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人類精子冷凍保存和儲(chǔ)存:增加了冷凍樣本的安全性、精液冷凍保存方案,、快速液氮熏蒸冷凍,、冷凍精液的解凍、玻璃化冷凍等內(nèi)容,,更具可操作性,。本手冊(cè)對(duì)人類精子的冷凍保存提出了具體建議:將樣本分管分罐分開(kāi)儲(chǔ)存;對(duì)使用的材料和留存標(biāo)本建立定期核驗(yàn)程序,;所有儲(chǔ)罐都應(yīng)有液位監(jiān)控報(bào)警系統(tǒng),,以監(jiān)測(cè)溫度和液氮液位,傳感器應(yīng)連接警報(bào)器,,可通過(guò)實(shí)驗(yàn)室人員的終端進(jìn)行提醒,。新證據(jù)表明,玻璃化冷凍是冷凍保存精液的一種有價(jià)值的方法,。該方法的原理是將小體積樣本與無(wú)污染液氮直接接觸并快速冷凍,,可以防止冰晶的形成,并減少精子的滲透性損傷。在麥管玻璃化冷凍(無(wú)菌玻璃化冷凍)中,,也可以使用封閉系統(tǒng),,不需要無(wú)菌的液氮。電腦全自動(dòng)精子采集分析儀是一款高科技醫(yī)療設(shè)備,,它巧妙地融合了現(xiàn)代計(jì)算機(jī)技術(shù)和自動(dòng)控制技術(shù),。北京水生動(dòng)物精子分析BCF
二、生化及免疫學(xué)檢驗(yàn):5,、精漿肉堿測(cè)定【正常參考值】濃度為239.56±l05.59umol/L,。【臨床意義】精漿肉堿測(cè)定精漿中的肉堿主要由附睪分泌,,其次是精囊,。精漿中肉堿分為游離肉堿和乙酰肉堿二種,附睪中含高濃度的肉堿,,主要與精子在附睪成熟時(shí)所需的能量來(lái)源有關(guān)?,F(xiàn)認(rèn)為精漿肉堿含量和果糖含量的變化,常反映附睪,、精囊的功能,。精漿肉堿及果糖含量正常,表明附睪,、精囊功能正常,。當(dāng)肉堿含量高于正常的50%,而果糖含量降低,,則提示精囊功能障礙,,附睪功能正常;精漿肉堿約為正常含量的50%左右,,果糖含量正常,,說(shuō)明附睪功能障礙,精囊功能正常,;而肉堿急劇下降,,果糖含量亦減少,表示精囊,、附睪功能均發(fā)生障礙,。6、抗精子抗體(AsAb)測(cè)定【正常參考值】陰性,?!九R床意義】AsAb檢測(cè)對(duì)不育原因檢查有重要臨床意義。存在于血清或生殖道分泌液中的AsAb,,可抑制精子的活動(dòng),,干擾精子的運(yùn)行,,阻礙精子穿透及精卵結(jié)合,使受精發(fā)生障礙,。即使已經(jīng)受精,,也可能影響發(fā)育中的胚胎,造成免疫性流產(chǎn),。不育夫婦AsAb陽(yáng)性者占25%-30%,,當(dāng)精子輸出管道受阻、睪丸損傷,、炎癥,、附睪等生殖系***時(shí),系精子外逸而產(chǎn)生的自身抗體,。廣州計(jì)算機(jī)輔助精子分析WOBHAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù),,鞭打頻率(BCF)?:精子曲線路徑跨越其平均路徑的平均頻率。
精子手工計(jì)數(shù)原理及操作方法1.原理:將精液用適當(dāng)?shù)南♂屢鹤饕欢肯♂尯?,混勻注入?jì)數(shù)池內(nèi)計(jì)數(shù),,再算出每毫升精液中精子數(shù)。2.方法(按照***版第四版《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》)1).于小試管內(nèi)加精子稀釋液0.38ml,取液化精液20μl,加入稀釋液內(nèi)混勻,。2).充分搖勻后,滴入改良Neubauer計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)池內(nèi),靜置1~2分鐘,待精子下沉后,以精子頭部作為基準(zhǔn)進(jìn)行計(jì)數(shù),。3.計(jì)算1).如每個(gè)**中方格內(nèi)精子少于10個(gè),應(yīng)計(jì)數(shù)所有25個(gè)中方格內(nèi)的精子數(shù)。2).如每個(gè)**中方格內(nèi)精子在10~40個(gè),應(yīng)計(jì)10個(gè)中方格內(nèi)的精子數(shù),。3).如每個(gè)**中方格內(nèi)精子多于40個(gè),應(yīng)計(jì)數(shù)5個(gè)中方格內(nèi)的精子數(shù),。公式:精子數(shù)=計(jì)數(shù)結(jié)果/計(jì)數(shù)中方格×25×1/計(jì)數(shù)池高度×20×103/ml=計(jì)數(shù)結(jié)果/計(jì)數(shù)中方格×1/計(jì)數(shù)池高度×5×103/ml
男科實(shí)驗(yàn)室中通常所指的質(zhì)量包含三個(gè)方面:實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量、醫(yī)生處置的質(zhì)量以及結(jié)果的質(zhì)量[3],。1.實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量與**分析有關(guān)的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部質(zhì)量主要是工作人員的素質(zhì)和所采用儀器的質(zhì)量,。工作人員應(yīng)經(jīng)過(guò)特殊的培訓(xùn)?儀器必須處于正常狀態(tài)、確保準(zhǔn)確的結(jié)果?操作應(yīng)符合規(guī)程[4],。CASA系統(tǒng)本身的質(zhì)量難于評(píng)定,。硬件?如顯微鏡、影像攝影機(jī)和計(jì)算機(jī)經(jīng)檢查便可確定其可靠性,。但軟件并非如此?軟件中存在不確定的因素?算法是軟件中**重要的部分?通常制造者保守這些秘密,;因此?有關(guān)軟件的數(shù)學(xué)上,、信息性的,、統(tǒng)計(jì)學(xué)的或生物測(cè)量方面的檢查實(shí)驗(yàn)室難于進(jìn)行。?HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù),,前向性(STR)?:平均路徑的直線性,。
