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來源: 發(fā)布時間:2022-04-04

定量蛋白質(zhì)組學方法學介紹:Label-free:Label-free定量,,即非標記的定量蛋白質(zhì)組學,,不需要對比較樣本做特定標記處理,只需要比較特定肽段/蛋白在不同樣品間的色譜質(zhì)譜響應信號便可得到樣品間蛋白表達量的變化,,通常用于分析大規(guī)模蛋白鑒定和定量時所產(chǎn)生的質(zhì)譜數(shù)據(jù)。Label-free定量不需要標記處理,,操作簡單,,可以做任意樣本的總蛋白質(zhì)差異定量,但對實驗操作的穩(wěn)定性,、重復性要求較高,,準確性也較標記定量差。因此,,Label-free技術(shù)適合于大樣本量的定量比較,,以及對無法用標記定量實現(xiàn)的實驗設計。iTRAQ定量是目前定量蛋白質(zhì)組學應用比較普遍的技術(shù),。深圳定量乙?;鞍踪|(zhì)組學價格

蛋白組學研究怎么做?PRM:平行反應監(jiān)測(ParallelReactionMonitoring)是一種基于高分辨,、高精度質(zhì)譜的離子監(jiān)視技術(shù),,能夠?qū)δ繕说鞍踪|(zhì)、目標肽段(如發(fā)生翻譯后修飾的肽段)進行選擇性檢測,,從而實現(xiàn)對目標蛋白質(zhì)/肽段進行一定定量,,因此也被稱之為基于液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)的WesternBlot(LC-MSMSbasedWesternBlot,L-WB)。PRM技術(shù)基于Q-Orbitrap為表示的高分辨,、高精度質(zhì)譜平臺,,首先利用四級桿質(zhì)量分析器的選擇能力,用Q1選擇目標肽段的母離子,,隨后在Collisioncell中對母離子進行碎裂,,之后利用Orbitrap分析器在二級質(zhì)譜中檢測所選擇的母離子窗口內(nèi)的所有碎片信息。這樣即可對復雜樣本中的目標蛋白質(zhì)/肽段進行準確地特異性分析,。武漢4D定量蛋白質(zhì)組學主要技術(shù)蛋白質(zhì)組的研究能為生命活動規(guī)律提供物質(zhì)基礎,。

蛋白質(zhì)組學在醫(yī)療和健康方面有什么應用?基于質(zhì)譜的蛋白質(zhì)組學是目前比較主流的高通量蛋白質(zhì)研究手段,,當前在醫(yī)療健康方面的應用主要集中于基礎研究和轉(zhuǎn)化醫(yī)學,。隨著質(zhì)譜、系統(tǒng)生物學,、生物信息學等相關(guān)學科的發(fā)展,,我認為今后我們會更多地在現(xiàn)實生活中見到蛋白質(zhì)組學相關(guān)的應用。如定量胰島素,、鑒定血紅蛋白氨基酸突變(鐮刀形紅細胞癥),、糖化血紅蛋白比例測定等,。從測試體量估計,應該遠小于1%的ELISA測試量,。由于成本和通量等原因,,蛋白質(zhì)組學技術(shù)并不如ELISA適合大量的日常分析。但對于一些分析有問題的項目,,采用基于質(zhì)譜(或二維膠等手段)的蛋白質(zhì)組學有獨特的技術(shù)優(yōu)勢,。另外,蛋白質(zhì)組學方法開發(fā)和驗證周期短,,在中高級特殊應用(如極少使用的特殊蛋白指標臨床檢測,、未知疾病研究和控制)中也有其獨特優(yōu)勢。

蛋白質(zhì)組的研究不但能為生命活動規(guī)律提供物質(zhì)基礎,,也能為眾多種疾病機理的闡明及攻克提供理論根據(jù)和解決途徑,。通過對正常個體及病理個體間的蛋白質(zhì)組比較分析,我們可以找到某些“疾病特異性的蛋白質(zhì)分子”,,它們可成為新藥物設計的分子靶點,,或者也會為疾病的早期診斷提供分子標志。確實,,那些世界范圍內(nèi)銷路比較好的藥物本身是蛋白質(zhì)或其作用靶點為某種蛋白質(zhì)分子,。因此,蛋白質(zhì)組學研究不只是探索生命奧秘的必須工作,,也能為人類健康事業(yè)帶來巨大的利益,。蛋白質(zhì)組學的研究是生命科學進入后基因時代的特征。蛋白質(zhì)組學技術(shù)有生物質(zhì)譜,。

蛋白質(zhì)組學發(fā)展趨勢:1,、基礎研究方面:近兩年來蛋白質(zhì)組研究技術(shù)已被應用到各種生命科學領域,如細胞生物學,、神經(jīng)生物學等,。在研究對象上,覆蓋了原核微生物,、真核微生物,、植物和動物等范圍,涉及到各種重要的生物學現(xiàn)象,,如信號轉(zhuǎn)導,、細胞分化、蛋白質(zhì)折疊等等,。在未來的發(fā)展中,,蛋白質(zhì)組學的研究領域?qū)⒏悠毡椤?、應用研究方面:蛋白質(zhì)組學將成為尋找疾病分子標記和藥物靶標比較有效的方法之一,。在對早老性癡呆等人類重大疾病的臨床診斷和治理方面蛋白質(zhì)組技術(shù)也有十分誘人的前景,,目前國際上許多大型藥物公司正投入大量的人力和物力進行蛋白質(zhì)組學方面的應用性研究,。蛋白質(zhì)組學的研究方法將出現(xiàn)多種技術(shù)并存。江蘇蛋白質(zhì)組學研究方法

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