CCK-8細胞增殖與毒性檢測試劑盒是一種基于水溶性四唑鹽WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽)的細胞增殖和細胞毒性快速高靈敏度的檢測試劑盒,。WST-8是一種類似于MTT但靈敏度高于MTT的化合物,，在電子耦合試劑1-Methoxy PMS存在的情況下,，可以被線粒體內的脫氫酶還原為可溶性的橙黃色甲臜(formazan),。甲臜的數(shù)量與活細胞的數(shù)量成正比。細胞增殖越多越快,，則顏色越深;細胞的毒性越大,，則顏色越淺。同樣的細胞,，溶液顏色的深淺和細胞的數(shù)目成線性關系,。細胞增殖實驗產品公司？武漢edu細胞增殖試劑盒

上海儒安生物科技有限公司CCK8檢測細胞增殖/毒性的原理CellCountingKit-8（簡稱CCK-8）試劑可用于簡便而準確的細胞增殖和毒性分析,。其基本原理為：該試劑中含有WST-8【化學名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽】,，它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓***二甲酯（1-MethoxyPMS）的作用下被細胞中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚產物（Formazandye）,。生成的甲瓚物的數(shù)量與活細胞的數(shù)量成正比。因此可利用這一特性直接進行細胞增殖和毒性分析,。用途：***篩選,、細胞增殖測定,、細胞毒性測定,、**藥敏試驗CCK8的優(yōu)點：使用方便，省去了洗滌細胞,，不需要放射性同位素和有機溶劑,；CCK-8法能快速檢測；CCK-8法的檢測靈敏度很高,，甚至可以測定較低細胞密度,；CCK-8法的重復性優(yōu)于MTT法；CCK-8法對細胞毒性??；CCK-8細胞活性檢測試劑中為1瓶溶液，毋需預制,，即開即用,。CCK8的缺點：與MTT法相比，CCK8和XTT的價格比較貴,。CCK8試劑的顏色為淡紅色,，與含酚紅的培養(yǎng)基顏色接近，不注意的話容易產生漏加或多加,。與以往的增殖/毒性測定試劑相比較：檢測方法MTT法XTT法WST-1法CCK8法甲臢產物的水溶性差,。南京精原細胞增殖細胞增殖有什么方法？

并用培養(yǎng)基洗滌細胞兩次,，然后加入新的培養(yǎng)基）,，去掉***影響。當然***影響比較小的情況下,，可以不更換培養(yǎng)基,，直接扣除培養(yǎng)基中加入***后的空白吸收即可。三,、CCK8檢測細胞增殖/毒性的注意事項當使用標準96孔板時,，貼壁細胞的**小接種量至少為1,000個/孔(100μl培養(yǎng)基)。檢測白細胞時的靈敏度相對較低,，因此推薦接種量不低于2,500個/孔(100μl培養(yǎng)基),。酚紅和血清對CCK8法的檢測不會造成干擾，可以通過扣除空白孔中本底的吸光度而消去,。CCK8可以檢測大腸桿菌,，但不能檢測酵母細胞,。在細胞增殖實驗每次測定的過程中需要避免細菌污染，以免影響結果,。CCK-8在0-5℃下能夠保存至少6個月,，在-20℃下避光可以保存1年。當在培養(yǎng)箱內培養(yǎng)時,，培養(yǎng)板**外一圈的孔**容易干燥揮發(fā),，由于體積不準確而增加誤差。一般情況下,，**外一圈的孔只加培養(yǎng)基,，不作為測定孔用。在培養(yǎng)基中加入CCK8,，培養(yǎng)一定的時間,，測定450nm的吸光度即為空白對照。在做加藥實驗時,，還應考慮***的吸收,，可在加入***的培養(yǎng)基中加入CCK8，培養(yǎng)一定的時間,，測定450nm的吸光度作為空白對照,。金屬對CCK-8顯色有影響：當終濃度為1mM的氯化亞鉛、氯化鐵,、***銅會***5%,、15%、90%的顯色反應,，使靈敏度降級,。

細胞增殖周期細胞各組成部份在不斷發(fā)展變化的基礎上還要不斷增殖，產生新細胞,，以代替衰老,、死亡和創(chuàng)傷所損失的細胞，這是機體新陳代謝的表現(xiàn),，也是機體不斷生長發(fā)育,、賴以生存和延續(xù)種族的基礎。細胞各組成部份在不斷發(fā)展變化的基礎上還要不斷增殖,，產生新細胞,，以代替衰老、死亡和創(chuàng)傷所損失的細胞,，這是機體新陳代謝的表現(xiàn),，也是機體不斷生長發(fā)育、賴以生存和延續(xù)種族的基礎。細胞以分裂的方式進行增殖,，每次分裂后所產生的新細胞必須經過生長增大,，才能再分裂。現(xiàn)在把細胞增殖必須經過生長到分裂的過程稱為細胞周期,。換句話說,，細胞增殖周期（或細胞周期）是指細胞從一次分裂結束開始生長，到下一次分裂結束所經歷的過程,。細胞增殖周期可分為兩個時期,，即間期和分裂期。細胞增殖有什么方法,。

Q：CCK-8能否用于細胞染色,？

A：CCK-8不能用于細胞染色,，CCK-8檢測原理是高水溶性的四唑鹽WST-8在電子耦合試劑存在下還原產生水溶性formazan形式的染料,，WST-8及formazan是高度水溶性的，不會進入細胞內對細胞進行染色,。

Q：沒有450 nm的濾光片,，能否使用其他濾光片？

A：如果您沒有450 nm濾光片,。您也可以使用吸光度在430 nm和490 nm之間的濾光片, 450 nm濾光片具有比較好靈敏度,。

Q：哪些物質會干擾CCK-8的測定？

A：WST-8可能與還原劑反應生成WST-8 formazan,，如果使用還原劑（例如一些抗氧化劑）會增加OD值,；若存在氧化性物質則會阻擋CCK-8測定反應，減小OD值,；此外,，培養(yǎng)基中的酚紅不會影響實驗結果，酚紅的吸光度可以在計算時,，通過扣除空白孔中本底的吸光度而消去,。 CCK8的實驗步驟、實驗分組及檢測方法,。南京肝竇內皮細胞增殖檢測

細胞增殖是生活細胞的重要生理功能之一,。武漢edu細胞增殖試劑盒

Q：在做刺激實驗時，對測定是否有影響,？

A：如果有還原性,，則會與CCK-8發(fā)生反應，影響吸光度,；金屬離子的存在可能會影響CCK-8的靈敏度,。終濃度為1 mM 的氯化亞鉛、氯化鐵,、硫酸銅會5% ,、15% ,、90%的顯色反應，使靈敏度降低,。如果終濃度是10 mM 的話,。

Q：如果吸光度值太低，可以采取什么辦法,？

A：適當增加細胞數(shù)量或延長加入CCK-8溶液后的孵育時間,。

Q：如果吸光度值太高，可以采取什么辦法,？

A：適當減少細胞數(shù)量（建議正式實驗前優(yōu)化細胞數(shù)量與熒光值之間的關系）或縮短加入CCK-8溶液后的孵育時間,。 武漢edu細胞增殖試劑盒

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