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來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2023-05-24

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    本發(fā)明的特征在于:應(yīng)用本發(fā)明的血液基因組DNA提取方法在10分鐘內(nèi)提取血液基因組可用于熒光PCR擴(kuò)增檢測(cè),主要步驟如下,。(1)將**管顛倒混勻后,,吸取100μL血液或者吸取100μL口腔拭子樣本保存液至,加入200μL的核酸釋放劑,,渦旋混勻,,然后5000g離心30s,棄上清,,獲得細(xì)胞沉淀,。(2)將步驟(1)中得到的血液細(xì)胞沉淀中再加入200μL核酸釋放劑,渦旋振蕩1min,至沉淀完全散開,,然后5000g離心30s,,棄上清。(口腔拭子樣本則無(wú)需進(jìn)行此步驟),。(3)向步驟(2)所獲得的沉淀中加入50μL核酸釋放劑,,渦旋振蕩1~2min;室溫放置5min,,12000g離心30s,,取上清液即為提取的基因組DNA;所述的核酸釋放劑組成為20mM~80mM的氫氧化鈉溶液,、~,、~、~,、~***鈉,、~3%甲酰胺;所述熒光PCR反應(yīng)液組成為ROX,、TaqMan探針,、引物、dNTP,、dUTP,、UDG、BSA,、聚合酶及緩沖液,。附圖說(shuō)明圖1為實(shí)例1檢測(cè)的8份血液樣本平行實(shí)驗(yàn)的熒光擴(kuò)增曲線圖。圖2~圖5為實(shí)施例1提供的四份血液樣本的三次平行實(shí)驗(yàn)的熒光擴(kuò)增曲線圖,。圖6為實(shí)施例2對(duì)比實(shí)例1提供的對(duì)8份血液樣本平行實(shí)驗(yàn)的熒光擴(kuò)增曲線圖,。具體實(shí)施方式為了使本領(lǐng)域技術(shù)領(lǐng)域人員更好地理解本申請(qǐng)中的技術(shù)方案。吉林口腔拭子口腔拭子源頭廠家然后用同樣的方法在右側(cè)臉頰部/右側(cè)上下牙床處粘膜處進(jìn)行第二根拭子的取樣,。

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觀察發(fā)育情況,,**分布及多少,有無(wú)畸形,,外陰皮膚有無(wú)紅疹,、膿腫、血腫,、包塊,、濕疹、潰瘍,、糜爛,、抓痕、外傷、色素脫失,、萎縮,、增厚等,前庭部有無(wú)充血,、潰爛,、贅生物,尿道口有無(wú)分泌物及贅生物,,處女膜有無(wú)裂痕,會(huì)**有無(wú)裂傷及損傷程度,,前庭大腺有無(wú)腫大,、觸痛,開口處有無(wú)充血,、***及膿性分泌物,,必要時(shí)囑患者用力屏氣以增加腹壓,觀察有無(wú)應(yīng)力性尿失禁,、陰道前后壁膨出及子宮脫垂,,并注意其程度。中文名婦科拭子外文名DisposableCervicalSampler別名簡(jiǎn)稱婦科采樣刷,,婦科采樣器***使用婦科門診,體檢中心,,婦科檢查對(duì)象女性檢查項(xiàng)目外**檢查目錄1婦科試子介紹2婦科檢查項(xiàng)目婦科拭子?jì)D科試子介紹編輯別名簡(jiǎn)稱:婦科拭子(婦科采樣刷,婦科采樣器)[1]英文名:DisposableCervicalSampler婦科拭子***使用于婦科門診,體檢中心,,婦科檢查用于婦科檢查婦科拭子?jì)D科檢查項(xiàng)目編輯外**檢查陰道檢查檢查者手持窺陰器蘸溫開水,,以左手分開兩側(cè)大小**,右手將窺陰器沿陰道后壁斜向插入,,邊進(jìn)邊旋轉(zhuǎn)成正位,,緩慢張開兩葉,暴露宮頸,。注意陰道壁粘膜色澤,、皺襞,有無(wú)充血,、出血,、裂傷、潰瘍,、贅生物,。

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將拭子伸進(jìn)口腔,在口腔內(nèi)壁來(lái)回掛拭多次,然后將拭子自然晾干,包裝起來(lái)送往檢測(cè)機(jī)構(gòu)檢測(cè)即可,。吉林口腔拭子口腔拭子源頭廠家

    本發(fā)明涉及一種快速提取血液和口腔拭子基因組DNA的方法,。背景技術(shù):近年來(lái),隨著熒光PCR技術(shù)的不斷成熟,。該技術(shù)在科研及檢驗(yàn)領(lǐng)域得到了應(yīng)用,,成為分子生物學(xué)領(lǐng)域不可或缺的一項(xiàng)重要技術(shù)。在進(jìn)行遺傳背景分析過(guò)程中,,血液,、唾液和口腔拭子成為重要的生物分析樣本,。但是,由于血液,、唾液和口腔拭子中存在有很多PCR反應(yīng)物,,例如血液中含有血紅素,蛋白質(zhì),,脂肪,,抗凝劑等,唾液和口腔拭子含有蛋白質(zhì),,脂肪,,抗凝劑等,使得用血液,、唾液和口腔拭子直接進(jìn)行熒光PCR反應(yīng)變得尤為困難,。因此,現(xiàn)在臨床上往往先要從血液,、唾液和口腔拭子樣本中純化出DNA,,才能進(jìn)行樣本的DNA擴(kuò)增。提取血液,、唾液和口腔拭子基因組的方法種類非常多,,傳統(tǒng)酚氯仿抽提法,高鹽鹽析法,,模離心柱吸附法,磁珠法,,等等,。經(jīng)典的血液核酸提取方法包括幾個(gè)過(guò)程。1.通過(guò)低滲液漲破紅細(xì)胞,,將血紅素物質(zhì)釋放出來(lái),,然后離心,清洗去除血紅素,。2.通過(guò)裂解液裂解白細(xì)胞,,釋放核酸物質(zhì)。3.通過(guò)離心柱或納米磁珠特異性吸附核酸物質(zhì),,去除其他雜質(zhì),。4.通過(guò)漂洗液洗掉掛在離心柱或納米磁珠表面的化學(xué)試劑殘留和蛋白殘留。5.加入洗脫液將核酸從離心柱或納米磁珠上洗脫下來(lái),。 吉林口腔拭子口腔拭子源頭廠家

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