細胞轉染實驗是生物醫(yī)學實驗室中**常規(guī)的研究手段,，目的是把外源基因、蛋白或者小分子導入到靶細胞內,。目前主要有三種主流方法：生物轉染,，物理轉染和化學轉染。其中生物轉染主要是利用***等微生物作為基因導入載體,，以慢***,、腺***和腺相關***等**常見,，其侵染效率可以達到90%以上，但常因安全性等問題,，很多實驗室對其敬而遠之,。物理轉染主要包括顯微注射、電穿孔和基因***,，無論哪一種都需要特定的設備,，且一分錢一分貨，性能好的價格也都很性感電轉化化學轉染方法是生物醫(yī)學研究中**常用的轉染方法,，主要包括兩類：陽離子脂質體和陽離子聚合物,。其基本原理是利用陽離子的化學分子與帶有負電荷的核酸通過正負電荷作用形成穩(wěn)定的復合物。我們希望把mRNA轉染進入原代細胞,，那**適合的轉染產品就是Lipofectamine MessengerMAX?或是Neon電轉儀,。hela轉染試劑加不加血清

基于磷酸鈣成分的轉染試劑，其主要作用原理是與DNA通過沉淀反應形成磷酸鈣-DNA復合物,，粘附到細胞膜表面,，借助內吞作用進入細胞質。pH值,，鈣離子濃度,，DNA濃度，沉淀時間,，細胞孵育時間乃至各組分加入順序都可能對結果產生影響,，因此實驗條件摸索和優(yōu)化時間較長，且重復性不佳,?；谥|體的轉染試劑包括中性脂質體和陽離子脂質體兩種。中性脂質體是利用脂質膜包裹DNA,，借助脂質膜將DNA導入細胞膜內,。目前應用比較***的是帶正電的陽離子脂質體轉染試劑，DNA并沒有預先包埋在脂質體中,，而是帶負電的DNA自動結合到帶正電的脂質體上,，形成DNA-陽離子脂質體復合物，從而吸附到帶負電的細胞膜表面,，經過內吞被導入細胞,。此方法操作簡單，重復性好,，在體外轉染中有很高的效率,，但具有一定的細胞毒性，可能會干擾細胞的代謝,。且活性受血清影響,，需要去除血清,。hek293t轉染試劑如何保存原代細胞直接分離自組織并在適當條件下增殖.

原代細胞直接分離自組織并在適當條件下增殖。因此,，它們的形態(tài)學和生理特征和體內狀態(tài)更為相似,。但相對于連續(xù)細胞系，它們通常更難培養(yǎng)和轉染,。在經過***次傳代培養(yǎng)之后,，原代培養(yǎng)物變成了一種細胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細胞系具有有限的壽命（即它們是有限細胞系）,，且隨著傳代的進行,，具有比較高的生長能力的細胞逐漸占據(jù)支配地位,，從而造成了細胞群內的基因型和表型接近一致的情形,。相對來說，這一類細胞要比原代細胞使用起來更為方便,，尤其是穩(wěn)定轉染的克隆傳代,。

用LipoFectMax?轉染Hela細胞，左圖轉染GFPcDNA,，右圖共轉染GFPCDNA和GFP靶向siRNA,。轉染siRNA后可以從右圖明顯看到基因沉默。4適用于神經細胞的轉染圖4.用LipoFectMax?和LipoFectamine®2000分別對小鼠神經元細胞進行轉染綠色熒光白蛋白（GFP）,，轉染24小時后觀察轉染效果,，LipoFectMax?轉染效率（左圖）比LipoFectamine®2000（右圖）高5倍。LipoFectMax?轉染試劑轉染試劑操作流程細胞毒性低圖2.LipoFectMax?,，LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉染操作,，通過計算轉染后的細胞存活率比較細胞毒性.但相對于連續(xù)細胞系，它們通常更難培養(yǎng)和轉染,。

Zeta Life轉染試劑 成功轉染THP-1 (人單核白血病細胞) 懸浮細胞                 ZETA LIFE                                             ZETA LIFE                                                              微信號                               gh_97714b427409

功能介紹                               美國 Zeta Life公司是國際無血清細胞培養(yǎng)基 DMEM/F12主要完成人,，有三十多年的胎牛血清、無血清細胞培養(yǎng)基生產經驗,； Zeta Life與美國加利福尼亞大學聯(lián)合開發(fā)全球細胞體內可代謝轉染試劑,，此技術成為全球細胞轉染優(yōu)先技術之一。                                                                                                      7月17日                 收錄于話題Zeta Life Advanced DNA RNA,，AD600150轉染試劑,；

成功轉染THP-1 (人單核白血病細胞) 懸浮細胞；

來自廣州中山大學附屬**醫(yī)院客戶的喜訊;

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.在多種不同類型細胞中基因敲除效率超過90%,。

高靈活應用， 同一試劑可用于siRNA和質粒共轉染的基因沉默實驗,。

細胞毒性低,，結果相關性好，確保所觀察到的細胞效應是由轉染的siRNA而非轉染過程本身介導,。

兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,，轉染前后均無需換液(如無血清培養(yǎng)基)。

X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4種細胞系的HPRT基因沉默實驗,。根據(jù)各試劑說明書建議的操作流程,，或標準實驗方法，將100nM HPRT特異性siRNA轉染至4種細胞,通過LightCycler® h-HPRT Housekeeping Gene Set的熒光定量法評估基因沉默效率,。結果顯示用羅氏這款試劑在四種細胞中轉染后基因沉默表現(xiàn)均表現(xiàn)優(yōu)異,。 hela轉染試劑加不加血清