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上海動(dòng)物轉(zhuǎn)染試劑推薦

來源: 發(fā)布時(shí)間:2022-06-09

圖2.采用LipofectamineRNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞時(shí),,實(shí)現(xiàn)了比較好的基因***效果和比較低的細(xì)胞毒性,。試驗(yàn)采用的LipofectamineRNAiMAX試劑劑量范圍為0.1μL-1.0μL之間,在維持優(yōu)良的細(xì)胞活力的同時(shí),,實(shí)現(xiàn)了p53基因表達(dá)水平的有效敲低.功能多樣簡(jiǎn)便的實(shí)驗(yàn)方案,,易于針對(duì)***的細(xì)胞系進(jìn)行優(yōu)化Invivofectamine?3.0Reagent突破性的體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑Invivofectamine3.0試劑是一種突破性的體內(nèi)RNAi輸送試劑,可大幅改善實(shí)驗(yàn)性能,,使用微克級(jí)的siRNA即可達(dá)到高達(dá)85%的敲低效果,。細(xì)胞轉(zhuǎn)染必備——高效低毒轉(zhuǎn)染試劑.上海動(dòng)物轉(zhuǎn)染試劑推薦

轉(zhuǎn)染 48 小時(shí)后,使用尼康熒光顯微鏡 GFP 熒光進(jìn)行成像(左側(cè)四幅圖),,A:LipoD293,; B:293fectin;C:Xfect 和 D:Fugene 6.  帶有 6xHis 標(biāo)記的 GFP 熒光蛋白使用 Ni-NTA 親和柱技術(shù)實(shí)現(xiàn)分離,。5 微升洗脫液載入 SDS-PAGE 凝膠電泳分離并進(jìn)行 Coomassie 亮藍(lán)染色(右上圖 E),,道 1 為 LipoD293293、道 2 為標(biāo)準(zhǔn)蛋白分子,、道 3 為 Xfect,、道 4 為 293fectin 和道 5 為 Fugene 6。這四種轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)生蛋白質(zhì)的效率被進(jìn)一步定量(見右下圖 F),。產(chǎn)生慢***的比較

通過 LipoD293? 試劑(升級(jí)版)和 Lipofectamine LTX(LTX)試劑將三個(gè) cDNAs 共轉(zhuǎn)染進(jìn) 293T 細(xì)胞,。一個(gè) GFP 載體,pHR-SIN-cppt-CMVEWP 被用來測(cè)定慢***的滴度,。在 24 孔板中每孔加入 1x10^5 293T 細(xì)胞,其次是分別添加不同量的慢定都上清液,,1 微升(上圖)和 10 微升(下圖),。 上海動(dòng)物轉(zhuǎn)染試劑推薦3.0試劑進(jìn)行轉(zhuǎn)染的每個(gè)個(gè)體間所檢測(cè)的生物標(biāo)志物的水平與未注射該試劑的個(gè)體相比并沒有***差異。

十全十美難,,十全九美卻可以通過選擇一款好的轉(zhuǎn)染試劑來實(shí)現(xiàn),。理想的轉(zhuǎn)染試劑包括要具有較高的轉(zhuǎn)染效率,,細(xì)胞毒性低,操作簡(jiǎn)單可重復(fù),,價(jià)格還要可愛?,F(xiàn)在大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體系列轉(zhuǎn)染試劑,但脂質(zhì)體對(duì)細(xì)胞毒性大,,某些細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率還很低,,看單孔的價(jià)格也很不美好。尤其是在轉(zhuǎn)染RNA方面,,脂質(zhì)體的劣勢(shì)較明顯,。QIAGEN在轉(zhuǎn)染試劑領(lǐng)域的研發(fā)思路與其核酸純化領(lǐng)域的精而專,全而深不同,。在轉(zhuǎn)染試劑的研發(fā)過程中,,另辟蹊徑,研精致思進(jìn)而做到小而美的轉(zhuǎn)染產(chǎn)品,。從市面上眾多轉(zhuǎn)染試劑的一片紅海中,,神奇的開辟出一塊藍(lán)海,為客戶烹制出了幾款高效,、快速,、低毒又親民的轉(zhuǎn)染試劑私房菜。

細(xì)胞轉(zhuǎn)染過程:X-tremeGENE 9 DNA 轉(zhuǎn)染試劑   簡(jiǎn)介:

X-tremeGENE 9 DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,,溶于80%乙醇中,,經(jīng)0.2 μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,,適用于細(xì)胞分析的多種實(shí)驗(yàn),。

優(yōu)勢(shì):1.具有細(xì)胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高,,生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù),。

2.操作簡(jiǎn)便、節(jié)省時(shí)間,,只需對(duì)X-tremeGENE 9 DNA轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行簡(jiǎn)單稀釋,,再與質(zhì)粒DNA共同孵育,即可直接向細(xì)胞添加反應(yīng)混合物(有無血清均可),。

3.對(duì)于常用細(xì)胞無需進(jìn)行費(fèi)時(shí)費(fèi)力的優(yōu)化工作,。 包括常見細(xì)胞類型、干細(xì)胞,、原代細(xì)胞以及歷來難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型)提供如此簡(jiǎn)便,、高效的siRNA輸送效果。

用 LipoD293? 體外 DNA 轉(zhuǎn)染試劑(Ver. II)(上圖)和受歡迎的品牌產(chǎn)品 Invitrogen 公司的 293fectin?(下圖)轉(zhuǎn)染 pEGFP-C1 質(zhì)粒到 HEK293 細(xì)胞中,。轉(zhuǎn)染 24 小時(shí)后,,細(xì)胞的尼康 Eclipse 熒光顯微鏡 DIC 成像圖(左側(cè))和熒光成像圖(右側(cè)),。

對(duì)懸浮 HEK293F 產(chǎn)生蛋白質(zhì)效率的比較/

30 毫升的 293F 細(xì)胞分別使用 LipoD293?試劑、293fectin,、Xfect 和 Fugene 6 等轉(zhuǎn)染試劑按照生產(chǎn)商的標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)染步驟將 pEGFP-6xHis 質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)胞表達(dá),,用量為 LipoD293? 試劑,20 微克,,所有其他三種轉(zhuǎn)染試劑均使用 30 微克質(zhì)粒 DNA,。 原代細(xì)胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖.上海神經(jīng)細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑配制

各種轉(zhuǎn)染試劑成分分析.上海動(dòng)物轉(zhuǎn)染試劑推薦

用LipoFectMax?轉(zhuǎn)染Hela細(xì)胞,左圖轉(zhuǎn)染GFPcDNA,,右圖共轉(zhuǎn)染GFPCDNA和GFP靶向siRNA,。轉(zhuǎn)染siRNA后可以從右圖明顯看到基因沉默。4適用于神經(jīng)細(xì)胞的轉(zhuǎn)染圖4.用LipoFectMax?和LipoFectamine®2000分別對(duì)小鼠神經(jīng)元細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染綠色熒光白蛋白(GFP),,轉(zhuǎn)染24小時(shí)后觀察轉(zhuǎn)染效果,,LipoFectMax?轉(zhuǎn)染效率(左圖)比LipoFectamine®2000(右圖)高5倍。LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染試劑操作流程細(xì)胞毒性低圖2.LipoFectMax?,,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對(duì)A549細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染操作,,通過計(jì)算轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞存活率比較細(xì)胞毒性.上海動(dòng)物轉(zhuǎn)染試劑推薦

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