膜在電學(xué)上與其它細(xì)胞膜分離,,這很大程度降低了背景噪聲,,使單通道微弱的電流得以分辨出來(lái)。采用電壓鉗技術(shù)將這片膜的電位鉗制在某一數(shù)值,,可記錄到單通道電流,。從這點(diǎn)上看,膜片鉗技術(shù)是特殊的電壓鉗技術(shù),。隨著膜片鉗技術(shù)的發(fā)展,,它已經(jīng)不只只局限于膜片的概念,也不只只采用電壓鉗技術(shù),,還常采用電流鉗技術(shù),。廈門(mén)藥理學(xué)腦片膜片鉗哪家好

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