卵胞漿內單精子顯微注射（ICSI）不僅用于人類輔助生殖（ART）,，而且在稀有物種保護,、轉基因動物的生殖系拯救或任何獸醫(yī)輔助受孕過程中也被***用于獸醫(yī)體外受精。壓電輔助ICSI于1995年***被描述,，可用于標準ICSI失敗的動物（如小鼠）的輔助受孕,。該技術所需的顯微注射工作站與標準ICSI非常相似，但在毛細管支架上增加了一個壓電沖擊單元,。本用戶指南重點介紹壓電輔助顯微注射程序本身,。摘要卵母細胞胞漿內單精子顯微注射，即將單個精子直接注射到卵子的細胞質中,，***在倉鼠身上被描述,，并已成功應用于人類，以及其他物種,，如小鼠,。在動物模型中進行的ICSI是研究直接受精過程以及不孕原因的比較好工具。特別是在生物醫(yī)學研究領域,，當精子被共同注射或包裹外源DNA時，ICSI也可以用作基因轉移技術,。此外，當轉基因表達或突變損害雄性或雌性小鼠的生存能力或生育能力時,，通常會應用小鼠ICSI,。在這些情況下，壓電輔助ICSI可以成為拯救和維持非常有價值的小鼠品系的一種手段,，因為正常的ICSI已被證明在小鼠身上很困難。幾項研究表明,，通過壓電驅動的微毛細管注**子對小鼠卵子的創(chuàng)傷遠小于傳統(tǒng)方法,。此外,，壓電輔助ICSI已被證明可以顯著提高受精成功率。壓電顯微操作儀PMM 6可用于豬卵母細胞和胚胎的ICSI等實驗,。Piezo Micro Manipulator壓電DNA注射

注射—將含一個已制動精子的注射管輕柔刺破透明帶和卵膜,，進入卵母細胞中心,。注入精子時,，應盡可能少地帶入培養(yǎng)液,。之后使用負壓破壞卵膜,，隨后輕柔抽吸細胞質,。精子置入,、穿過卵膜和抽吸細胞質以***卵母細胞的不同方法對受精和胚胎發(fā)育率的影響是一個研究熱點,。壓電輔助的ICSI是一種新型方法,，目前已在有ICSI結局不良病史和MⅡ期卵母細胞有限的患者中使用,。在ICSI操作過程中,，該技術對卵母細胞的損傷較小且可改善受精率和胚胎質量,。目前使用壓電驅動管的新型ICSI注射技術已成功用于多種哺乳動物。由于該注射器采用超聲切割力(而不是刺穿力)穿透卵膜,，注射過程中卵母細胞幾乎沒有變形,，因此其對卵母細胞的損傷大幅減少,。該技術實現(xiàn)的存活率和成功率同樣高,。注射后,，根據(jù)標準實驗室方案培養(yǎng)卵母細胞,。受精ICSI后，受精率為50%-80%,。雖然ICSI不可保證一定受精,，但完全受精失敗的發(fā)生率較低,，通常發(fā)生于獲卵數(shù)較低的周期,。受精失敗的原因通常不是未置入精子或卵母細胞排出精子,。其可能是由于卵母細胞***失敗,，這通常與卵母細胞質量較差或精子無活性有關,。香港Piezo Micro Manipulator壓電細胞注射PMM PIEZO-ICSI是一種先進的技術，用于輔助生殖醫(yī)學領域的人工受孕過程,。

有一類十分有趣的晶體,，當你對它擠壓或拉伸時,，它的兩端就會產生不同的電荷,。這種效應被稱為壓電效應,。能產生壓電效應的晶體就叫壓電晶體,。水晶（α-石英）是一種有名的壓電晶體,。如果按一定方向對水晶晶體上切下的薄片施加壓力，那么在此薄片上將會產生電荷,。如果按相反方向拉伸這一薄片，在此薄片上也會出現(xiàn)電荷,，不過符號相反,。擠壓或拉伸的力愈大,，晶體上的電荷也會愈多,。如果在薄片的兩端鍍上電極,，并通以交流電,，那么薄片將會作周期性的伸長或縮短,，即開始振動,。這種逆壓電效應在科學技術中已得到了廣泛的應用,。用水晶可以制作壓電石英薄片,，其面積不過數(shù)平方毫米,，厚度則只有零點幾毫米,。別小看這小小的晶片,，它在無線電技術中卻發(fā)揮著巨大作用,。如前所述,，在交變電場中，這種薄片的振動頻率絲毫不變,。這種穩(wěn)定不變的振動正是無線電技術中控制頻率所必須的,，你家中的彩色電視機等許多電器設備中都有用壓電晶片制作的濾波器，保證了圖像和聲音的清晰度,。你手上戴的石英電子表中有一個**部件叫石英振子,。就是這個關鍵部件保證了石英表比其他機械表更高的走時準確度。

