酚紅葡萄糖肉湯(PhenolRedGlucoseBroth)是一種常用的微生物學(xué)培養(yǎng)基,主要用于鑒定細(xì)菌是否具有發(fā)酵葡萄糖的能力,。以下是它的一些主要特點(diǎn):1.**成分**:酚紅葡萄糖肉湯的配方包含月示胨(或稱為蛋白胨)、牛肉浸粉、氯化鈉,、葡萄糖和酚紅。其中,,月示胨和牛肉浸粉提供氮源,、維生素和生長因子;葡萄糖作為可發(fā)酵的糖類,;氯化鈉維持滲透壓,;酚紅作為pH指示劑,。2.**pH值**:該培養(yǎng)基的pH值通常調(diào)節(jié)在7.4±0.1(25℃)。3.**滅菌處理**:制備好的培養(yǎng)基需要進(jìn)行121℃高壓滅菌10-15分鐘,。4.**使用方法**:稱取培養(yǎng)基粉末,,溶解于蒸餾水中,分裝試管,,每管3ml,。5.**質(zhì)量控制**:接種蠟樣芽孢桿菌后,在厭氧條件下35℃培養(yǎng)24小時,,培養(yǎng)基由紅色變?yōu)辄S色,,表明細(xì)菌發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸。6.**用途**:酚紅葡萄糖肉湯用于蠟樣芽孢桿菌葡萄糖分解試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn)),,也用于檢測大腸菌群,。7.**結(jié)果觀察**:如果培養(yǎng)基顏色由紅色變?yōu)辄S色,說明細(xì)菌發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸,;如果培養(yǎng)基顏色不變或紅色加深,,說明該微生物葡萄糖發(fā)酵陰性。8.**儲存條件**:避光,,密封,,陰涼干燥處保存。不同的微生物對培養(yǎng)基的要求差異較大,,因此在選擇水瓊脂培養(yǎng)基時需要考慮具體的研究目的和微生物的特性,。MD平板
細(xì)菌固體分離培養(yǎng)基是用于分離和培養(yǎng)細(xì)菌的固體培養(yǎng)基,通常包含瓊脂作為凝固劑,。這種培養(yǎng)基能夠?yàn)榧?xì)菌提供穩(wěn)定的生長環(huán)境,,并有助于觀察微生物的菌落特征。以下是細(xì)菌固體分離培養(yǎng)基的一些關(guān)鍵特點(diǎn):1.**成分**:細(xì)菌固體分離培養(yǎng)基通常包含蛋白質(zhì)來源(如蛋白胨),、碳源(如葡萄糖),、無機(jī)鹽(如氯化鈉)和瓊脂等。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值對細(xì)菌的生長至關(guān)重要,,通常需要調(diào)節(jié)至適宜的pH值,,如7.3±0.1(25℃)。3.**滅菌**:培養(yǎng)基在制備過程中需要進(jìn)行高壓滅菌,,通常是121℃滅菌15分鐘或115℃滅菌30分鐘,。4.**用途**:主要用于細(xì)菌的分離、計數(shù)和鑒定,。通過稀釋倒平板法,、涂布平板法或平板劃線法等技術(shù),可以從混合的微生物群體中分離出單一的細(xì)菌菌落。5.**保存**:培養(yǎng)基通常在室溫,、避光,、干燥的條件下保存。6.**操作**:在無菌條件下操作,,避免污染,。使用時,將培養(yǎng)基加熱至液態(tài),,然后倒入無菌培養(yǎng)皿中,,冷卻凝固后即可用于接種細(xì)菌。7.**菌落特征**:不同種類的細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上形成的菌落具有特定的形態(tài)特征,,如大小,、形狀、顏色,、邊緣等,,這些特征可以用于細(xì)菌的鑒定。綜合蘇通瓊脂結(jié)核桿菌的增菌培養(yǎng)平板木醋桿菌的培養(yǎng)基通常需要含有適量的碳源,,如葡萄糖,、蔗糖等,以提供細(xì)菌生長和合成細(xì)菌纖維素所需的能量,。
