對細胞活力的影響：一些研究表明，在陽離子脂質(zhì)體LipofectamineTM2000介導下雞TRPV6基因RNA干擾（RNAi）質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入成骨細胞的實驗中,，當轉(zhuǎn)染前細胞融合達到90％以上,，質(zhì)粒DNA與脂質(zhì)體比例為1:2.5時轉(zhuǎn)染效率比較高,，并且在轉(zhuǎn)染后48h轉(zhuǎn)染效果比較好,，對細胞的毒性作用較小3。在人肝瘤兩種細胞模型中,，通過比較LipofectamineRnaimax和Genmute轉(zhuǎn)染劑發(fā)現(xiàn),，用基因***的細胞呈現(xiàn)熒光陰性對照siRNA的更高攝取，并且觀察到與基因轉(zhuǎn)染的細胞相對于脂質(zhì)積rnaimax的細胞具有較高的活力6,。有研究使用兩種常見的RNA干擾（RNAi）轉(zhuǎn)染試劑DharmaFECT1和INTERFERin,，在模擬轉(zhuǎn)染中使用非靶向siRNAs，結(jié)果表明這些試劑會引起HeLa細胞脂質(zhì)組的變化,，但功能影響仍有待研究,，這也暗示在RNAi實驗中使用適當?shù)哪M轉(zhuǎn)染對照非常重要。

與DNA轉(zhuǎn)染類似,，RNA可以通過基于RNA的病毒或非病毒載體導入真核細胞,。寧夏轉(zhuǎn)染試劑

    核細胞、關節(jié)軟骨細胞,、間充質(zhì)干細胞（MSCs）：選擇兩種合成轉(zhuǎn)染試劑（陽離子脂質(zhì)商業(yè)試劑LipofectamineRNAiMAX和聚乙烯亞胺（PEI））以及兩種天然衍生轉(zhuǎn)染試劑（多糖殼聚糖（98%脫乙?；┖屯该髻|(zhì)酸（20%酰胺化）），用于將siRNA遞送到包括髓核細胞,、關節(jié)軟骨細胞和間充質(zhì)干細胞在內(nèi)的原代間充質(zhì)細胞中,。以甘油醛-3-磷酸脫氫酶（***DH）作為內(nèi)源性模型基因，在轉(zhuǎn)染后第3天和第6天評估由20nM或200nMsiRNA引起的沉默程度,。除了沉默效率外,，還評估了細胞毒性、DNA含量變化和細胞分化潛能等非特異性影響,。在四種轉(zhuǎn)染試劑中,，基于商業(yè)脂質(zhì)體的試劑在20nMsiRNA時是**有效的siRNA遞送試劑，其次是殼聚糖,。使用陽離子脂質(zhì)體,、殼聚糖和PEI轉(zhuǎn)染顯示出不同程度的活力和DNA含量下降，這取決于所評估的siRNA劑量和細胞類型，但與***DH敲低無關,。一些對DNA含量的影響并不伴隨著活力的相應變化,。然而，細胞周期抑制或進展的標記基因（如p21和PCNA）的表達變化不能解釋DNA含量的變化,。有趣的是,，發(fā)現(xiàn)了***DH活性的非特異性上調(diào)，這***于軟骨細胞15,。肝*細胞HepG2和：比較兩種人類細胞模型中兩種轉(zhuǎn)染劑,，即基于脂質(zhì)體的Lipofectamine?RNAiMAX和基于聚合物的GenMute?。 福建廣州轉(zhuǎn)染試劑其結(jié)構(gòu)的一個共同特征是分子中存在許多帶正電的基團,，這些基團被質(zhì)子化成帶正電的聚合物,。

選擇**適合的RNA轉(zhuǎn)染試劑是一個復雜的過程，需要綜合考慮多個因素,。以下是一些關鍵的考慮因素和方法來幫助選擇**適合的RNA轉(zhuǎn)染試劑,。一、考慮轉(zhuǎn)染效率轉(zhuǎn)染效率是選擇RNA轉(zhuǎn)染試劑的重要指標之一,。較高的轉(zhuǎn)染效率可以確保更多的細胞成功攝取和表達RNA,。實驗細胞類型：不同的細胞類型對轉(zhuǎn)染試劑的敏感性可能不同。例如,，一些細胞系可能更容易被某些轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染,，而另一些細胞則可能對不同的試劑更敏感。在腎*細胞系786-O和ACHN中,，微小RNA-1180（miR-1180）轉(zhuǎn)染后,，通過實時定量PCR和Westernblot等方法檢測到p21mRNA和蛋白表達的變化，表明該轉(zhuǎn)染在腎*細胞中有一定的效果1,。在乳腺*細胞系T47D和非*性細胞MCF-10A中,，研究比較了Lipofectamine2000和PAMAMG5兩種轉(zhuǎn)染試劑對短RNA的轉(zhuǎn)染效率，結(jié)果顯示Lipofectamine的轉(zhuǎn)染效率明顯高于PAMAMdendrimer2,。檢測方法：可以使用多種方法來檢測轉(zhuǎn)染效率,，如熒光顯微鏡、流式細胞儀分析,、實時定量PCR等,。例如，在脂質(zhì)體方法用于modRNA轉(zhuǎn)染各種類型細胞的初步研究中,，分別用RNAiMax及MessageMax將modGFP轉(zhuǎn)染入MEF細胞,，應用熒光顯微鏡、流式細胞分析儀檢測并比較兩種轉(zhuǎn)染試劑的轉(zhuǎn)染效率和蛋白表達效果5,。

