細(xì)胞轉(zhuǎn)染過程:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,,溶于80%乙醇中,經(jīng)0.2μm濾膜過濾,,然后封裝于玻璃小瓶中,,適用于細(xì)胞分析的多種實驗。優(yōu)勢:1.具有細(xì)胞毒性極低,、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高,,生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù)。2.操作簡便,、節(jié)省時間,,只需對X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行簡單稀釋,再與質(zhì)粒DNA共同孵育,即可直接向細(xì)胞添加反應(yīng)混合物(有無血清均可),。3.對于常用細(xì)胞無需進(jìn)行費時費力的優(yōu)化pei轉(zhuǎn)染試劑說明書主要內(nèi)容是什么?上海核酸轉(zhuǎn)染試劑原理
轉(zhuǎn)染是將外源核酸導(dǎo)入真核細(xì)胞的過程,,是細(xì)胞和分子生物學(xué)研究的重要工具,也是大部分的生物和分子生物領(lǐng)域的科研黨們繞不開的話題,。然而常常聽到的抱怨是"轉(zhuǎn)染效率太低""轉(zhuǎn)染完細(xì)胞全漂了""轉(zhuǎn)染后忘記給細(xì)胞換液了",,真所謂辛辛苦苦實驗N多回,一夜回到解放前……眾所周知,,影響轉(zhuǎn)染成功的因素非常多,,包括細(xì)胞質(zhì)量、核酸質(zhì)量,、微生物污染,、轉(zhuǎn)染試劑等。各種細(xì)胞使用的轉(zhuǎn)染條件都可能不同,,現(xiàn)實中也并沒有一種放之四海而皆準(zhǔn)的方案,。上海DNA轉(zhuǎn)染試劑分裝正確的了解您希望輸送的運載物是選擇可靠轉(zhuǎn)染產(chǎn)品的第一步。
圖3. 用于轉(zhuǎn)染的Invivofectamine 3.0試劑及RNAi復(fù)合物非常容易獲得:只需簡單地混合,,并進(jìn)行孵育(30min),、稀釋、及注射即可,。
高效,、靶向敲低
在實驗靶標(biāo)中可觀察到高達(dá)85%的敲低效果
圖4. 使用Invivofectamine 3.0試劑可在單次靜脈注射后即可在肝臟中實現(xiàn)靶向敲低。Invivofectamine 3.0試劑與靶向Factor VII (FVII)或PPIB mRNA的siRNA組成的復(fù)合物,,以每千克小鼠體重1 mg(mg/kg)的注射量進(jìn)行注射,,**終靶向mRNA水平出現(xiàn)了高達(dá)85%的敲低(使用TaqMan分析對敲低進(jìn)行評估)。
圖2.采用LipofectamineRNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞時,,實現(xiàn)了比較好的基因***效果和比較低的細(xì)胞毒性,。試驗采用的LipofectamineRNAiMAX試劑劑量范圍為0.1μL-1.0μL之間,在維持優(yōu)良的細(xì)胞活力的同時,,實現(xiàn)了p53基因表達(dá)水平的有效敲低.功能多樣簡便的實驗方案,,易于針對***的細(xì)胞系進(jìn)行優(yōu)化Invivofectamine?3.0Reagent突破性的體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑Invivofectamine3.0試劑是一種突破性的體內(nèi)RNAi輸送試劑,可大幅改善實驗性能,,使用微克級的siRNA即可達(dá)到高達(dá)85%的敲低效果,。將EntransterTM-R4000稀釋液和agomir稀釋液充分混合.
原代細(xì)胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖。因此,,它們的形態(tài)學(xué)和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對于連續(xù)細(xì)胞系,,它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染,。在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后,原代培養(yǎng)物變成了一種細(xì)胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細(xì)胞系具有有限的壽命(即它們是有限細(xì)胞系),,且隨著傳代的進(jìn)行,,具有比較高的生長能力的細(xì)胞逐漸占據(jù)支配地位,從而造成了細(xì)胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形,。相對來說,,這一類細(xì)胞要比原代細(xì)胞使用起來更為方便,尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代,。 采用Lipofectamine RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞時,,實現(xiàn)了比較好的基因***效果和比較低的細(xì)胞毒性。roche轉(zhuǎn)染試劑公司
世界上低價的細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑PEI,這里有**詳細(xì)的操作步驟!上海核酸轉(zhuǎn)染試劑原理
羅氏X-TremeGENE便是新一代轉(zhuǎn)染試劑的佼佼者,,升級版的多組分混合試劑,,兼具極高轉(zhuǎn)染效率和極低細(xì)胞毒性,在超過350株真核細(xì)胞株中獲得了高效轉(zhuǎn)染的驗證,,尤其針對難轉(zhuǎn)染細(xì)胞株亦有出色表現(xiàn),。圖1.兩種試劑對CHO-K1細(xì)胞轉(zhuǎn)染帶GFP標(biāo)記的質(zhì)粒,A和C是轉(zhuǎn)染后熒光顯微圖,,B和D是明場顯微圖.與競爭產(chǎn)品比較,,X-tremeGENEHP表現(xiàn)出更優(yōu)的轉(zhuǎn)染效率更低的細(xì)胞毒性圖2.不同試劑在含血清的培養(yǎng)基中對四種很難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞株進(jìn)行轉(zhuǎn)染,X-tremeGENEHP試劑遠(yuǎn)優(yōu)于其他試劑超過350種細(xì)胞株的高效轉(zhuǎn)染驗證還有一個好消息X-TremeGENE轉(zhuǎn)染試劑正在進(jìn)行8折促銷哦快去搶購吧~上海核酸轉(zhuǎn)染試劑原理
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