細胞復(fù)蘇

1. 從液氮容器中取出凍存管,，直接浸入37℃溫水中,，并不時搖動令其盡快融化。

2. 從37℃水浴中取出凍存管,，打開蓋子,，用吸管吸出細胞懸液，加到離心管并滴加10倍以上培養(yǎng)液,，混勻,；

3. 離心， 1000rpm,，5min,；

4. 棄去上清液，加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細胞,，計數(shù)，調(diào)整細胞密度,，接種培養(yǎng)瓶,，37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；

5. 次日更換一次培養(yǎng)液,，繼續(xù)培養(yǎng),。注意事項1．從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養(yǎng)細胞都可以用于凍存，但比較好為對數(shù)生長期細胞,。在凍存前***比較好換一次培養(yǎng)液,；

2．將凍存管放入液氮容器或從中取出時，要做好防護工作,，以免***,；

3．凍存和復(fù)蘇比較好用新配制的培養(yǎng)液。 細胞凍存液的原理是什么?北京凍存細胞凍存液一次加多少

上海儒安生物科技有限公司抗體去除液

產(chǎn)品簡介：

蛋白印跡膜再生液,，用于 Western blot中轉(zhuǎn)移了蛋白后膜的重復(fù)利用,。在 Western blot 中完成了一

抗二抗結(jié)合和后續(xù)的化學(xué)發(fā)光檢測后，有時還需要檢測Actin ,、Tubulin 等表達量相對穩(wěn)定的蛋白作為參

照,，或檢測其它蛋白進行比較。通過使用蛋白印跡膜再生液中特殊成份解離一抗二抗與印跡膜上抗原的結(jié)

合從而去除一抗二抗,，即可非常方便地重新利用同一張膜檢測其它蛋白,。與重新跑一個SDS-PAGE膠比較，

不但省時省力,，而且可以消除重新上樣而帶來的誤差,，使可比性更強。

不含有常用的 beta-巰基乙醇,， 無毒無味無害,， 室溫下使用， 可對同一膜進行 5 次以上的 Western Blot

檢測. 較快 15-30 鐘就可以完成全過程。

使用說明：

1. 用 TBS-T 將膜洗 10 分鐘×3 次,，將膜充分浸泡于適當體積再生液中,，室溫孵育 15－30 分鐘，并不時

搖晃,，洗脫某些抗體時需要較長的時間 30－60min,。

2. 用鑷子取出膜，用 TBS-T 洗滌緩沖液快速淋洗膜一次,，然后洗膜 5min,。

3. 此時膜上結(jié)合的抗體己被去處，用脫脂奶粉或 BSA 封閉,，進行下一輪抗體孵育,。 廣州新型細胞凍存液比例注意事項細胞凍存液的原理及配制方法?

3、取待凍存的細胞用胰蛋白酶消化（方法見細胞的傳代部分）,。用含血清的培養(yǎng)基將細胞沖洗下來,，將細胞懸液吸到無菌離心管中，800r/min離心5min,，棄上清,，收集細胞沉淀。如果是懸浮生長的細胞,，則可直接離心收集細胞,。

4、在沉淀中加入適量凍存液制成細胞懸液,，細胞濃度宜大,，300萬/mL左右，一般一個中方瓶中的細胞濃縮至1mL,，凍存液中為宜,。

5、細胞懸液裝入凍存管中,。用封口膜封裹瓶口,，做好標記。

6,、凍存管在4℃下存放30min,，轉(zhuǎn)放-20℃中30min，再轉(zhuǎn)入-70℃過夜,，之后即可放入液氮中長久保存,，注意進行登記。

根據(jù)細胞培養(yǎng)皿的大小加入適量細胞培養(yǎng)基后進行細胞常規(guī)培養(yǎng),。保存條件：4℃保存,，有效期一年,。若長不用可凍存于-20℃，有效期三年,。

產(chǎn)品質(zhì)量：無血清細胞凍存液經(jīng)過嚴格的內(nèi),，滲透壓，pH檢測,，并經(jīng)過0.1um濾膜過濾,，確保產(chǎn)品不含有細菌，支原體等污染,。

注意事項：1.請選擇對數(shù)生長期細胞進行凍存,，由于DMSO對細胞有一定的損傷，凍存細胞分裝后應(yīng)盡快轉(zhuǎn)移到-80℃冰箱,，減少在室溫存放時間,。如遇特殊情況，可先短暫放置于4℃并盡快轉(zhuǎn)移到-80℃冰箱,。 無血清細胞凍存液原理.

（一）細胞凍存配制含10%DMSO或甘油的細胞凍存液,，4℃預(yù)冷（新鮮配制的凍存液會產(chǎn)生大量的熱）；取對數(shù)生長期的細胞,，用細胞消化酶將單層生長的細胞消化下來；懸浮細胞則直接將細胞收集到離心管中,；離心1200rpm,，6min；去除上清液,，逐漸加入適量預(yù)冷的細胞凍存液,，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，計數(shù),，調(diào)節(jié)凍存液中的細胞終濃度為5×10e6/ml~1×10e7/ml,；將細胞分裝入凍存管中，每管1~1.5ml,；在凍存管上標明細胞的名稱,、凍存時間及操作人員姓名；凍存：標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/min,；到達-80℃時,，則可迅速放入液氮中。細胞凍存液在細胞建株和建系中,，及時凍存原始細胞是十分重要的,。廣州凍細胞凍存液加不加血清

復(fù)蘇細胞應(yīng)采用快速融化的方法，這樣可以保證細胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化.北京凍存細胞凍存液一次加多少

無血清細胞凍存液介紹 1. 是一種通用型的細胞凍存液,，可用于凍存人和各種動物細胞株,；

完全凍存液配方,，即開即用，方便快捷,；

非程序降溫,，-80℃低溫冰箱凍存長達5年；

特別配方（主要成分為DMSO和氨基酸）具有有效提高細胞凍存活率和復(fù)蘇活力,；

不含動物來源性蛋白,，能減少各類***、霉菌和支原體等的污染,，確保凍存細胞安全,；

可孔板（細胞培養(yǎng)板）凍存，可用于雜交瘤細胞的凍存液.

拳頭產(chǎn)品“無血清細胞凍存液”半價銷售（注：本次價格調(diào)整有效期限至結(jié)束）無血清細胞凍存液對比含血清細胞凍存液的優(yōu)勢

Cellregen無血清細胞凍存液存儲條件 儲存于4℃或-20℃,。質(zhì)量保障期從產(chǎn)品的生產(chǎn)日期起,，為期三年。

3個月以上沒有使用凍存液計劃時,，盡可能-20℃冷凍保存,。為避免重復(fù)凍融過程可能導(dǎo)致的凍存液品質(zhì)下降和性能降低，推薦將產(chǎn)品分裝成小管后,，再存放于-20℃冰箱凍存,。 北京凍存細胞凍存液一次加多少

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