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深圳蛋白質琥珀?;揎椊M學分析研究

來源: 發(fā)布時間:2022-05-13

翻譯后修飾蛋白組分析:蛋白質翻譯后修飾是影響蛋白質功能并調節(jié)整個細胞過程的重要方式,,幾乎在每個細胞過程中都是不可或缺的。分析和鑒定翻譯后修飾蛋白質對揭示蛋白質的功能和深入了解各種生理現(xiàn)象具有重要意義,。大多數(shù)翻譯后修飾蛋白以低化學計量和豐度存在,,這限制了在分析全細胞裂解液時對其的檢測。蛋白質是各種細胞功能比較重要的執(zhí)行者,,其功能正常與否決定著生命活動能否有序,、高效的進行,而其中翻譯后修飾起著至關重要的作用,。翻譯后修飾改變了蛋白質中不同氨基酸殘基上的生物化學官能團,,進而改變其化學性質或結構,使得蛋白質具有更為復雜的結構和更為完善的功能,,實現(xiàn)更為精細的調節(jié),。蛋白質的翻譯后修飾過程極其復雜,已知的翻譯后修飾種類有20多種,。但其中較為常見的主要是磷酸化,、泛素化、SUMO化,、酰(含乙酰)化,、甲基化以及糖基化,。已知的蛋白質翻譯后修飾種類有20多種。深圳蛋白質琥珀?;揎椊M學分析研究

蛋白質翻譯后修飾介紹:蛋白質翻譯后修飾(PTMs)是指蛋白質在翻譯中或翻譯后的化學修飾過程,。蛋白質翻譯后修飾(PTMs)通過給蛋白質添加磷酸酯,乙酸酯,,酰胺基或甲基等官能團增加蛋白質組的功能多樣性,,并影響正常細胞生物學和發(fā)病機理的幾乎所有方面。蛋白質翻譯后修飾在許多細胞過程中起著關鍵作用,,如細胞分化,、蛋白質降解、信號傳導和調節(jié)過程,、基因表達調節(jié)以及蛋白質相互作用,。蛋白質翻譯后修飾PTMs通常包括磷酸化,糖基化,,泛素化,,亞硝基化,甲基化,,乙?;|化和蛋白水解,。因此,,PTM的特征(包括修飾類別和修飾位點)在細胞生物學以及疾病診斷和預防研究中至關重要,。濟南泛素化修飾PRM定量驗證乙?;揎検侵冈诿富蚍敲缸饔孟拢瑢⒁阴oA的乙?;鶊F轉移至蛋白質氨基酸的殘基上,。

蛋白質糖基化修飾組學技術服務:糖基化是在酶的控制下,蛋白質或脂質附加上糖類的過程,發(fā)生于內(nèi)質網(wǎng)和高爾基體等部位。在糖基轉移酶作用下將糖轉移至蛋白質,和蛋白質上的氨基酸殘基共價結合,。蛋白質經(jīng)過糖基化作用,形成糖蛋白,。糖基化是對蛋白的重要的修飾作用,有調節(jié)蛋白質功能作用。凝素親和法是目前糖蛋白質組學中應用比較普遍的分離富集方法,。凝集素(lectin)是一類糖結合蛋白質,,能專一識別某一特殊結構的單糖或聚糖中特定的糖基序列而與之結合,它們與糖鏈可逆非共價結合,,糖蛋白或糖肽被凝集素捕獲之后,,通常用特定的單糖通過競爭結合凝集素將糖蛋白或糖肽洗脫下來。

蛋白翻譯后修飾位點鑒定:蛋白質翻譯后修飾(Post-Translational Modifications, PTMs)幾乎參與了細胞所有正常生命活動的過程,,并發(fā)揮十分重要的調控作用,。蛋白質修飾位點能夠影響蛋白的多種屬性,,包括蛋白質折疊、活性以及之后的功能,,對于蛋白質修飾位點的發(fā)現(xiàn)及研究對闡明蛋白質的功能具有重要作用,。技術特點:時間快,周期短,;識別位點準確,,采用高分辨率質譜技術可以準確定位到發(fā)生修飾的氨基酸位點。適用范圍:已知蛋白序列,;明確翻譯后修飾的類型,。蛋白質翻譯后修飾組學是通過在一個或多個氨基酸殘基加上修飾基團,可以改變蛋白質的物理,、化學性質,。

乙酰化修飾蛋白組學實驗流程:1)組織/細胞破碎,,提取蛋白質,;2)蛋白酶解成多肽片段;3)對多肽片段進行 iTRAQ 標記,;4)高效特異性乙?;贵w富集乙酰化修飾肽段,;5)使用 LC-MS/MS 對富集的乙?;亩芜M行序列分析;5)數(shù)據(jù)分析,,比對不同樣本中蛋白乙?;揎椝讲町悾Ξa(chǎn)生變化的生物學意義進行解釋,。乙?;且粋€普遍而重要的蛋白質翻譯后修飾,不僅集中在對細胞染色體結構的影響以及對核內(nèi)轉錄調控因子方面,,而且還影響參與細胞周期和新陳代謝,、肌動蛋白聚合控制及多聚谷氨酰胺疾病等方方面面。乙?;粌H存在于真核細胞中,,而且越來越多的證據(jù)也表明乙酰化同樣影響許多原核細胞的生理生化過程,。蛋白質翻譯后修飾PTMs通常包括磷酸化,,糖基化,泛素化,,亞硝基化,,甲基化,,乙酰化,,脂質化和蛋白水解,。山東乙酰化修飾PRM定量驗證

蛋白質磷酸化修飾怎么定義,?深圳蛋白質琥珀?;揎椊M學分析研究

蛋白質翻譯后修飾組學產(chǎn)品:常規(guī)的蛋白質組學研究往往只關注不同生理、病理條件下蛋白質表達水平的變化,。然而,,越來越多的研究發(fā)現(xiàn),許多重要的生命活動,、疾病發(fā)生不僅與蛋白質的豐度相關,,更重要的是被各類蛋白質翻譯后修飾所調控。因此深入研究蛋白質翻譯后修飾對揭示生命活動的機理,、篩選疾病的臨床標志物,、鑒定藥物靶點等方面都具有重要意義。由于翻譯后修飾的蛋白質在生物樣本中含量低,、動態(tài)范圍廣,,質譜分析前需要對修飾進行富集以提高其豐度。深圳蛋白質琥珀?;揎椊M學分析研究