培養(yǎng)板對CCK8測定的影響：不同公司的培養(yǎng)板,，以及培養(yǎng)板是否經(jīng)過處理對讀數(shù)都有一定的影響。所以前后實驗要一致,。另外在培養(yǎng)箱中,，培養(yǎng)板**外一圈的孔容易干燥揮發(fā)，從而能導(dǎo)致培養(yǎng)基的體積不一樣,，增加誤差,。如果有可能，**外一圈的孔只加高壓滅菌的PBS或ddH2O,。另外,，注意CCK-8不要貼在板壁上。一定要注意是否是***有問題,。解決的方案就是可以在測定CCK-8的讀數(shù)前,，換個細胞液，再測定,。這樣會有一定的影響,，但是影響的是所有的，所以均一性還算比較好,。靈敏度高,，數(shù)據(jù)可靠，重現(xiàn)性好.浙江cck8要反應(yīng)多久
特點不同1,、CellCountingKit-8：靈敏度高,，數(shù)據(jù)可靠，重現(xiàn)性好,；操作簡便,，省時省力；水溶性,，不需要換液,，尤其適合于懸浮細胞；無需放射性同位素和有機溶劑,，對細胞毒性低,；適合于高通量***篩選。2,、MTT法：特點是靈敏度高,、經(jīng)濟。三,、應(yīng)用不同1,、CellCountingKit-8：主要用途為***篩選,、細胞增殖測定、細胞毒性測定,、**藥敏試驗,。2、MTT法：***用于一些生物活性因子的活性檢測,、大規(guī)模的抗*****篩選,、細胞毒性試驗以及**放射敏感性測定等。北京東仁cck8CCK8的實驗步驟,、實驗分組及檢測方法.
二,、優(yōu)點：·使用方便，省去了洗滌細胞,，不需要放射性同位素和有機溶劑,；·CCK-8法能快速檢測；·CCK-8法的檢測靈敏度很高,，甚至可以測定較低細胞密度,；·CCK-8法的重復(fù)性優(yōu)于MTT法，MTT實驗生成的formazan不是水溶性的,，需要使用DMSO等有機溶劑溶解,；而本方法產(chǎn)生的formazan是水溶性的，不但省去了溶解步驟,，更因此而減少了該操作步驟帶來的誤差,；·CCK-8法對細胞毒性小，可以多次測定選取比較好測定時間,，與MTT方法相比線性范圍更寬,，靈敏度更高；·CCK-8細胞活性檢測試劑中為1瓶溶液,，毋需預(yù)制，即開即用,。
四,、方法及步驟：實驗一：細胞增殖分析1、制備細胞懸液：細胞計數(shù),。2,、接種到96孔板中：根據(jù)合適的鋪板細胞數(shù)（約1-2×104），每孔約100ul細胞懸液,，同樣的樣本可做4-6個重復(fù),。3、37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)：細胞接種后貼壁大約需要培養(yǎng)4小時,，如果不需要貼壁,，這步可以省去。4、加入10ulCCK8：由于每孔加入CCK8量比較少,，有可能因試劑沾在孔壁上而帶來誤差,，建議將***頭浸入培養(yǎng)液中加入且在加完試劑后輕輕敲擊培養(yǎng)板以幫助混勻?；蛘咧苯优渲煤?0%CCK8的培養(yǎng)基（現(xiàn)用現(xiàn)配）,，以換液的形式加入。CCK8試驗的總體實驗心得.
再此,，給大家分享個小事情,，有次，因為實驗時間點已經(jīng)到,，但是盒子不夠,，我們就用了某天的CCK-8試劑盒，***出來的結(jié)果如圖3,。這個結(jié)果是我所不能接受的,。后來用Sigma的再重復(fù)了一次，如圖4,，這種有深有淺的才是該有的結(jié)果,。我想說的是在有能力選擇范圍內(nèi)，盡量選擇好一點的試劑,，免得浪費時間,。后來博士換了導(dǎo)師，換了課題,，沒有再用Sigma的了,，用了一個日本的牌子，名字和貨號如下,，結(jié)果只能說justsoso,，肯定沒有Sigma的好用。二次水溶性,，不需要換液,，尤其適合于懸浮細胞.北京cck8曲線
對細胞毒性小,；6,、為1瓶溶液，毋需預(yù)制,，即開即用,。 缺點.浙江cck8要反應(yīng)多久
酚紅和血清對CCK法的檢測不會造成干擾；◆細胞毒性非常低,，因此加入WST-8顯色后,，可以在不同時間反復(fù)用酶標(biāo)儀讀數(shù)從而找到比較好測定時間,。實驗二：細胞增殖-毒性檢測1、在96孔板中配置100μL的細胞懸液,。將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱預(yù)培養(yǎng)24小時（37℃,，5%CO2）。2,、向培養(yǎng)板加入10μL不同濃度的待測物質(zhì),。3、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱孵育一段適當(dāng)?shù)臅r間（例如：6,、12,、24或48小時）。4,、向每孔加入10μLCCK溶液（注意不要再孔中生成氣泡,，它們會影響OD值的讀數(shù)）。5,、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育1-4小時,。6、用酶標(biāo)儀測定在450nm處的吸光度,。浙江cck8要反應(yīng)多久