使用TCBS瓊脂進(jìn)行細(xì)菌分離實(shí)驗(yàn)的步驟如下:1.**準(zhǔn)備工作**:-確保實(shí)驗(yàn)室無菌操作條件,,穿戴適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)服和手套。-準(zhǔn)備無菌的接種環(huán),、涂布器,、無菌吸管和移液器等工具。2.**配制培養(yǎng)基**:-按照培養(yǎng)基包裝上的說明,,稱取適量的TCBS瓊脂粉末,。-將稱取的TCBS瓊脂粉末加入到適量的蒸餾水中,通常為100mL,。-將混合物加熱至沸騰,,以確保瓊脂完全溶解。3.**冷卻和傾注平板**:-將溶解好的培養(yǎng)基冷卻至50℃左右(避免過熱,,以免殺死細(xì)菌),此時瓊脂應(yīng)該仍然是液體狀態(tài),。-將冷卻的培養(yǎng)基倒入無菌的培養(yǎng)皿中,,一般傾注量為15-20mL/平皿。-等待瓊脂凝固,,形成固體培養(yǎng)基平板,。4.**接種樣品**:-使用無菌操作,將待檢測的樣品涂布或劃線接種到TCBS瓊脂平板上。-可以使用稀釋涂布法,、螺旋接種法或其他適當(dāng)?shù)慕臃N方法,。5.**培養(yǎng)**:-將接種后的平板倒置,放入恒溫培養(yǎng)箱中,。-根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求,,通常在36±1℃下培養(yǎng)18-24小時。6.**觀察和選擇菌落**:-培養(yǎng)結(jié)束后,,觀察平板上的生長情況,,記錄不同類型菌落的特征。-選擇性地挑選出特定的菌落,,如藍(lán)綠色或黃色菌落,,這些可能是目標(biāo)弧菌。
Karmali氏彎曲桿菌瓊脂培養(yǎng)基是一種專門用于分離和培養(yǎng)彎曲桿菌屬(Campylobacter)細(xì)菌的培養(yǎng)基,,尤其是空腸彎曲桿菌(Campylobacterjejuni)和大腸彎曲桿菌(Campylobactercoli),。以下是它的一些特點(diǎn):1.**無血培養(yǎng)基**:Karmali氏培養(yǎng)基是一種無血的培養(yǎng)基,這使得它在某些應(yīng)用中比需要添加血液的培養(yǎng)基更為方便和經(jīng)濟(jì),。2.**選擇性培養(yǎng)**:該培養(yǎng)基含有萬古霉素(vancomycin)和兩性霉素B(amphotericinB)等選擇性添加劑,,這些添加劑有助于抑制其他非目標(biāo)微生物的生長,從而提高目標(biāo)彎曲桿菌的分離率,。3.**微需氧環(huán)境**:彎曲桿菌是微需氧菌,,Karmali氏培養(yǎng)基通常在微需氧條件下使用,這有助于彎曲桿菌的生長,。4.**菌落特征**:在42°C下培養(yǎng)42小時后,,空腸彎曲桿菌菌株在這種培養(yǎng)基上通常產(chǎn)生灰色、濕潤,、平鋪的菌落,,這些特征有助于識別彎曲桿菌。5.**配方**:Karmali氏彎曲桿菌瓊脂培養(yǎng)基的基礎(chǔ)配方包含特殊蛋白胨,、玉米淀粉,、氯化鈉、活性碳和血晶素(hemin),,以及瓊脂作為固化劑,。這些成分為細(xì)菌的生長提供了必需的營養(yǎng)物質(zhì),并且活性碳有助于中和代謝產(chǎn)生的產(chǎn)物,。6.**應(yīng)用**:這種培養(yǎng)基被ISO委員會推薦使用,,適用于從食品、動物飼料和臨床樣本中分離彎曲桿菌,。由于雙歧桿菌是厭氧菌,,PYG培養(yǎng)基需要在厭氧或微需氧條件下使用,,以確保細(xì)菌的正常生長 。
