細胞培養(yǎng)基的種類按照細胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史，細胞培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液,、天然細胞培養(yǎng)基、合成細胞培養(yǎng)基,、無血清細胞培養(yǎng)基,、限定化學(xué)成分細胞培養(yǎng)基等幾大種類。（balancedsaltsolution,，BSS）BSS主要是由無機鹽,、葡萄糖組成，它的作用是維持細胞滲透壓平衡,，保持pH穩(wěn)定及提供簡單的營養(yǎng),。其主要用于細胞的漂洗、配制其他試劑等,。幾種常用的BSS配方如下（表1-1）,。D-Hank's與Hank's的一個主要區(qū)別是前者不含有Ca2+和Mg2+，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液,。因為Ca2+,、Mg2+是細胞膜的重要組成成份，參與細胞粘附等功能，使用不含Ca2+,、Mg2+的BSS可避免細胞結(jié)團,。此外，Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎(chǔ)溶液,，前者緩沖能力較弱,，適合于密閉培養(yǎng)；后者緩沖能力較強,，適合于5%CO2的培養(yǎng)條件,。表1-1幾種常用的BSS配方。McCoy’s5A培養(yǎng)基是改良的Basal Medium5A,，McCoy’s 5A含有還原型谷胱甘肽,、細菌蛋白胨以及高濃度的葡萄糖。安徽細胞培養(yǎng)基源頭廠家

    可在血清含量低時用,，適用于克隆化培養(yǎng),。F12適用于CHO細胞，也是無血清細胞培養(yǎng)基中常用的基礎(chǔ)細胞培養(yǎng)基,。DMEM/F12細胞培養(yǎng)基將DMEM和F12按照1:1比例混合,，混合后營養(yǎng)成份豐富，血清使用量也減少,。常作為開發(fā)無血清細胞培養(yǎng)基時的基礎(chǔ)細胞培養(yǎng)基,。與天然培養(yǎng)基相比，有些天然的未知成分尚無法用已知的化學(xué)成分所替代,，因此,，細胞培養(yǎng)中使用合成培養(yǎng)基時必須加入一定量的天然培養(yǎng)基成分，以克服合成培養(yǎng)基的不足,。普遍的做法是添加5~10%的血清,，這樣才能維持細胞活力，促進細胞增殖,。針對不同的動物細胞,，現(xiàn)已開發(fā)了多種商業(yè)化、個性化的低血清細胞培養(yǎng)基配方,，營養(yǎng)成份更加豐富,，血清使用量可降低至1～3%，由此可減少了血清等動物來源成份對生物制品安全性的影響,。無血清細胞培養(yǎng)基（serumfreemedium,，SFM）經(jīng)歷了天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基后,，無血清培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)成為當(dāng)今細胞培養(yǎng)領(lǐng)域的一大趨勢,。采用無血清培養(yǎng)可降低生產(chǎn)成本,，簡化分離純化步驟，避免病毒污染造成的危害,。無血清培養(yǎng)基,，一般是在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，加入成份完全明確的或部分明確的血清替代成份,，達到既能滿足動物細胞培養(yǎng)的要求,，又能有效克服使用血清所帶來問題的目的。實驗細胞培養(yǎng)基供應(yīng)商家M199含有獨特的成分,，包括腺嘌呤,、腺苷、次黃嘌呤,、胸腺嘧啶,、以及其他的維生素。

    培養(yǎng)液的滲透壓是一個非常重要的因素,細胞通?？赡褪?60mOsm/kg～320mOsm/kg,。標準培養(yǎng)液的滲透壓在此范圍內(nèi)波動。特別注意：向培養(yǎng)液中加入其它物質(zhì)有可能會明顯改變培養(yǎng)液的滲透壓,，特別是溶于強酸或強堿中的物質(zhì),。向培養(yǎng)液中添加HEPES時需按以下方法調(diào)節(jié)鈉離子濃度。緩沖系統(tǒng)大多數(shù)細胞所需pH在-,。但是,，細胞培養(yǎng)適pH值隨培養(yǎng)的細胞種類不同而不同。成纖維細胞喜歡較高pH(-),而傳代轉(zhuǎn)化細胞系則需要偏酸pH(-),。由于多數(shù)培養(yǎng)液靠碳酸氫鈉（NaHCO3）與CO2體系進行緩沖,，因此，氣相中的CO2濃度應(yīng)與培養(yǎng)液中碳酸氫鈉濃度相平衡,。如果氣相或培養(yǎng)箱空氣中CO2濃度設(shè)定在5％,，培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量為；如果CO2濃度維持在10％,，培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量為。細胞培養(yǎng)瓶蓋不應(yīng)擰得太緊,，以保證氣體交換,。HEPES是一種非離子緩沖液，在pH-范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力,，但是非常昂貴,，在高濃度時對一些細胞可能有毒。HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉（）共用,，以抵消因額外加入HEPES引起的滲透壓增加,。在這種培養(yǎng)條件下，細胞培養(yǎng)瓶的蓋子應(yīng)擰緊，以防止培養(yǎng)液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中,。大多數(shù)培養(yǎng)液中含有酚紅作為pH指示劑,，酸性培養(yǎng)液呈橙黃色，堿性培養(yǎng)液呈深紅色,。

