無血清細胞凍存液:凍存注意:開蓋之前,,用70%的乙醇或異丙醇擦拭瓶身。以下說明適用于在6孔板內(nèi)的培養(yǎng)物的凍存,。培養(yǎng)物應該在適合傳代的時候進行收集和凍存,。每管所含有的細胞應當來源于6孔板的1個培養(yǎng)孔。如果使用其他的培養(yǎng)器皿,,請相應的調(diào)整體積,。1. 在室溫(15 - 25°C)以300 x g離心5分鐘。2. 輕輕吸走上清液,,注意不要擾動細胞團,。3. 用血清學吸管以1 mL的TBD-698重懸細胞。在打散細胞團時,,盡量減少細胞聚集體分解,。4. 用2 mL的血清學吸管將1 mL的細胞聚集體轉(zhuǎn)移到標記好的凍存管中。5. 用以下方法凍存細胞聚集體:推薦使用緩速降溫方法,,每分鐘降低1度,,隨后可以在 -196°C液氮長期保存。不推薦在 -80°C長期保存,。逐步降溫法:-20°C保存2個小時,,然后 -80°C中保存2個小時,隨后可以在 -196°C液氮中長期保存,。開蓋之前,,用70%的乙醇或異丙醇擦拭瓶身。太原正規(guī)無血清細胞凍存液供應商
無血清快速細胞凍存液,,是一種新型的快速凍存細胞的保護液,,可將細胞置于-80^C直接冷凍保存。NM4100內(nèi)含天然抗凍蛋白(Naturalantifrereprotein),不含動物來源的血清成分,,能夠有效提高細胞凍存活率和復蘇活力,,減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染,,確保凍存細胞安全,,能夠滿足大部分體外培養(yǎng)細胞的凍存需求。注意事項:請選擇對數(shù)生長期細胞進行凍存;凍存液加入細胞后,,請盡快放入-80C冰箱凍存;3.本產(chǎn)品凍存細胞可以在-80°C冰箱保存3年以上;4.若需長期凍存細胞,,請轉(zhuǎn)移至液氮罐中貯存;凍存液中含DMSO成分,為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套,。開封正規(guī)無血清細胞凍存液價格根據(jù)凍存方式不同可以分為慢速凍存(程序降溫法)與快速凍存(非程序降溫法)。
細胞凍存和復蘇操作步驟:細胞凍存和復蘇采取“慢凍快融”的原則,,慢速冷凍可使細胞內(nèi)的水份滲出細胞外,,減少細胞內(nèi)形成冰晶的機會,,快融以保證細胞外結(jié)晶快速融化,避免慢速融化水份滲入細胞內(nèi),,再次形成胞內(nèi)冰晶造成對細胞的損傷,。細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融,,實驗證明這樣可以比較大限度的保存細胞活力,。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)能提高細胞膜對水的通透性,,加上緩慢冷凍可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,,減少細胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷,。復蘇細胞應采用快速融化的方法,,這樣可以保證細胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細胞造成損傷,。
無血清細胞凍存液與含血清細胞凍存液對比:傳統(tǒng)的細胞凍存液是使用培養(yǎng)基,、血清和DMSO按照一定的比例混合,其中DMSO的含量是10%,,血清的含量是10%,,統(tǒng)稱為含血清細胞凍存液。含血清細胞凍存液的一般的凍存方法是梯度降溫凍存法,,如先將冷凍管置于4℃冰箱10分鐘,,然后移至-20℃冰箱30分鐘,再移至-80℃冰箱保存16-18個小時(或隔夜),,較后才移至液氮罐中進行長期的儲存,。可見,,含血清細胞凍存液凍存細胞時遇到的問題:1.凍存細胞時需現(xiàn)配凍存液(如購買市面上通用的含血清細胞凍存液,,此步可省略)。2.需要程序降溫(4℃→-20℃→-80℃→液氮),,步驟繁瑣,,耗時耗力。3.含血清,,細胞污染(病毒,、霉菌和支原體等)的風險更高。4.血清批次,、品質(zhì)間差異導致凍存液的批次間差異,。5.需液氮凍存,且不能原位(如孔板)凍存,。即用型產(chǎn)品,,4℃可穩(wěn)定保存,。
無血清細胞凍存液通用于各種動物細胞株(tumour細胞和常規(guī)細胞),大部分的干細胞,,凍存細胞可在-80℃長期保存,。不含動物源性蛋白,不含血清成分,,可有效減少各類細菌,、病毒和支原體等污染,保證凍存細胞的安全,。該凍存液含DMSO,、葡萄糖等各種細胞營養(yǎng)成分,提高細胞存活率和活力,,亦適合于無血清培養(yǎng)細胞和蛋白表達細胞,。產(chǎn)品優(yōu)勢:1、無需程序性降溫,,可直接將細胞置于-80℃凍存,,凍存液無需稀釋。2,、細胞可于-80℃長期保存,。3、凍存液不含血清等,,較大降低細胞污染的可能性,。保存方法:冰袋運輸,4℃保存,,保質(zhì)期一年,。無血清細胞凍存液:一些保護劑,易于穿透細胞,,避免細胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細胞,。開封正規(guī)無血清細胞凍存液價格
避免細胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細胞,同時另一些保護劑不能穿透細胞。太原正規(guī)無血清細胞凍存液供應商
新常態(tài)下細胞凍存指南:細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍速融,,實驗證明這樣可以較大限度的保存細胞活力,。目前細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)能提高細胞膜對水的通透性,,加上緩慢冷凍可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,,減少細胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷,。復蘇細胞應采用快速融化的方法,,這樣可以保證細胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細胞造成損傷。典型的細胞凍存液是在生長培養(yǎng)基中加入5%到10%的DMSO和5%到40%的血清,,或只是在血清中加入10%的DMSO,。目前在有些實驗室中仍然采用這種自制自配的凍存液,優(yōu)點是成本低,,適合自己的細胞,。太原正規(guī)無血清細胞凍存液供應商