用LipoFectMax?轉(zhuǎn)染Hela細(xì)胞,左圖轉(zhuǎn)染GFPcDNA,,右圖共轉(zhuǎn)染GFPCDNA和GFP靶向siRNA,。轉(zhuǎn)染siRNA后可以從右圖明顯看到基因沉默。4適用于神經(jīng)細(xì)胞的轉(zhuǎn)染圖4.用LipoFectMax?和LipoFectamine®2000分別對(duì)小鼠神經(jīng)元細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染綠色熒光白蛋白(GFP),,轉(zhuǎn)染24小時(shí)后觀察轉(zhuǎn)染效果,,LipoFectMax?轉(zhuǎn)染效率(左圖)比LipoFectamine®2000(右圖)高5倍。LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染試劑操作流程細(xì)胞毒性低圖2.LipoFectMax?,,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對(duì)A549細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染操作,,通過計(jì)算轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞存活率比較細(xì)胞毒性.用于siRNA的轉(zhuǎn)染試劑,還有通用型轉(zhuǎn)染試劑Lipofectamine?.上海核酸轉(zhuǎn)染試劑選購(gòu)
產(chǎn)生慢***的比較通過LipoD293?試劑(升級(jí)版)和LipofectamineLTX(LTX)試劑將三個(gè)cDNAs共轉(zhuǎn)染進(jìn)293T細(xì)胞,。一個(gè)GFP載體,,pHR-SIN-cppt-CMVEWP被用來測(cè)定慢***的滴度。在24孔板中每孔加入1x10^5293T細(xì)胞,,其次是分別添加不同量的慢定都上清液,,1微升(上圖)和10微升(下圖)。5天后,,細(xì)胞通過流式細(xì)胞儀檢測(cè),。右上角的數(shù)字表明轉(zhuǎn)導(dǎo)的細(xì)胞的百分比來測(cè)定慢***的滴度。由LipoD293?andLTX產(chǎn)生的慢***的滴度被量化,,分為是8x10^6和3x10^6tu/ml,。昆蟲細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑配方mRNA細(xì)胞&***轉(zhuǎn)染試劑來助力.
LipofectamineRNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑是先進(jìn)、高效的siRNA輸送解決方案,。目前尚無(wú)其他siRNA轉(zhuǎn)染試劑能夠在***的細(xì)胞系中(包括常見細(xì)胞類型,、干細(xì)胞、原代細(xì)胞以及歷來難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型)提供如此簡(jiǎn)便,、高效的siRNA輸送效果。高效可在低siRNA濃度下獲得優(yōu)良的轉(zhuǎn)染效果相對(duì)于其他的siRNA轉(zhuǎn)染試劑,,LipofectamineRNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑可以獲得更佳的基因***效果,。同在10nM和1nMp53siRNA下,LipofectamineRNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑實(shí)現(xiàn)了更高的有效***細(xì)胞/未轉(zhuǎn)染細(xì)胞比率,,超過其他RNAi試劑,。
圖5.Invivofectamine3.0試劑與靶向FVII的siRNA在單次靜脈注射后可在肝臟中引起劑量反應(yīng)的敲低現(xiàn)象。Invivofectamine3.0試劑與靶向FVII的AmbioninvivosiRNA以0.02到2mg/kg的劑量進(jìn)行注射,。隨后分離血清并檢測(cè)FVII蛋白的水平(Biophen顯色檢測(cè)),。持續(xù)敲低能力在單次注射后可觀察到更長(zhǎng)的敲低時(shí)間圖6.使用三種不同濃度的靶向FactorVII(FVII)的siRNA研究劑量效應(yīng),。siRNA分子與Invivofectamine3.0試劑形成復(fù)合物后分別以1、0.5,、及0.25mg/kg的劑量進(jìn)行注射,。在第2、5,、9,、16、23及30日收集血清,,并使用顯色法對(duì)血清進(jìn)行分析以確定FVII蛋白的敲低效果,。低毒性連續(xù)細(xì)胞系具有無(wú)限增殖的潛能,通常要比原代或有限細(xì)胞更易處理.
