一直都像個新手，從未老道過,。所有新手的迷茫與無奈我**能體會?？吹綀@子里有一些同學(xué)在問有關(guān)CCK8試驗的事情，當(dāng)初我也和他們一樣,，像個被蜘蛛絲纏住頭的迷茫蒼蠅一頭扎進(jìn)園子里,，期待能找到些解決謎團(tuán)的只言片語。希望我寫的這些非專業(yè)文字能夠幫助那些在實驗室里沒有前行者指點迷津的筒子們,。當(dāng)然仁者見仁智者見智,，我寫的只是個人實驗心得，就供參考,。歡迎大家拍磚共同進(jìn)步,。實驗是簡單的，道路是曲折的,，時間就是用來浪費(fèi)的，科研就是自娛自樂使勁折騰,。代謝率低了以后,，細(xì)胞呼吸減弱，NAD+產(chǎn)生減少,，測出的Formazan也會減少,。浙江cck8材料

二、優(yōu)點：·使用方便,，省去了洗滌細(xì)胞,，不需要放射性同位素和有機(jī)溶劑,；·CCK-8法能快速檢測；·CCK-8法的檢測靈敏度很高,，甚至可以測定較低細(xì)胞密度,；·CCK-8法的重復(fù)性優(yōu)于MTT法，MTT實驗生成的formazan不是水溶性的,，需要使用DMSO等有機(jī)溶劑溶解,；而本方法產(chǎn)生的formazan是水溶性的,，不但省去了溶解步驟,，更因此而減少了該操作步驟帶來的誤差；·CCK-8法對細(xì)胞毒性小,，可以多次測定選取比較好測定時間,，與MTT方法相比線性范圍更寬，靈敏度更高,；·CCK-8細(xì)胞活性檢測試劑中為1瓶溶液,，毋需預(yù)制，即開即用,。天津測完cck8的細(xì)胞能去染色嗎MTT與CCK8比色法的實驗細(xì)節(jié)和注意事項.

培養(yǎng)基對CCK8測定的影響：不同的培養(yǎng)基中含有氧化還原性物質(zhì)不同,，（主要是氨基酸的成分及糖含量），會與CCK8發(fā)生反應(yīng),，產(chǎn)生實驗誤差,，因此所用培養(yǎng)基要一致，不要更換其他培養(yǎng)基,。比如DMEM空白吸收為0.93,；1640培養(yǎng)基在0.5左右。另外培養(yǎng)基中有酚紅存在的情況下,，會增加空白吸收,，但不影響測定，扣除空白吸收即可,，可見空白孔非常重要,，所以每次實驗均要設(shè)定空白對照。另外,，血清不影響測定,，所以我用CCK-8來測定病毒對細(xì)胞活性的影響或者某個***對病毒復(fù)制的影響時，我都小心翼翼的測很多個時間點,，說實話,，效果不是很好。所以我比較喜歡中性紅,。

CCK-8（CellCountingKit-8）細(xì)胞活性和增殖檢測是醫(yī)學(xué)研究中常用的實驗技術(shù),，其原理是該試劑中含有WST-8,，它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-MethoxyPMS）的作用下被細(xì)胞中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚產(chǎn)物（Formazandye）。生成的甲瓚物的數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比,。因此可利用這一特性直接進(jìn)行細(xì)胞增殖和毒性分析,。以下是CCK-8檢測的具體步驟：細(xì)胞活性檢測1.在96孔板中接種細(xì)胞懸液(100ml/孔)。將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱預(yù)培養(yǎng)(在37℃,，5%CO2的條件下),。CCK8雖好,這些情況下不建議用!

CKK-8原理

CellCountingKit，CCK-8試劑含有WST-8（化學(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽）,，是近年新開發(fā)的一種更新的水溶性四唑鹽檢測,，原理與WST-1類似：在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-MethoxyPMS）的作用下被細(xì)胞線粒體中的脫氫酶還原成具有高度水溶性的橙黃色甲臜產(chǎn)物（Formazan）。生成的甲臜物的數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比,，用酶聯(lián)免疫分析儀測定其光吸收值可間接反映活細(xì)胞數(shù)量,，在一定細(xì)胞數(shù)量范圍內(nèi)甲臜形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比。

換液的意思是將cck8加在培養(yǎng)基中以換液的形式加在孔板中避免氣泡產(chǎn)生,。湖北cck8 mts

與MTT相比,，CCK-8和XTT的價格比較貴。浙江cck8材料

CCK-8的用途1.細(xì)胞增殖測定：細(xì)胞增殖實驗在很多領(lǐng)域都會用到,，比如**相關(guān),、損傷后修復(fù)等。

2.***篩選：在測定一個***的毒性和安全有效濃度時,，經(jīng)常會用到CCK-8,。

3.細(xì)胞毒性測定：這個可以和各個處理因素對細(xì)胞活性和增殖的影響，比如在UV,、低氧或者什么化學(xué)物品對細(xì)胞的影響上,。

4.**藥敏試驗：這個是用的比較廣的，我見過做**的團(tuán)隊,，買CCK-8都是一整箱,，一整箱的買，比如果子老師所在的團(tuán)隊,，哈哈哈,。

5.微生物對細(xì)胞的毒性或增殖的實驗。 浙江cck8材料