CCK-8的原理

所以粗略的可以認(rèn)為生成的甲瓚物的顏色的深淺與活細(xì)胞的數(shù)量成正比,。為什么是粗略的呢，因?yàn)檫@里沒有考慮到細(xì)胞代謝水平的高低,，有些細(xì)胞在***處理后,，可能活細(xì)胞數(shù)不變，但是代謝率低了以后,，細(xì)胞呼吸減弱,，NAD+產(chǎn)生減少，測出的Formazan也會減少,，所以此時(shí)怎么算呢（此時(shí)我就比較懷戀中性紅了）,？當(dāng)然也有解決的辦法，下期給大家介紹,。因此可利用這個(gè)原理進(jìn)行細(xì)胞增殖和毒性分析,，在吸光度為450時(shí)檢測讀數(shù)。用途及常用的公 MTT與CCK8比色法的實(shí)驗(yàn)細(xì)節(jié)和注意事項(xiàng).北京cck8是什么

,。一般情況下,，**外一圈的孔只加培養(yǎng)基，不作為測定孔用,。在培養(yǎng)基中加入CCK8,，培養(yǎng)一定的時(shí)間，測定450 nm的吸光度即為空白對照,。在做加藥實(shí)驗(yàn)時(shí),，還應(yīng)考慮***的吸收，可在加入***的培養(yǎng)基中加入CCK8,，培養(yǎng)一定的時(shí)間,，測定450 nm的吸光度作為空白對照。金屬對CCK-8顯色有影響：當(dāng)終濃度為1mM的氯化亞鉛,、氯化鐵,、硫酸銅會***5%、15%,、90%的顯色反應(yīng),，使靈敏度降級。如果終濃度是10 mM的話,，將會*****,。懸浮細(xì)胞由于染色比較困難，一般需要增加細(xì)胞數(shù)量和延長培養(yǎng)時(shí)間,。湖北cck8與ic50cck8試劑盒原理是什么a?

CellCountingKit-8（簡稱CCK-8）試劑可用于簡便而準(zhǔn)確的細(xì)胞增殖和毒性分析,。其基本原理為：該試劑中含有WST-8【化學(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽】。它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-MethoxyPMS）的作用下被細(xì)胞中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚產(chǎn)物（Formazandye）。生成的甲瓚物的數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比,。因此可利用這一特性直接進(jìn)行細(xì)胞增殖和毒性分析,。

在做一些***毒性試驗(yàn)時(shí)，比如做鐵死亡途徑時(shí),，我們加入一個(gè)***叫C1,，這個(gè)時(shí)候就需要提前換液，其實(shí)我們試過,，還是會有一些影響,。所以這時(shí)我們用中性紅檢測。我們實(shí)驗(yàn)室,，通常會用20%的硫酸銅溶液放到細(xì)胞孵箱下層,，預(yù)防******。理應(yīng)說,，硫酸銅分子在水溶液中是硫酸根離子和銅離子,，是不會揮發(fā)的。但是每次只要是新?lián)Q的硫酸銅溶液再做CCK-8,，結(jié)果總是不好,，我也不知道是什么原因。之前在我們實(shí)驗(yàn)室有發(fā)生過這樣的事情,，這種有深有淺的才是該有的結(jié)果,。我想說的是在有能力選擇范圍內(nèi)，盡量選擇好一點(diǎn)的試劑,，免得浪費(fèi)時(shí)間,。CCK8細(xì)胞增值檢測實(shí)驗(yàn)簡介.

CCK8檢測細(xì)胞增殖/毒性的注意事項(xiàng)：1.加入CCK8溶液時(shí)不要在孔中生成氣泡，它們會影響OD值的讀數(shù),；2.要設(shè)計(jì)空白對照組,；3.對于大多數(shù)情況，加入CCK8溶液后,，孵育2h左右就可以了,；4.使用酶標(biāo)儀之前要提前開啟10min預(yù)熱；5.若連續(xù)多天檢測,，必須保持所有條件一致,。相關(guān)鏈接：CCK8的特性、保存方法以及與BrdU的區(qū)別CCK8空白對照,，測定參比波長的設(shè)定以及OD值的合適范圍CCK8標(biāo)準(zhǔn)曲線,、檢測時(shí)間、終止反應(yīng)以及減少加樣誤差的方法外界因素(金屬/***/細(xì)菌/培養(yǎng)基/培養(yǎng)板)對CCK8測定的影響細(xì)胞因素(預(yù)培養(yǎng)/生長方式/狀態(tài)/細(xì)胞數(shù)/死細(xì)胞)對CCK8測定的影響細(xì)胞增殖到底用MTT還是CCK8呢?細(xì)胞毒性測定：這個(gè)可以和各個(gè)處理因素對細(xì)胞活性和增殖的影響,，比如低氧或者什么化學(xué)物品對細(xì)胞的影響上,。浙江cck8 od值

培養(yǎng)板周圍一圈孔培養(yǎng)液容易揮發(fā),，為減少誤差，建議培養(yǎng)板周圍的四邊每孔只加培養(yǎng)基,。北京cck8是什么

培養(yǎng)基對CCK8測定的影響：不同的培養(yǎng)基中含有氧化還原性物質(zhì)不同,，（主要是氨基酸的成分及糖含量），會與CCK8發(fā)生反應(yīng),，產(chǎn)生實(shí)驗(yàn)誤差,，因此所用培養(yǎng)基要一致，不要更換其他培養(yǎng)基,。比如DMEM空白吸收為0.93；1640培養(yǎng)基在0.5左右,。另外培養(yǎng)基中有酚紅存在的情況下,，會增加空白吸收，但不影響測定,，扣除空白吸收即可,，可見空白孔非常重要，所以每次實(shí)驗(yàn)均要設(shè)定空白對照,。另外,，血清不影響測定。有師妹在做一個(gè)HIF1a***劑實(shí)驗(yàn)時(shí),，多加了這個(gè)***劑的濃度,，北京cck8是什么