傳統(tǒng)的壓電陶瓷較其它類型的壓電材料壓電效應要強,，從而得到了廣泛應用,。但作為大應邊，高能換能材料，傳統(tǒng)壓電陶瓷的壓電效應仍不能滿足要求,。于是近幾年來,，人們?yōu)榱搜芯砍鼍哂懈鼉?yōu)異壓電性的新壓電材料,，做了大量工作,，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)并研制出了Pb(A1/3B2/3)PbTiO3單晶（A=Zn2+,Mg2+）。這類單晶的d33比較高可達2600pc/N(壓電陶瓷d33比較大為850pc/N),k33可高達0.95（壓電陶瓷K33比較高達0.8）,，其應變>1.7%,，幾乎比壓電陶瓷應變高一個數(shù)量級。儲能密度高達130J/kg,，而壓電陶瓷儲能密度在10J/kg以內,。鐵電壓電學者們稱這類材料的出現(xiàn)是壓電材料發(fā)展的又一次飛躍。現(xiàn)在美國,、日本,、俄羅斯和中國已開始進行這類材料的生產工藝研究，它的批量生產的成功必將帶來壓電材料應用的飛速發(fā)展,。PMM PIEZO還具備可靠的性能和穩(wěn)定的工作狀態(tài),，能夠長時間保持高質量的操作效果。

在正常受精過程中,，精子進入卵子后,，會導致卵細胞內的鈣離子濃度發(fā)生持續(xù)數(shù)小時的周期性的短暫升高，這個過程被稱為卵子的“鈣震蕩”,，鈣震蕩會引發(fā)大量生化反應事件,，代謝活動重新活躍起來,，這個過程稱為卵子***,。精子***后的卵子會發(fā)生一系列的變化，包括細胞內鈣離子濃度升高,，皮質反應,，透明帶反應等，然后卵子完成第二次減數(shù)分裂,，排出第二極體,，開啟后續(xù)的胚胎發(fā)育過程。第二代試管嬰兒（ICSI）授精后，成熟卵子見不到2原核的受精標志,，稱為ICSI完全受精失敗,。ICSI受精失敗在ICSI周期中比例約為1%-3%，其中30%的夫婦會發(fā)生反復持續(xù)的受精失敗,，是臨床中極其棘手的難題,。即使是經驗豐富的胚胎學家，也無法避免這種情況,。卵母細胞***失敗是ICSI受精失敗的主要原因之一,。PMM PIEZO具備良好的可擴展性，可以根據(jù)不同的需求進行調整和升級,，滿足不同醫(yī)療機構的需求,。昆明Piezo Micro Manipulator壓電顯微注射

PMM PIEZO的使用不僅可以提高受孕成功率，還可以減少患者的心理壓力和焦慮感,，增強他們的信心,。Piezo Micro Manipulator壓電DNA注射

把示波器交直流選擇開關置于“DC”擋，掃描范圍置于“10～100kHz”擋,，用X移位和Y移位將水平亮線移到方格坐標的**部,，置X軸上。為了能估測壓電效應的最高電壓幅值,，我們必須先用熒光屏前的方格坐標系,，定出電壓標尺：利用接在示波器Y輸入接線柱上的兩根導線，把一節(jié)干電池的1.5V電壓加在示波器上,，衰減放在1,，Y增益放在比較低，可以發(fā)現(xiàn)剛才的水平亮線上跳（或下跳）兩格左右,，即此時兩格**1.5V電壓,。在Y增益不變的情況下，再將Y衰減放在1000（即千分之一）擋,，熒光屏前方格坐標的兩格就可以**1500V了,。將Y輸入接線柱上的兩根饋線的鱷魚夾分別接在壓電打火機壓電元件的兩個電極上，迅速按下其黑色塑料壓桿,，可以看到原來位于**高度的水平亮線向上（或向下）跳動又恢復原位,。由于熒光屏的余暉作用，水平亮線在示波器上顯現(xiàn)的是一條高度達四格的亮帶,，這表明該脈沖的電壓幅值在3000V以上,。如果想觀察這個電壓脈沖的波形，可以每次按動壓桿的同時,，細心調節(jié)示波器“掃描微調”旋鈕（事先將掃描范圍換到“10～100Hz”擋）,，我們可以在熒光屏上看到如圖2所示的波形，其電壓上升較陡，降低較平緩,，峰值在四格以上,。Piezo Micro Manipulator壓電DNA注射