    L-谷氨酰胺（Glutamine）是細胞培養(yǎng)中所必要的一種營養(yǎng),，但其在溶液中不安定，會自發(fā)降解生成氨和焦谷氨酸,，其中氨對細胞危害,；而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中格外的安定，不會自發(fā)的降解,。細胞運用其機制是：在細胞培訓(xùn)時,，細胞會日益向培養(yǎng)液中獲釋一種肽酶，將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,，而后細胞會將這兩種水解產(chǎn)物吸收運用,。細胞運用L-丙氨酰-L-谷氨酰的過程與流加培養(yǎng)方針相像，連續(xù)的將低濃度水準的L-谷氨酰胺加入到培養(yǎng)液中,，從而提高了L-谷氨酰胺的利用率,，且不會生成剩余的氨，更有利于細胞的生長,。L-丙氨酰-L-谷氨?？梢匀《饶柕腖-谷氨酰胺，適用于所有的細胞,，幾乎無須適應(yīng),，并且可以延長細胞的培養(yǎng)時間，縮減傳代次數(shù),，即節(jié)約了時間也節(jié)省了錢財,。與添加L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基中培訓(xùn)的細胞相比之下，活性減低得更慢,。延滯期稍為延長的緣故是肽酶的釋放和二肽的消化需一定的時間,。NEAA（非須要氨基酸），是在MEM培養(yǎng)基的基本上添加L-丙氨酸,、L-谷氨酸,、L-天（門）冬酰胺、L-天（門）冬氨酸,、L-脯氨酸,、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA，能下降細胞培育時細胞自身生產(chǎn)非須要氨基酸的副作用,，有效性推動細胞增殖代謝,。葡萄糖可以根據(jù)研究需,。William’s E培養(yǎng)基主要用于大鼠肝上皮細胞的長期培養(yǎng)，也可用于其他哺乳動物的肝細胞培養(yǎng),。

    Leibovitz’sL-15培養(yǎng)基的緩沖系統(tǒng)由磷酸鹽和游離堿基氨基酸組成,，代替了傳統(tǒng)的碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng)，同時,，用半乳糖和**酸鈉代替葡萄糖可以防止酸性代謝副產(chǎn)物的形成,，有助于維持培養(yǎng)液PH的穩(wěn)定，適合用于非CO2平衡環(huán)境的細胞培養(yǎng),。Leibovitz’sL-15培養(yǎng)基適用于猴腎細胞和HEP-2的培養(yǎng),、原代（如胚胎和成人組織）細胞分離、多種病毒的培養(yǎng)以及神經(jīng)元的培養(yǎng)等,。NEAA（非必須氨基酸）,，是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸,、L-天（門）冬酰胺,、L-天（門）冬氨酸、L-脯氨酸,、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA,，能降低細胞培養(yǎng)時細胞自身生產(chǎn)非必須氨基酸的副作用，有效促進細胞增殖代謝,。酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑,，用以持續(xù)監(jiān)測培養(yǎng)液的酸堿度，在低PH值時酚紅使培養(yǎng)液呈黃色,，而較高的PH值時使培養(yǎng)液呈紫色,，PH值～，適合細胞培養(yǎng),。但酚紅也有一些缺點,，研究表明酚紅可以模擬固醇類（特別是雌）的作用，因此在用到雌敏感的細胞時（如乳腺組織）,，較好使用不含酚紅的培養(yǎng)基,。酚紅會干擾流式細胞分析時候的檢測。此外,，一些無血清培養(yǎng)基的配方中若存在酚紅會干擾鈉-鉀平衡,。 Ham’s F-12常作為無血清培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)液，添加血清后也廣泛應(yīng)用于ai細胞和原代細胞的培養(yǎng),。河北RPMI-1640細胞培養(yǎng)基批發(fā)廠

M199有兩種平衡鹽成分，Earle’s鹽成分常用于CO2環(huán)境,，Hank’s鹽成分用于非CO2的環(huán)境,。安徽細胞培養(yǎng)基源頭廠家

    RPMI-1640細胞培養(yǎng)基RPMI-1640是Moore等人于1967年在美國紐約州法羅市的羅斯韋爾公園紀念研究所（RoswellParkMemorialInstitute,RPMI）開發(fā)出來的,，RPMI是該研究所開發(fā)的一類細胞培養(yǎng)基，1640是培養(yǎng)基代號,。RPMI-1640是改進型的McCoy‘s5A培養(yǎng)基,，使用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng)，與大多數(shù)哺乳動物細胞培養(yǎng)基不同的是其典型的PH8的配方,。RPMI-1640培養(yǎng)基常初是為淋巴細胞培養(yǎng)專門設(shè)計的,，現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于各種正常細胞和ai細胞的培養(yǎng)，包括HeLa細胞,、Jurkat細胞,、MCF-7細胞、PC12細胞,、PBMC細胞,、星形膠質(zhì)細胞和ai細胞，是使用常為廣的培養(yǎng)基之一,。RPMIRPMI1640培養(yǎng)基相比其他培養(yǎng)基之所以具有獨特的效果,，是因為其中含有還原劑谷胱甘肽和高濃度的維生素。RPMI1640培養(yǎng)基含有生物素,、維生素B12以及PABA,，這些成分是Eagle’sMEM和DMEM所不具備的。針對廣的細胞培養(yǎng)應(yīng)用,，我們提供多種組分的RPMI1640改良培養(yǎng)基,。RPMI-1640細胞培養(yǎng)基L-谷氨酰胺（Glutamine）是細胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)元素，但其在溶液中不穩(wěn)定,，會自發(fā)降解,，不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基，可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量,，在使用時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細胞的生長,。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。

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