細(xì)胞轉(zhuǎn)染過程:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡介：X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,，溶于80%乙醇中,，經(jīng)0.2μm濾膜過濾,，然后封裝于玻璃小瓶中，適用于細(xì)胞分析的多種實(shí)驗(yàn),。優(yōu)勢(shì)：1.具有細(xì)胞毒性極低,、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高，生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù),。2.操作簡便,、節(jié)省時(shí)間，只需對(duì)X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行簡單稀釋,，再與質(zhì)粒DNA共同孵育,，即可直接向細(xì)胞添加反應(yīng)混合物(有無血清均可)。3.對(duì)于常用細(xì)胞無需進(jìn)行費(fèi)時(shí)費(fèi)力從而造成了細(xì)胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形,。上海轉(zhuǎn)染試劑配方

LNCap細(xì)胞的培養(yǎng)和傳代嚴(yán)格由ATCC建議的操作步驟進(jìn)行,，與pBabe-hygro-SSeCKs（1.5ug）和pEGFP-N3（1:1，共1.0微克）共轉(zhuǎn)染（6孔板中每孔的量）,，并用LipoD293?試劑（左圖）和FugeneHD（右圖）分別按照生產(chǎn)制造商的科學(xué)實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行轉(zhuǎn)染,。轉(zhuǎn)染24小時(shí)后，用尼康Eclipse2000熒光顯微鏡檢測(cè)GFP熒光，以此來評(píng)價(jià)轉(zhuǎn)染效率,。在血清和***的存在下,，HepG2和SaoS-2細(xì)胞用pEGFP-N3和pSV-β-半乳糖苷酶DNAs分別轉(zhuǎn)染達(dá)到95%的細(xì)胞融合。轉(zhuǎn)染48小時(shí)后,，分別通過Zeiss510激光共聚焦顯微鏡和β-半乳糖苷酶染色試劑盒檢測(cè)效率,。上海動(dòng)物細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑推薦研發(fā)合成的針對(duì)siRNA、microRNA,、mimic,、inhibitor、mRNA和shRNA等RNA的轉(zhuǎn)染試劑,。

細(xì)胞轉(zhuǎn)染如果以上都沒有問題,，那么******重要的環(huán)節(jié)就是慢***質(zhì)粒轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞了，轉(zhuǎn)染效果直接影響著出毒效率,，那么一款好的轉(zhuǎn)染試劑在此時(shí)就是至關(guān)重要了,！在這里給大家推薦一款性價(jià)比超高的轉(zhuǎn)染試劑，美國Polysciences家的PEIMAX40K,！PEIMAX40K（也稱為游離堿PEI22K）是一種功能強(qiáng)大,，值得信賴且經(jīng)濟(jì)高效的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染試劑。在HEK293和CHO表達(dá)系統(tǒng)中,，能在96孔板至100L生物反應(yīng)器范圍內(nèi)提供始終如一高效的基因表達(dá),。越來越多的研究人員和公司使用PEI來替代其他類型轉(zhuǎn)染試劑，以獲得他們所需要的優(yōu)勢(shì),。相較于其他類型轉(zhuǎn)染試劑,，使用自行制備的PEI轉(zhuǎn)染試劑可以使總轉(zhuǎn)染成本降低高達(dá)40％左右。ThomasM,，etal（2005）研究數(shù)據(jù)表明,，去乙酰化的PEI40000（PolyethylenimineMAX40000）體外質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染效率提高21倍,，小鼠體內(nèi)靶向效率達(dá)到10000倍,，隨之肺部特異療效顯示增強(qiáng)1500倍。

對(duì)CHO細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較右圖：使用以上轉(zhuǎn)染試劑將編碼熒光素酶蛋白的cDNA（phRL-CMV）和綠色熒光蛋白GFP的cDNA按照生產(chǎn)商的提供的轉(zhuǎn)染步驟分別轉(zhuǎn)染到CHO細(xì)胞,。在轉(zhuǎn)染24小時(shí)后,，熒光素酶的活性使用Beckman公司的化學(xué)發(fā)光監(jiān)測(cè)器測(cè)定；GFP陽性細(xì)胞率使用BD公司的FACS檢測(cè),。左圖：LipoD293試劑（升級(jí)版）和Lipofecatmine2000（L2K）,TransIT以及Fugene6的價(jià)格比較（美元/1000微升）,。所有的價(jià)格是從生產(chǎn)制造商的網(wǎng)站上收集對(duì)CHO細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較右圖：使用以上轉(zhuǎn)染試劑將編碼熒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型可簡單分為兩大類，連續(xù)細(xì)胞系和原代細(xì)胞,。

圖5.Invivofectamine3.0試劑與靶向FVII的siRNA在單次靜脈注射后可在肝臟中引起劑量反應(yīng)的敲低現(xiàn)象,。Invivofectamine3.0試劑與靶向FVII的AmbioninvivosiRNA以0.02到2mg/kg的劑量進(jìn)行注射,。隨后分離血清并檢測(cè)FVII蛋白的水平（Biophen顯色檢測(cè)）。持續(xù)敲低能力在單次注射后可觀察到更長的敲低時(shí)間圖6.使用三種不同濃度的靶向FactorVII(FVII)的siRNA研究劑量效應(yīng),。siRNA分子與Invivofectamine3.0試劑形成復(fù)合物后分別以1,、0.5、及0.25mg/kg的劑量進(jìn)行注射,。在第2,、5、9,、16,、23及30日收集血清，并使用顯色法對(duì)血清進(jìn)行分析以確定FVII蛋白的敲低效果,。低毒性采用Lipofectamine RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞時(shí),，實(shí)現(xiàn)了比較好的基因***效果和比較低的細(xì)胞毒性。上海轉(zhuǎn)染試劑配方

將EntransterTM-R4000稀釋液和agomir稀釋液充分混合.上海轉(zhuǎn)染試劑配方

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上海儒安生物科技有限公司是一家生產(chǎn)型類企業(yè),，積極探索行業(yè)發(fā)展,，努力實(shí)現(xiàn)產(chǎn)品創(chuàng)新,。公司是一家有限責(zé)任公司企業(yè)，以誠信務(wù)實(shí)的創(chuàng)業(yè)精神,、專業(yè)的管理團(tuán)隊(duì),、踏實(shí)的職工隊(duì)伍，努力為廣大用戶提供***的產(chǎn)品,。以滿足顧客要求為己任,；以顧客永遠(yuǎn)滿意為標(biāo)準(zhǔn)；以保持行業(yè)優(yōu)先為目標(biāo),，提供***的細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,，ecl發(fā)光液,，cck8細(xì)胞增殖，內(nèi)參抗體,。上海儒安生物科技自成立以來,，一直堅(jiān)持走正規(guī)化、專業(yè)化路線,，得到了廣大客戶及社會(huì)各界的普遍認(rèn)可與大力支持,。