細菌***對CCK8檢測的影響：我們做***的,，經(jīng)常會做到細菌或***對細胞的影響,。那這種情況下我們應(yīng)該怎么辦。其實細菌防御系統(tǒng)還是非常強大,，單獨和CCK-8在一起孵育時,，不會發(fā)生還原反應(yīng),，幾乎不會和細菌發(fā)生顯色反應(yīng)。而細菌不需要入胞繁殖,，所以結(jié)果還是可信的,。**討厭的就是***，我不知道有多少人是做***的,。***是需要入胞繁殖的,，而且需要借助細胞的東西來進行繁殖。繁殖過程中就需要消耗宿主的能量,，會產(chǎn)生氧化還原反應(yīng),，所以我用CCK-8來測定***對細胞活性的影響或者某個***對***復(fù)制的影響時，我都小心翼翼的測很多個時間點,，說實話,，效果不是很好。所以我比較喜歡中性紅,。CCK8細胞增殖實驗檢測原理.江蘇碧云天 cck8

再此,，給大家分享個小事情，有次,，因為實驗時間點已經(jīng)到,，但是盒子不夠，我們就用了某天的CCK-8試劑盒,，***出來的結(jié)果如圖3,。這個結(jié)果是我所不能接受的。后來用Sigma的再重復(fù)了一次,，如圖4,，這種有深有淺的才是該有的結(jié)果。我想說的是在有能力選擇范圍內(nèi),，盡量選擇好一點的試劑,，免得浪費時間。后來博士換了導(dǎo)師,，換了課題,，沒有再用Sigma的了，用了一個日本的牌子,，名字和貨號如下,，結(jié)果只能說justsoso,，肯定沒有Sigma的好用。二次上海cck8測細胞生長曲線***篩選：在測定一個***的毒性和安全有效濃度時,，經(jīng)常會用到CCK-8,。

在培養(yǎng)基中加入CCK8，培養(yǎng)一定的時間,，測定450nm的吸光度即為空白對照,。在做加藥實驗時，還應(yīng)考慮***的吸收,，可在加入***的培養(yǎng)基中加入CCK8,，培養(yǎng)一定的時間，測定450nm的吸光度作為空白對照,。·金屬對CCK-8顯色有影響：當(dāng)終濃度為1mM的氯化亞鉛,、氯化鐵、硫酸銅會***5%,、15%,、90%的顯色反應(yīng)，使靈敏度降級,。如果終濃度是10mM的話,，將會*****。·懸浮細胞由于染色比較困難,，一般需要增加細胞數(shù)量和延長培養(yǎng)時間,。·加入CCK-8時，如果細胞培養(yǎng)時間較長,，培養(yǎng)基顏色或pH值已變化,，建議換用新鮮的培養(yǎng)基。·用酶標(biāo)儀檢測前需確保每個孔內(nèi)沒有氣泡,，否則會干擾測定,，且要擦拭干凈樣品板了。

CCK法與其他細胞增殖/毒性檢測方法的優(yōu)勢比較檢測方法MTT法XTT法WST-1法CCK法甲臜產(chǎn)物的水溶性差（需加有機溶劑溶解再檢測）好好好產(chǎn)品性狀粉末2瓶溶液溶液1瓶溶液使用方法配成溶液后使用現(xiàn)配現(xiàn)用即開即用即開即用檢測靈敏度高很高很高高檢測時間較長較短較短**短檢測波長560-600nm420-480nm420-480nm430-490nm細胞毒性高,，細胞形態(tài)完全消失很低,，細胞形態(tài)不變很低，細胞形態(tài)不變很低,，細胞形態(tài)不變試劑穩(wěn)定性一般較差一般很好批量樣品檢測可以非常適合非常適合非常適合便捷程度一般便捷便捷非常便捷酚紅和血清對CCK法的檢測不會造成干擾；

CCK-8的用途1.細胞增殖測定：細胞增殖實驗在很多領(lǐng)域都會用到,，比如**相關(guān),、損傷后修復(fù)等。

2.***篩選：在測定一個***的毒性和安全有效濃度時,，經(jīng)常會用到CCK-8,。

3.細胞毒性測定：這個可以和各個處理因素對細胞活性和增殖的影響,，比如在UV、低氧或者什么化學(xué)物品對細胞的影響上,。

4.**藥敏試驗：這個是用的比較廣的,，我見過做**的團隊，買CCK-8都是一整箱,，一整箱的買,，比如果子老師所在的團隊，哈哈哈,。

5.微生物對細胞的毒性或增殖的實驗,。 在96孔板中接種細胞懸液（100μL/孔）。將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱中預(yù)培養(yǎng)（37℃,5% CO2）.上海cck8增殖曲線

CCK8雖好,這些情況下不建議用!江蘇碧云天 cck8

酚紅和血清對CCK法的檢測不會造成干擾,；◆細胞毒性非常低,，因此加入WST-8顯色后，可以在不同時間反復(fù)用酶標(biāo)儀讀數(shù)從而找到比較好測定時間,。實驗二：細胞增殖-毒性檢測1,、在96孔板中配置100μL的細胞懸液。將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱預(yù)培養(yǎng)24小時（37℃,，5%CO2）,。2、向培養(yǎng)板加入10μL不同濃度的待測物質(zhì),。3,、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱孵育一段適當(dāng)?shù)臅r間（例如：6、12,、24或48小時）,。4、向每孔加入10μLCCK溶液（注意不要再孔中生成氣泡,，它們會影響OD值的讀數(shù)）,。5、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育1-4小時,。6,、用酶標(biāo)儀測定在450nm處的吸光度。江蘇碧云天 cck8