對(duì)CHO細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較右圖:使用以上轉(zhuǎn)染試劑將編碼熒光素酶蛋白的cDNA(phRL-CMV)和綠色熒光蛋白GFP的cDNA按照生產(chǎn)商的提供的轉(zhuǎn)染步驟分別轉(zhuǎn)染到CHO細(xì)胞,。在轉(zhuǎn)染24小時(shí)后,,熒光素酶的活性使用Beckman公司的化學(xué)發(fā)光監(jiān)測(cè)器測(cè)定;GFP陽(yáng)性細(xì)胞率使用BD公司的FACS檢測(cè),。左圖:LipoD293試劑(升級(jí)版)和Lipofecatmine2000(L2K),TransIT以及Fugene6的價(jià)格比較(美元/1000微升),。所有的價(jià)格是從生產(chǎn)制造商的網(wǎng)站上收集對(duì)CHO細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較右圖:使用以上轉(zhuǎn)染試劑將編碼熒轉(zhuǎn)染產(chǎn)品知多少——siRNA轉(zhuǎn)染試劑.昆蟲細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑配方
但相對(duì)于連續(xù)細(xì)胞系,它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染,。上海核酸轉(zhuǎn)染試劑選購(gòu)
用LipoD293?體外DNA轉(zhuǎn)染試劑(Ver.II)(上圖)和受歡迎的品牌產(chǎn)品Invitrogen公司的293fectin?(下圖)轉(zhuǎn)染pEGFP-C1質(zhì)粒到HEK293細(xì)胞中,。轉(zhuǎn)染24小時(shí)后,細(xì)胞的尼康Eclipse熒光顯微鏡DIC成像圖(左側(cè))和熒光成像圖(右側(cè)),。對(duì)懸浮HEK293F產(chǎn)生蛋白質(zhì)效率的比較30毫升的293F細(xì)胞分別使用LipoD293?試劑,、293fectin、Xfect和Fugene6等轉(zhuǎn)染試劑按照生產(chǎn)商的標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)染步驟將pEGFP-6xHis質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)胞表達(dá),,用量為L(zhǎng)ipoD293?試劑,,20微克,所有其他三種轉(zhuǎn)染試劑均使用30微克質(zhì)粒DNA,。上海核酸轉(zhuǎn)染試劑選購(gòu)
上海儒安生物科技,,2016-09-20正式啟動(dòng),成立了細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,,ecl發(fā)光液,,cck8細(xì)胞增殖,內(nèi)參抗體等幾大市場(chǎng)布局,,應(yīng)對(duì)行業(yè)變化,,順應(yīng)市場(chǎng)趨勢(shì)發(fā)展,在創(chuàng)新中尋求突破,,進(jìn)而提升上海儒安生物的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力,,把握市場(chǎng)機(jī)遇,推動(dòng)醫(yī)藥健康產(chǎn)業(yè)的進(jìn)步。旗下上海儒安生物在醫(yī)藥健康行業(yè)擁有一定的地位,,品牌價(jià)值持續(xù)增長(zhǎng),,有望成為行業(yè)中的佼佼者。同時(shí),,企業(yè)針對(duì)用戶,,在細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,ecl發(fā)光液,,cck8細(xì)胞增殖,,內(nèi)參抗體等幾大領(lǐng)域,提供更多,、更豐富的醫(yī)藥健康產(chǎn)品,,進(jìn)一步為全國(guó)更多單位和企業(yè)提供更具針對(duì)性的醫(yī)藥健康服務(wù)。值得一提的是,,上海儒安生物科技致力于為用戶帶去更為定向,、專業(yè)的醫(yī)藥健康一體化解決方案,在有效降低用戶成本的同時(shí),,更能憑借科學(xué)的技術(shù)讓用戶極大限度地挖掘上海儒安生物的應(yīng)用潛能,。