細胞轉(zhuǎn)染過程:X-tremeGENE 9 DNA 轉(zhuǎn)染試劑   簡介：

X-tremeGENE 9 DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,，溶于80%乙醇中,，經(jīng)0.2 μm濾膜過濾,，然后封裝于玻璃小瓶中,，適用于細胞分析的多種實驗,。

優(yōu)勢：1.具有細胞毒性極低,、轉(zhuǎn)染后細胞存活率高,，生成可信任的生理學相關數(shù)據(jù)。

2.操作簡便,、節(jié)省時間,，只需對X-tremeGENE 9 DNA轉(zhuǎn)染試劑進行簡單稀釋，再與質(zhì)粒DNA共同孵育,，即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可),。

3.對于常用細胞無需進行費時費力的優(yōu)化工作。 無論有無血清,、***存在均可獲得很高的轉(zhuǎn)染效率,。動物細胞轉(zhuǎn)染試劑對照

圖7.對注射了Invivofectamine3.0試劑的小鼠樣品進行血液化學分析。將Invivofectamine3.0試劑與靶向FVII的AmbioninvivosiRNA的復合物分別以1mg/kg[1],3mg/kg[3],或未處理[U]的劑量注射入小鼠體內(nèi),。在注射后2,、24及48小時收集血液樣品,，并通過臨床化學檢測方法對數(shù)個生物標志物(Antech)進行評估。結(jié)果表明在使用Invivofectamine3.0試劑進行轉(zhuǎn)染的每個個體間所檢測的生物標志物的水平與未注射該試劑的個體相比并沒有***差異,。除了以上兩種于siRNA的轉(zhuǎn)染試劑，還有通用型轉(zhuǎn)染試劑Lipofectamine?2000,，Lipofectamine?3000和Neon?轉(zhuǎn)染系統(tǒng)也可以用于siRNA轉(zhuǎn)染基因轉(zhuǎn)染試劑配制所見即所得——分享兩款超好用的轉(zhuǎn)染試劑,拯救你的細胞.

用LipoFectMax?轉(zhuǎn)染Hela細胞,，左圖轉(zhuǎn)染GFP cDNA,，右圖共轉(zhuǎn)染GFP CDNA和GFP靶向siRNA,。轉(zhuǎn)染siRNA后可以從右圖明顯看到基因沉默。

4適用于神經(jīng)細胞的轉(zhuǎn)染圖4.  用LipoFectMax? 和LipoFectamine®2000分別對小鼠神經(jīng)元細胞進行轉(zhuǎn)染綠色熒光白蛋白（GFP）,，轉(zhuǎn)染24小時后觀察轉(zhuǎn)染效果,，LipoFectMax? 轉(zhuǎn)染效率（左圖）比LipoFectamine®2000（右圖）高5倍。

LipoFectMax? 轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染試劑操作流程

細胞毒性低圖2.LipoFectMax? ,，LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉(zhuǎn)染操作，通過計算轉(zhuǎn)染后的細胞存活率比較細胞毒性,。

原代細胞直接分離自組織并在適當條件下增殖,因此,，它們的形態(tài)學和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對于連續(xù)細胞系,，它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染,。在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后，原代培養(yǎng)物變成了一種細胞系,。源自于原代培養(yǎng)物的細胞系具有有限的壽命（即它們是有限細胞系）,，且隨著傳代的進行，具有比較高的生長能力的細胞逐漸占據(jù)支配地位,，從而造成了細胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形,。相對來說，這一類細胞要比原代細胞使用起來更為方便,，尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代。各種轉(zhuǎn)染試劑成分分析.

超級好用的siRNA和miRNA轉(zhuǎn)染試劑——HiPerFect高效沉默低脫靶：HiPerFect是小RNA轉(zhuǎn)染試劑,，這種非脂質(zhì)體的脂質(zhì)分子可以在siRNA低至100pM濃度的條件下轉(zhuǎn)染（推薦濃度是1nM-5nM）,。保持高效基因沉默的同時降低脫靶效應,，正是這一產(chǎn)品的精髓所在。除了siRNA,，HiPerFect還能夠用于miRNA模擬物和***劑的轉(zhuǎn)染，滿足miRNA功能分析的需要,。操作簡單,，方便快速：HiperFect轉(zhuǎn)染試劑的方便程度也是***的，甚至***之內(nèi)可以完成再次接種,、轉(zhuǎn)染到檢測結(jié)果,！這對于高通量反應簡直是求之不得的福音：轉(zhuǎn)染前將細胞按比例接種到24孔培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)基可以是含有***和血清的,，在37度培養(yǎng)箱中保溫,。CycloFect轉(zhuǎn)染試劑,你了解多少?上海常用轉(zhuǎn)染試劑供應商

轉(zhuǎn)染的細胞類型可簡單分為兩大類，連續(xù)細胞系和原代細胞.動物細胞轉(zhuǎn)染試劑對照

對 HepG2 細胞轉(zhuǎn)染效率的比較

右圖：使用以上轉(zhuǎn)染試劑將 GFP 的 cDNA（pEGFP-N3）按照生產(chǎn)商的提供的轉(zhuǎn)染步驟轉(zhuǎn)染到 HepG2 細胞（在膠原預處理的培養(yǎng)皿中培養(yǎng)）,。在轉(zhuǎn)染 48 小時之后,，用流式細胞儀檢測 GFP 陽性細胞（%）和熒光強度。

左圖：血清和***存在的條件下能提高 LipoD293 試劑（升級版）對在 HepG2 細胞的轉(zhuǎn)染效率,。通過三種不同的條件下轉(zhuǎn)染 HepG2 細胞（生長在膠原處理的培養(yǎng)皿上）---無血清和***,，10% 血清和***的存在，轉(zhuǎn)染 5 小時后換液和不換液,。

動物細胞轉(zhuǎn)染試劑對照

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