TYC培養(yǎng)基(TryptoneYeastCystineMedium)是一種用于分離口腔中鏈球菌(Streptococcusspp)的選擇性培養(yǎng)基,。除了用于分離血鏈球菌外,,TYC培養(yǎng)基也可以用于制備變形鏈球菌(Streptococcusmutans)的分離培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基的配方包含胰蛋白胨,、酵母浸粉,、L-胱氨酸、亞硫酸鈉,、氯化鈉,、磷酸氫二鈉、碳酸氫鈉,、無水乙酸鈉和蔗糖等成分,,瓊脂作為凝固劑,pH值調(diào)整至7.3±0.2(25℃),。TYC培養(yǎng)基通過其成分提供了細(xì)菌生長所需的氮源,、碳源、維生素和生長因子,。其中,,L-胱氨酸和亞硫酸鈉有助于抑制某些非目標(biāo)細(xì)菌的生長,而促進(jìn)目標(biāo)鏈球菌的生長,。此外,,TYC培養(yǎng)基也可以添加桿菌肽(0.2U/ml)以增加其選擇性。在實(shí)驗(yàn)室中,,TYC培養(yǎng)基通常按照以下方法配制:1.稱取98.0g培養(yǎng)基粉末,,加入1000mL蒸餾水或去離子水中。2.加熱煮沸至完全溶解,。3.分裝后,,在121℃高壓下滅菌15分鐘。4.滅菌結(jié)束后搖勻,,以防瓊脂沉積于器皿底部而凝固,。5.如有需要,培養(yǎng)基冷卻至50~55℃時,,可選擇性添加過濾除菌的桿菌肽0.2U/ml以增加選擇性,。TYC培養(yǎng)基在微生物學(xué)研究和臨床診斷中具有重要應(yīng)用,特別是在口腔微生物的檢測和研究中,。水瓊脂培養(yǎng)基的凝膠結(jié)構(gòu)在不同溫度下可能會發(fā)生變化,,因此需要根據(jù)微生物的特性調(diào)控培養(yǎng)溫度。三糖鐵(TSI)瓊脂平板
PYG培養(yǎng)基的干粉應(yīng)在避光,、干燥處保存,,未開封的保質(zhì)期通常為三年。使用后應(yīng)立即旋緊瓶蓋,,避免吸潮結(jié)塊 ,。MD平板
M-遠(yuǎn)藤氏防腐培養(yǎng)基(M-EndoAnti-corrosionMedium)是一種用于微生物檢測的培養(yǎng)基,主要用于水中大腸菌群的膜過濾法檢測,。以下是它的一些特點(diǎn)和配制方法:1.**配方**:M-遠(yuǎn)藤氏防腐培養(yǎng)基的配方包含胰胨,、蛋白胨、酵母浸粉,、乳糖,、氯化鈉、磷酸氫二鉀,、磷酸二氫鉀,、硫酸十二烷基鈉、去氧膽酸鈉和亞硫酸鈉等成分,,以及作為指示劑的堿性品紅,。2.**配制方法**:通常稱取一定量的培養(yǎng)基粉末,加入指定量的無水乙醇和蒸餾水,,加熱至沸騰以幫助溶解,。配制好的培養(yǎng)基通常需要在121℃下高壓滅菌15分鐘。3.**用途**:這種培養(yǎng)基專門用于檢測飲用水,、廢水,、乳制品和食品中的大腸菌群,是執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)方法的一部分,,如美國公共衛(wèi)生協(xié)會(APHA)所推薦的方法,。4.**貯藏條件**:配制好的培養(yǎng)基通常需要在2-8°C下避光保存,以保持其有效性,。5.**結(jié)果觀察**:在M-遠(yuǎn)藤氏防腐培養(yǎng)基上,,乳糖發(fā)酵型的大腸桿菌和大腸菌群會產(chǎn)生紅色至深紅色的菌落,帶有金色金屬光澤,,而非乳糖發(fā)酵型微生物則產(chǎn)生無色透明菌落,。6.**產(chǎn)品規(guī)格**:M-遠(yuǎn)藤氏防腐培養(yǎng)基通常以250g/瓶的規(guī)格出售,并且有較長的保存期限,,一般為3年,。7.**注意事項(xiàng)**:在配制和使用過程中,應(yīng)避免攝入,、吸入和皮膚接觸,,以確保操作安全。MD平板