血清保存方法應(yīng)保存在-5℃至-20℃,。然而,,若存放于4℃時,請勿超過一個月,。若您一次無法用完一瓶,,建議將無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍,。
如何解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損,?
將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,,然后在室溫下使之全溶,。但必須注意的是,溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻,。
***:血清的成份可能有幾百種之多,,對其準(zhǔn)確的成份、含量及其作用機(jī)制仍不清楚,,尤其是對其中一些多肽類生長因子,、***和脂類等尚未充分認(rèn)識,這給研究工作帶來許多困難,;
第二:血清都是批量生產(chǎn),,各批量之間差異很大,而且血清保存期至多一年,,因此,,要保證每批血清的相似性極為困難,從而使實驗的標(biāo)準(zhǔn)化和連續(xù)性受到限制,;
第三:不能排除血清中含有易變物質(zhì),,這被認(rèn)為是“瓶中惡化”的原因之
澳洲特級胎牛血清適合于神經(jīng)干細(xì)胞、胚胎干細(xì)胞及間充質(zhì)干細(xì)胞等嬌貴細(xì)胞的培養(yǎng),。廣州山羊血清供應(yīng)
避免產(chǎn)生沉淀物1,、解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫),,若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃,,實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。2,、解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,,使溫度及成分均一,,減少沉淀的發(fā)生3,、請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,,血清會變得混濁,,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量,。4,、血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,,可以無須做此步驟,。5、若必須做血清的熱滅活,,請遵守56℃,,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻,。溫度過高,,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多,。血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),,該如何處理? 欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),,以400g稍微離心,,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,,因為它可能會阻塞過濾膜,。南通山羊血清hyclone南美特級胎牛血適合細(xì)胞株的保藏及組織***培養(yǎng)、單抗研制,、絕大多數(shù)**細(xì)胞.
血清是由血漿去除纖維蛋白原而形成的一種很復(fù)雜的混合物,,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,,且血清組成及含量常隨供血動物的性別,、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異,。血清是血漿中不含纖維蛋白原的膠狀液體,具有維持血液的正常粘度,、酸堿度、滲透壓等作用,。它主要由水和各種化學(xué)成分組成,這些化學(xué)成分包括白蛋白,、α1、α2,、β,、γ-球蛋白,甘油三酯,總膽固醇,谷丙轉(zhuǎn)氨酶等,。血清中含有各種血漿蛋白、多肽,、脂肪,、碳水化合物、生長因子,、***,、無機(jī)物等,這些物質(zhì)對促進(jìn)細(xì)胞生長或***生長活性是達(dá)到生理平衡的,。對血清的成分和作用的研究雖有很大進(jìn)展,,但仍存在一些問題。
抗體稀釋參考
一抗稀釋范圍為1mg/mL原液1:1000-1:5000或0.2-1.0μg/mL,,二抗稀釋范圍為1mg/mL原液1:2000-1:10000或10-50ng/mL
注意事項 1.使用該產(chǎn)品比使用沉淀比色HRP底物檢測所需的抗體濃度低,。為優(yōu)化抗體濃度,請進(jìn)行一次系統(tǒng)的點印跡分析;
2. 工作液在室溫下8小時內(nèi)可以保持穩(wěn)定,但是應(yīng)該避免暴露在陽光下或任何其他強(qiáng)光環(huán)境,然而短期實驗室照明強(qiáng)度不會破壞工作液的穩(wěn)定性;
3. 封閉試劑有可能與抗體產(chǎn)生交叉反應(yīng),導(dǎo)致出現(xiàn)非特異性信號。封閉緩沖液同時也會影響系統(tǒng)的靈敏性,當(dāng)從一種底物轉(zhuǎn)換為另一種底物時,有時會出現(xiàn)信號衰減或背景增加的現(xiàn)象,原因可能是封閉緩沖液不適合新的檢測系統(tǒng);
4. 使用親和素/生物素檢測系統(tǒng)時,避免使用牛奶作為封閉試劑,因為牛奶中含有不定量的內(nèi)源性生物素,會導(dǎo)致高背景信號;
5. 保證洗滌緩沖液,、封閉緩沖液,、抗體溶液和底物工作液的使用體積,以確保在整個實驗過程中印跡膜完全被液體覆蓋,避免膜變干。增大封閉緩沖液及洗滌緩沖液的使用量可以降低非特異性的信號;
血清蛋白形成了血清的粘度,,可以保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷,,特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時,粘度起到重要作用,;
牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)基的重要組成部分,,其質(zhì)量好壞對細(xì)胞狀態(tài)及數(shù)量增長速度影響很大。常用的有胎牛血清,、新生牛血清及小牛血清,。牛的**年齡是這三種血清區(qū)分的明顯標(biāo)志。小牛血清的采集對象是出生1年之內(nèi)的小牛,,新生牛血清是出生24小時至2周內(nèi)的新生牛,,胎牛血清則是6-10個月的胎牛。隨著**年齡的增加,,牛血清中的生長因子減少,,抗體和補(bǔ)體等含量增加。因此,,鑒別血清原料的**年齡段,,防止成牛血清的參入是血清品質(zhì)檢測者所面臨的一個重要問題。馬血清采用成年健康馬血液為原料加工而成,,經(jīng)無菌采集,、分離、微孔過濾分裝而成。蘇州gibco南美血清購買
血清中的氫化可的松,,如細(xì)胞密度高時可能有壓抑細(xì)胞的作用和誘導(dǎo)其發(fā)生分化,。廣州山羊血清供應(yīng)
血清主要作用
●提供基本營養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素,、無機(jī)物、脂類物質(zhì),、核酸衍生物等,,是細(xì)胞生長必須的物質(zhì)。
●提供和各種生長因子:胰島素,、腎上腺皮質(zhì)(氫化可的松),、類固醇(雌二醇、睪酮,、孕酮)等,。生長因子如成纖維細(xì)胞生長因子、表皮生長因子,、血小板生長因子等,。
●提供結(jié)合蛋白:結(jié)合蛋白作用是攜帶重要的低分子量物質(zhì),如白蛋白攜帶維生素,、脂肪,、以及等,轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵,。結(jié)合蛋白在細(xì)胞代謝過程中起重要作用,。
●提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷。
●對培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用:有一些細(xì)胞,,如內(nèi)皮細(xì)胞,、骨髓樣細(xì)胞可以釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,,起到中和作用,。這種作用是偶然發(fā)現(xiàn)的,則有目的的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用,。因為胰蛋白酶已經(jīng)被用于貼壁細(xì)胞的消化傳代,。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷,,特別是在懸浮培養(yǎng)攪拌時,,粘度起到重要作用。血清還含有一些微量元素和離子,,他們在代謝中起重要作用,,如SeO3,硒等 廣州山羊血清供應(yīng)