X射線發(fā)光成像技術結(jié)合了X射線成像的高空間分辨率和光學成像的高測量靈敏度,，可用于小動物成像,。小動物的X射線發(fā)光成像：MichaelCLun、WenxiangCong和Md.Arifuzzaman綜述了兩種類型的X射線發(fā)光計算斷層掃描（XLCT）成像方法,，并介紹了他們正在建立的聚焦X射線發(fā)光斷層掃描（FXLT）成像系統(tǒng)7,。該系統(tǒng)將開發(fā)基于機器學習的FXLT重建算法，并合成不同發(fā)射波長的納米級磷光劑,。四,、近紅外高光譜成像技術近紅外高光譜成像技術在動物飼料成分分析中具有應用前景。NIRhyperspectralimagingforanimalfeedingredientapplications：P.Dantes探索了近紅外高光譜成像（NIRHSI）在動物飼料中的應用8,。該技術能夠在像素級別提供樣品的化學成分信息,，相比傳統(tǒng)的近紅外光譜具有優(yōu)勢。研究中使用CorningNIRHSI儀器預測了豆粕中的蛋白質(zhì)和油含量,，并可視化了整個豆粕樣品中預測的蛋白質(zhì)分布,。預處理方法如標準正態(tài)變量和Savitzky-Golay導數(shù)能夠有效提高校準模型性能。此外,，還將NIRHSI儀器與兩種商業(yè)單點近紅外光譜儀進行了比較,。在聚葡萄糖、精胺(PG)偶聯(lián)物和第四代聚酰胺樹狀大分子(PAMAM G4)的幫助下,。

準確控制脂質(zhì)體與核酸的比例是關鍵。通過實驗確定比較好的脂質(zhì)體 - 核酸復合物比例,，一般可以進行梯度實驗,，從較低比例開始逐步增加，觀察轉(zhuǎn)染效率的變化,。例如,，不同類型的細胞對脂質(zhì)體和 RNA 或 DNA 的比例要求不同，像在轉(zhuǎn)染 HEK293 細胞時,，可能 1:3（脂質(zhì)體：核酸）的比例比較合適,，而對于較難轉(zhuǎn)染的原代細胞，可能需要適當增加脂質(zhì)體的用量,。

不同配方的脂質(zhì)體在轉(zhuǎn)染效率上有差異,。根據(jù)細胞類型和實驗目的選擇合適的脂質(zhì)體試劑。例如,，一些脂質(zhì)體含有特殊的功能成分,，如靶向基團可以增強與特定細胞的結(jié)合，或者具有促進內(nèi)吞體逃逸的成分,，從而提高轉(zhuǎn)染效率,。新型的脂質(zhì)體制劑不斷涌現(xiàn)，如含有可電離陽離子脂質(zhì)的脂質(zhì)體,，在生理 pH 條件下呈電中性,，減少與血清蛋白的相互作用，進入酸性的內(nèi)體后帶正電，更有利于與內(nèi)體膜融合,，釋放核酸,，在提高轉(zhuǎn)染效率的同時降低細胞毒性。 RNA 轉(zhuǎn)染試劑在不同細胞類型中的效果存在明顯差異,。武漢轉(zhuǎn)染試劑脂質(zhì)體

共轉(zhuǎn)染是將一種以上類型的核酸引入真核細胞的過程,。寧夏轉(zhuǎn)染試劑

調(diào)節(jié)免疫刺激特性魚精蛋白穩(wěn)定的RNA還可以調(diào)節(jié)免疫刺激特性。魚精蛋白-RNA復合物可以刺激樹突狀細胞（DC）,，使其上調(diào)成熟標志物,，并以劑量依賴的方式產(chǎn)生促炎性細胞因子1213。此外,，兩個DC亞群均以與IL-10有利的比率誘導T細胞增殖和IFNγ分泌1213,。這表明魚精蛋白-RNA復合物可用于離體刺激人mDC和pDC，用于免疫***環(huán)境1213,。四,、靈活的RNA遞送系統(tǒng)平臺魚精蛋白作為RNA遞送穩(wěn)定劑，構(gòu)建了一個靈活且多功能的平臺,?？梢愿鶕?jù)***目標進行調(diào)整，例如可以與靶向抗體融合實現(xiàn)精確遞送,，或者被消化成細胞穿透肽以提高轉(zhuǎn)染效率,，也可以與功能性聚合物非共價混合23。綜上所述,，魚精蛋白作為RNA遞送穩(wěn)定劑,，通過保護RNA免受降解、增強細胞穿透性,、調(diào)節(jié)免疫刺激特性以及構(gòu)建靈活的遞送系統(tǒng)平臺等多種機制,，在RNA遞送中發(fā)揮著重要作用。寧夏轉(zhuǎn)染試劑