檢查具備條件受檢者,經(jīng)歷一段經(jīng)常排精過程后,,禁房事5-7天(上次排精到取標本間隔時間至少不得少于100小時),;[1]備大口有蓋清潔干燥容器一個,,以**方式獲取精液,,一次全部射入容器,蓋上蓋,,記錄標本離體時間,;貼身保溫,30分鐘內(nèi)送到化驗室,,并向檢驗員提供標本取出時間,。精液常規(guī)觀察:精液總?cè)萘浚ê辽踊顒忧闆r,,精子密度(個/毫升),,精液液化時間(標本取出到精液液化的時間),不動精子(個/高倍視野)等。見不動精子,,須染色方可區(qū)分:不活動的精子,、死精子、未成熟精子等,。找不到精子必須離心后檢驗,,仍然找不到精子;方可報告無精,。經(jīng)三次取樣化驗,,結(jié)果仍然找不到精子方可確認無精子癥。精子分析儀參數(shù),,精子頭側(cè)擺幅度(ALH)?:精子頭關(guān)于其平均路徑的側(cè)向位移幅度,。上海馬精子分析DAP
方法:使用兩種已知濃度的質(zhì)控乳膠珠溶液,1份濃度為(35±5)×106/ml,另1份濃度為(18.0±2.5)×106/ml,評價4種計數(shù)方法的準確性和精確性,并比較4種方法計數(shù)精液的結(jié)果。結(jié)果:計數(shù)乳膠珠時,CellVU計數(shù)池的結(jié)果**接近已知濃度,分別為(39.70±4.76),、(19.09±2.02)×106/ml,變異系數(shù)(CV)值分別為12.80%和10.58%;血細胞計數(shù)池和Makler計數(shù)池結(jié)果均高于已知濃度,前者為(44.84±4.86)×106/ml、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分別為10.81%和8.89%,后者為(52.36±7.78)×106/ml,、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分別為14.86%和14.96%;CASA系統(tǒng)結(jié)果低于已知濃度,為(28.53±2.06),、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比較低,分別為7.22%和6.50%。計數(shù)精液時,CellVU計數(shù)池與CASA系統(tǒng)結(jié)果差異無***性(P=0.71),分別為(45.28±34.52),、(41.96±31.93)×106/ml,血細胞計數(shù)池和Makler計數(shù)池結(jié)果差異無***性(P=0.14),分別為(76.98±59.90),、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU計數(shù)池、CASA系統(tǒng)與血細胞計數(shù)池,、Makler計數(shù)池結(jié)果間差異***(P<0.05或P<0.01),。結(jié)論:計數(shù)精液時,CASA系統(tǒng)與CellVU計數(shù)結(jié)果差異無***性。各實驗室可選擇合適的手工或CASA計數(shù)方法,。北京密度精子分析負相差精子分析儀能分析與精子運動功能相關(guān)的各種參數(shù),。
精子手工計數(shù)原理及操作方法1.原理:將精液用適當?shù)南♂屢鹤饕欢肯♂尯螅靹蜃⑷胗嫈?shù)池內(nèi)計數(shù),,再算出每毫升精液中精子數(shù),。2.方法(按照***版第四版《全國臨床檢驗操作規(guī)程》)1).于小試管內(nèi)加精子稀釋液0.38ml,取液化精液20μl,加入稀釋液內(nèi)混勻。2).充分搖勻后,滴入改良Neubauer計數(shù)板的計數(shù)池內(nèi),靜置1~2分鐘,待精子下沉后,以精子頭部作為基準進行計數(shù),。3.計算1).如每個**中方格內(nèi)精子少于10個,應(yīng)計數(shù)所有25個中方格內(nèi)的精子數(shù),。2).如每個**中方格內(nèi)精子在10~40個,應(yīng)計10個中方格內(nèi)的精子數(shù)。3).如每個**中方格內(nèi)精子多于40個,應(yīng)計數(shù)5個中方格內(nèi)的精子數(shù),。公式:精子數(shù)=計數(shù)結(jié)果/計數(shù)中方格×25×1/計數(shù)池高度×20×103/ml=計數(shù)結(jié)果/計數(shù)中方格×1/計數(shù)池高度×5×103/ml
