乙?；揎椀鞍捉M學(xué)應(yīng)用方向有什么,？1,、基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、臨床診斷：生物標(biāo)志物,，疾病機(jī)理機(jī)制,，疾病分型，個(gè)性化治理等,；2,、生物醫(yī)藥：藥物作用機(jī)理，藥效評(píng)價(jià),，藥物開(kāi)發(fā)等,；3、微生物領(lǐng)域：致病機(jī)理,，耐藥機(jī)制,，病原體-宿主相互作用研究等；4,、海洋水產(chǎn)：漁業(yè)資源,，海水養(yǎng)殖，漁業(yè)環(huán)境與水產(chǎn)品安全等,；5,、生物能源、環(huán)境科學(xué)領(lǐng)域：發(fā)酵過(guò)程優(yōu)化,，生物燃料生產(chǎn),，環(huán)境危定風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估研究等；6,、食品營(yíng)養(yǎng)：食品儲(chǔ)藏及加工條件優(yōu)化,，食品組分及品質(zhì)鑒定，功能性食品開(kāi)發(fā),，食品安全監(jiān)檢測(cè)等,。蛋白質(zhì)翻譯后修飾（PTMs）是指蛋白質(zhì)在翻譯中或翻譯后的化學(xué)修飾過(guò)程。南京琥珀?；揎椀鞍踪|(zhì)組學(xué)價(jià)格

蛋白質(zhì)糖基化修飾組學(xué)技術(shù)怎么確定位點(diǎn),？蛋白質(zhì)經(jīng)過(guò)酶解后利用凝集素（lectin）富集N-糖基化肽段，然后用N-糖酰胺酶（PNGase）在H218O中切除連接在天冬酰胺殘基（Asn）上的糖鏈,。該處理致使Asn分子量增加2.9890Da,。之后用高精度LC-MS質(zhì)譜儀檢測(cè)脫糖后的肽段，并通過(guò)MASCOT軟件檢索數(shù)據(jù)庫(kù),，確認(rèn)脫糖后分子量與其理論分子量的變化以及糖基化修飾肽段的序列,，從而確定該蛋白質(zhì)的N-糖基化位點(diǎn)。琥珀?；揎椀鞍踪|(zhì)組技術(shù)特點(diǎn)：采用主流抗體親和富集方法,，特異性高，富集效率好,。濟(jì)南亞硝基化修飾蛋白質(zhì)組學(xué)類(lèi)型乙?；揎検求w內(nèi)保守的可逆轉(zhuǎn)的蛋白修飾。

乙?；揎椀鞍捉M學(xué)實(shí)驗(yàn)流程：1）組織/細(xì)胞破碎,，提取蛋白質(zhì)；2）蛋白酶解成多肽片段,；3）對(duì)多肽片段進(jìn)行 iTRAQ 標(biāo)記,；4）高效特異性乙酰化抗體富集乙?；揎楇亩?；5）使用 LC-MS/MS 對(duì)富集的乙酰化肽段進(jìn)行序列分析,；5）數(shù)據(jù)分析,，比對(duì)不同樣本中蛋白乙酰化修飾水平差異,，并對(duì)產(chǎn)生變化的生物學(xué)意義進(jìn)行解釋,。乙酰化是一個(gè)普遍而重要的蛋白質(zhì)翻譯后修飾,，不僅集中在對(duì)細(xì)胞染色體結(jié)構(gòu)的影響以及對(duì)核內(nèi)轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子方面,，而且還影響參與細(xì)胞周期和新陳代謝、肌動(dòng)蛋白聚合控制及多聚谷氨酰胺疾病等方方面面,。乙?；粌H存在于真核細(xì)胞中，而且越來(lái)越多的證據(jù)也表明乙?；瑯佑绊懺S多原核細(xì)胞的生理生化過(guò)程,。