醫(yī)生處置質(zhì)量是指診斷質(zhì)量?是以當(dāng)今醫(yī)學(xué)科學(xué)知識(shí)、技術(shù)為基礎(chǔ)依據(jù)癥狀來(lái)完成的,。CASA系統(tǒng)可以為醫(yī)生提供優(yōu)于傳統(tǒng)精子分析的手段和快速準(zhǔn)確的分析結(jié)果[5],。CASA在醫(yī)生處置質(zhì)量方面的特點(diǎn)在于:①當(dāng)CASA系統(tǒng)的參數(shù)設(shè)定和樣品的處理方式(溫度,、稀釋法、緩沖液)確定時(shí)?通過(guò)個(gè)體內(nèi)和個(gè)體間的比較?CASA的精子活力重復(fù)性明顯好于直觀評(píng)估[6],。②實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)資料是質(zhì)量的一部分?CASA系統(tǒng)所有數(shù)據(jù)都是直接在線獲得的?因此明顯優(yōu)于其他方法[6]?記錄傳遞到數(shù)據(jù)庫(kù)的過(guò)程無(wú)錯(cuò)誤發(fā)生?可清楚準(zhǔn)確地打印出結(jié)果,。所有的數(shù)據(jù)可直接轉(zhuǎn)換到數(shù)據(jù)庫(kù)、能夠?qū)?**前和***后測(cè)定的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)比較[9],、質(zhì)量控制數(shù)據(jù)的采集與保存,、每天的標(biāo)本測(cè)試記錄以及許多其他報(bào)告等等?如此大量數(shù)據(jù)的處理只有在計(jì)算機(jī)中才能完成。但是CASA系統(tǒng)的參數(shù)設(shè)定也許限制了其質(zhì)量?特別是在精子形態(tài)學(xué)檢查中?通過(guò)CASA系統(tǒng)對(duì)精子形態(tài)學(xué)特征進(jìn)行分析[7]?這些特征(細(xì)胞大小,、形狀,、光學(xué)密度、尾的存在以及其它)可由操作者選擇?這樣就會(huì)引起同一標(biāo)本在不同實(shí)驗(yàn)室或不同分析者測(cè)得的結(jié)果一致性較差[8],。就形態(tài)學(xué)分析而言?傳統(tǒng)方法的可變性遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于CASA分析,。全自動(dòng)精子分析儀嚴(yán)格按照世界衛(wèi)生組織(WHO)和KRUGER標(biāo)準(zhǔn),并通過(guò)ISO9001認(rèn)證,。廣州馬精子分析
計(jì)算機(jī)輔助精子分析(computer- assisted sperm analysis)是2014年公布的泌尿外科學(xué)名詞,。北京水生動(dòng)物精子分析BCF
精子分析儀是計(jì)算機(jī)技術(shù)和圖像處理技術(shù)結(jié)合的**分析儀器設(shè)備,通過(guò)顯微鏡下攝像和計(jì)算機(jī)快速分析多個(gè)視野內(nèi)精子的運(yùn)行軌跡,,客觀記錄了精子的密度,、活動(dòng)力、活動(dòng)率和存活率等各項(xiàng)參數(shù),。計(jì)算機(jī)輔助**分析儀由硬件系統(tǒng)和軟件系統(tǒng)組成,。硬件系統(tǒng)主要由顯微攝像系統(tǒng)、圖像采集系統(tǒng),、恒溫系統(tǒng),、計(jì)算機(jī)處理系統(tǒng)等四大系統(tǒng)構(gòu)成。此外,,儀器一般配有**樣品盒,,以確保單層取樣[1]。1.顯微攝像系統(tǒng):由顯微鏡及CCD組成,??梢詫?biāo)本信號(hào)通過(guò)顯微放大由CCD傳輸?shù)接?jì)算機(jī)2.圖像采集系統(tǒng):由圖像卡構(gòu)成,其功能是對(duì)CCD信號(hào)進(jìn)行抓拍,、識(shí)別,、預(yù)處理后,將成熟信號(hào)輸送到計(jì)算機(jī),。3.恒溫系統(tǒng):由加溫和保溫設(shè)備組成,。加溫是通過(guò)熱吹風(fēng)機(jī)不斷將適宜的溫度熱風(fēng)鼓入封閉保溫罩內(nèi),提供穩(wěn)定,、可靠的檢查環(huán)境,。4.計(jì)算機(jī)系統(tǒng):對(duì)圖像信號(hào)進(jìn)行***系統(tǒng)的加工處理,,對(duì)獲得的數(shù)據(jù)進(jìn)行輸出和存儲(chǔ)的設(shè)備。軟件系統(tǒng)采用**的精子質(zhì)量分析軟件,,利用現(xiàn)代化的計(jì)算機(jī)識(shí)別技術(shù)和圖像處理技術(shù),,對(duì)精子的動(dòng)靜態(tài)特征進(jìn)行***的量化分析,對(duì)精子的密度,、活力,、活率、運(yùn)動(dòng)軌跡等特征進(jìn)行量的檢測(cè)分析北京水生動(dòng)物精子分析BCF