細(xì)菌***對CCK8檢測的影響：我們做***的,，經(jīng)常會做到細(xì)菌或***對細(xì)胞的影響,。那這種情況下我們應(yīng)該怎么辦,。其實(shí)細(xì)菌防御系統(tǒng)還是非常強(qiáng)大,，單獨(dú)和CCK-8在一起孵育時,，不會發(fā)生還原反應(yīng),，幾乎不會和細(xì)菌發(fā)生顯色反應(yīng),。而細(xì)菌不需要入胞繁殖,，所以結(jié)果還是可信的,。**討厭的就是***，我不知道有多少人是做***的,。***是需要入胞繁殖的,，而且需要借助細(xì)胞的東西來進(jìn)行繁殖。繁殖過程中就需要消耗宿主的能量,，會產(chǎn)生氧化還原反應(yīng),，所以我用CCK-8來測定***對細(xì)胞活性的影響或者某個***對***復(fù)制的影響時，我都小心翼翼的測很多個時間點(diǎn),，說實(shí)話,，效果不是很好。所以我比較喜歡中性紅,?；瘜W(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基).江蘇cck8實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
二、優(yōu)點(diǎn)：·使用方便,，省去了洗滌細(xì)胞,，不需要放射性同位素和有機(jī)溶劑；·CCK-8法能快速檢測,；·CCK-8法的檢測靈敏度很高,，甚至可以測定較低細(xì)胞密度；·CCK-8法的重復(fù)性優(yōu)于MTT法，MTT實(shí)驗(yàn)生成的formazan不是水溶性的,，需要使用DMSO等有機(jī)溶劑溶解,；而本方法產(chǎn)生的formazan是水溶性的，不但省去了溶解步驟,，更因此而減少了該操作步驟帶來的誤差,；·CCK-8法對細(xì)胞毒性小，可以多次測定選取比較好測定時間,，與MTT方法相比線性范圍更寬,，靈敏度更高；·CCK-8細(xì)胞活性檢測試劑中為1瓶溶液,，毋需預(yù)制,，即開即用。北京cck8方法細(xì)胞增殖檢測——CCK8.
CCK8原理,、優(yōu)勢和步驟 檢測原理：
◆ Cell Counting Kit簡稱CCK試劑盒,，是一種基于WST-8（化學(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽）的廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。
◆ WST-8屬于MTT的升級產(chǎn)品,，工作原理為：在電子耦合試劑存在的情況下,，可以被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原生成高度水溶性的橙黃色的甲臜產(chǎn)物（formazan）。顏色的深淺與細(xì)胞的增殖成正比,，與細(xì)胞毒性成反比,。使用酶標(biāo)儀在450mM波長處測定OD值，間接反映活細(xì)胞數(shù)量,。
cck8試劑加入后孵育時間，隨著時間的增加,，OD值就會增大,。總之原則就是把OD值控制在1.0左右,。這里我考察了0.5h,、1.0h、2.0h,。再說一下關(guān)于種板設(shè)置問題,。眾所周知周圍一圈孔因?yàn)檫吘壭?yīng)都是不用來做實(shí)驗(yàn)的。一般每組樣品我會設(shè)置6個復(fù)孔,，得到的OD值去掉**大值與**小值,，其余取平均值。我用的是排***,，會省很多力氣,，但是也會增大組內(nèi)誤差。這個只有通過校正移液***和選用**適***頭了。能力有限,，表達(dá)不清的大家湊合著看看吧,。有疑問的歡迎大家留言討論，我們的目標(biāo)是共同進(jìn)步細(xì)胞增殖與毒性檢測實(shí)驗(yàn)方法及經(jīng)驗(yàn)總結(jié)-CCK-8 .
cck8試劑加入后孵育時間,，隨著時間的增加,，OD值就會增大?？傊瓌t就是把OD值控制在1.0左右,。這里我考察了0.5h、1.0h,、2.0h,。
再說一下關(guān)于種板設(shè)置問題。眾所周知周圍一圈孔因?yàn)檫吘壭?yīng)都是不用來做實(shí)驗(yàn)的,。一般每組樣品我會設(shè)置6個復(fù)孔,，得到的OD值去掉**大值與**小值，其余取平均值,。我用的是排***,，會省很多力氣，但是也會增大組內(nèi)誤差,。這個只有通過校正移液***和選用**適***頭了,。
能力有限，表達(dá)不清的大家湊合著看看吧,。有疑問的歡迎大家留言討論,，我們的目標(biāo)是共同進(jìn)步，哈哈,。 **藥敏試驗(yàn)：這個是用的比較廣的,，我見過做**的團(tuán)隊(duì)，買CCK-8都是一整箱,，一整箱的買,。浙江cck8 細(xì)胞活力
CCK8細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)檢測原理.江蘇cck8實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
沒有做過MTT實(shí)驗(yàn)，但其實(shí)原理及目的都是一樣的（反應(yīng)機(jī)理不一樣）,。都說CCK8簡單點(diǎn)而且數(shù)據(jù)更穩(wěn)定,，所以就用了這個試劑盒。CCK8的說明書大家一定要認(rèn)真閱讀,，里面很多細(xì)節(jié)的問題都有提到,。而且說明書里提供的一些關(guān)于各種細(xì)胞的種板數(shù)都很有參考價值，因?yàn)槟鞘欠磸?fù)驗(yàn)證過的比較好數(shù)值,。但無論如何,，做這個試驗(yàn)一定要摸條件,。你就算再懶，這個懶不得,，否則你都只是在做無用功,。以下言論全部以細(xì)胞毒性試驗(yàn)為前提，如果你做的是促進(jìn)細(xì)胞生長的***的藥效實(shí)驗(yàn)?zāi)蔷土懋?dāng)別論了,。江蘇cck8實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>