蛋白質(zhì)翻譯后修飾的重要性：翻譯后修飾可以發(fā)生在蛋白質(zhì)生命周期的任何階段。例如,，許多蛋白質(zhì)在翻譯完成后不久就被修飾,，以介導(dǎo)適當(dāng)?shù)牡鞍踪|(zhì)折疊或穩(wěn)定，或?qū)⑿律鞍踪|(zhì)引導(dǎo)到不同的細(xì)胞區(qū)室（例如,，細(xì)胞核,、膜）,。折疊和定位完成后發(fā)生其他修飾，以刺激或滅活催化活性或以其他方式影響蛋白質(zhì)的生物活性,。蛋白質(zhì)也與靶向降解蛋白質(zhì)的標(biāo)簽共價(jià)連接,。除了單一的修飾外，蛋白質(zhì)通常還通過(guò)翻譯后切割和通過(guò)蛋白質(zhì)成熟的分步機(jī)制增加功能基團(tuán)的組合進(jìn)行修飾,。分析蛋白質(zhì)及其翻譯后修飾對(duì)于心臟病,、神經(jīng)退行性疾病和糖尿病的研究尤為重要。PTMs 的特征,，雖然具有挑戰(zhàn)性,，但提供了對(duì)病因?qū)W過(guò)程下的細(xì)胞功能的無(wú)價(jià)的洞察。在技術(shù)上,，研究翻譯后修飾蛋白的主要挑戰(zhàn)是開(kāi)發(fā)特異性的檢測(cè)和純化方法,。幸運(yùn)的是，這些技術(shù)障礙正在用各種新的和精煉的蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)來(lái)克服,。在蛋白翻譯后修飾方式的鑒定過(guò)程中,，蛋白會(huì)首先被酶切成肽段，然后進(jìn)入質(zhì)譜進(jìn)行分析,。

蛋白質(zhì)翻譯后修飾自中而下分析策略：自中而下的蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)可用于組蛋白修飾的分析,。樣品制備與普遍使用的自下而上的分析策略相同，直到得到純化的組蛋白,。提取組蛋白后,，用GluC進(jìn)行消化。然后用弱陽(yáng)離子交換/親水相互作用色譜（WCX-HILIC）與配備電子轉(zhuǎn)移解離（ETD）的高分辨率質(zhì)譜聯(lián)機(jī)聯(lián)用,，對(duì)樣品進(jìn)行理想的分離,。譜識(shí)別可以用傳統(tǒng)的軟件進(jìn)行，但是由于估計(jì)適當(dāng)?shù)腻e(cuò)誤發(fā)現(xiàn)率的問(wèn)題,，需要對(duì)結(jié)果進(jìn)行過(guò)濾,。自上而下分析策略：自上而下的技術(shù)可以直接引入完整的蛋白質(zhì)并在串聯(lián)質(zhì)譜儀上對(duì)其進(jìn)行片段化，不需要蛋白質(zhì)水解消化,。目前,，有兩種完全分離蛋白質(zhì)的方法：離線和在線。前者用四維分離法,，后者用WCX-HILIC,。蛋白質(zhì)磷酸化修飾可應(yīng)用于食品工業(yè)方面。河南蛋白質(zhì)磷酸化修飾組學(xué)

通過(guò)蛋白質(zhì)翻譯后修飾也進(jìn)一步增加了細(xì)胞通路機(jī)制和生命活動(dòng)的多樣性和復(fù)雜性,。南京琥珀?；揎椀鞍踪|(zhì)組學(xué)價(jià)格

泛素化修飾蛋白組學(xué)研究：泛素化修飾蛋白組學(xué)是一種重要的翻譯后修飾。泛素-蛋白酶體系統(tǒng)介導(dǎo)了真核生物體內(nèi)80%~85%的蛋白質(zhì)降解,。此外,，泛素化修飾還可以直接影響蛋白質(zhì)的活性和定位,，調(diào)控包括細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡,、轉(zhuǎn)錄調(diào)控,、DNA 損傷修復(fù)以及免疫應(yīng)答等在內(nèi)的多種細(xì)胞活動(dòng)。由于翻譯后修飾的蛋白質(zhì)在生物樣本中含量低,、動(dòng)態(tài)范圍廣，質(zhì)譜分析前需要對(duì)修飾進(jìn)行富集以提高其豐度,，然后利用傳統(tǒng)的定量蛋白組分析手段對(duì)富集得到的泛素化肽段樣品進(jìn)行定量分析,。南京琥珀酰化修飾蛋白質(zhì)組學(xué)價(jià)格