通過結(jié)果的生物學意義對結(jié)果質(zhì)量進行評估?當所有具生物學意義的參數(shù)在測試中表現(xiàn)出較小的可變性時則方法學可變性亦較低方法學可變性低則結(jié)果質(zhì)量就高,。CASA系統(tǒng)獲得的數(shù)值與直觀評估獲得的數(shù)值進行分析和比較在精子數(shù)量和綜合運動性上具有較好的相關(guān)性而·131·中國優(yōu)生與遺傳雜志2002第10卷第6期DOI:10.13404/j.cnki.cjbhh.2002.06.091在前向運動精子百分率上的相關(guān)性較低]。Holt等報道了在常規(guī)實驗條件下采用五種不同的CASA系統(tǒng)對**參數(shù)值進行比較,,其結(jié)果為:采用同一個測定池由不同的操作者測定**參數(shù),;變異系數(shù)(CV)是29%?活動精子比率的CV為24%?平均路徑速度(VAP)的CV為43?85%。作者們指出該分析結(jié)果不應(yīng)看作是不同CASA系統(tǒng)間的工作情況的比較?實際上它揭示了操作者的錯誤是差異的主要來源。目前有待于尋找進一步的標準來評估CASA變量的結(jié)果質(zhì)量,。精子***的生物學功能是使卵細胞授精?因此用夫婦中的授精結(jié)果來考察精子運動性是合理的?只有在該基礎(chǔ)上能夠確定活動性參數(shù)的重要性,。輔助生殖技術(shù)(授精IVF)的發(fā)展使檢測精子質(zhì)量與各參數(shù)間的關(guān)系的比較成為可能;同樣可以驗證CASA測定結(jié)果與精子真實質(zhì)量間的相關(guān)性有利于CASA結(jié)果質(zhì)量的提高,。不同品牌CASA分析的結(jié)果差異較大,,因此,更高效精確的精液質(zhì)量檢測系統(tǒng)對促進男科學發(fā)展具有重要的意義,。
[臨床意義]1.若數(shù)日未**,、且精液量少于1.5ml者為不正常,說明精囊或前列腺有病變,;若精液量減至數(shù)滴,,甚至排不出,稱為無精液癥,,見于生殖系統(tǒng)的特異性***,,如結(jié)核、淋病和非特異性炎癥等,。2.若精液量過多(一次超過8ml),,則精子被稀釋而相應(yīng)減少,有礙生育,。二,、顏色檢查[正常參考值]灰白或乳白色,久未**者可呈淺黃色,。[臨床意義]1.黃色或棕色膿樣精液:見于精囊炎或前列腺炎等,。2.鮮紅或暗紅色血性精液:見于生殖系統(tǒng)的炎癥、結(jié)核和**等,。三,、粘稠度和液化檢查[正常參考值]粘稠膠凍狀,30分鐘內(nèi)自行液化,。[臨床意義]1.精液粘稠度低,,似米湯樣,可因精子量減少所致,,見于生殖系統(tǒng)炎癥,。??2.液化時間過長或不液化,可抑制精子活動而影響生育,,常見于前列腺炎癥等,。四、精子活動率檢測[正常參考值]正常精子活力一般在Ⅲ級(活動較好,,有中速運動,,但波形運動的較多)以上,,**后1小時內(nèi)有Ⅲ級以上活動能力的精于應(yīng)>0.60。[臨床意義]如果0級(死精子,,無活動能力,,加溫后仍不活動)和Ⅰ級(活動不良,精子原地旋轉(zhuǎn),、擺動或抖動,,運動遲緩)精子在0.40以上,常為男性不育癥的重要原因之一,。CASA系統(tǒng)通過計算機分析精子運動參數(shù),,能夠提供精確的量化數(shù)據(jù),優(yōu)于人工檢測方法,。美國濃度精子分析VAP
Hamilton Thorne自動精子分析儀具有高精度,、高效率和自動化的優(yōu)點。上海馬精子分析DAP
精子分析儀使用注意事項1.樣品制備是CASA取得高質(zhì)量檢查結(jié)果的關(guān)鍵,。CASA采用深度為10um樣品池,,能保證精子在單層界面內(nèi)自由運動。取樣分析前標本必須充分混勻,,用微量取液器取5~7ul**加入樣品池中,,用0.5mm厚皿蓋片蓋緊。2.不潔凈的計數(shù)池可影響精子的活力,,尤其影響灰度CASA精子計數(shù)的準確性。3.精子樣品密度過大時,,造成圖像處理上的粘連,,無法分析每個精子的運動特性。**中所含精子太少時,,需增加檢查視野數(shù)量或者使用低倍物鏡觀察,,以提高樣品檢出率。上海馬精子分析DAP