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外泌體在肺病進(jìn)程中的作用:肺病細(xì)胞來源外泌體(LCC-exosome)可以通過刺激一些病癥血管的形成來促進(jìn)一些病癥的生長。據(jù)相關(guān)報(bào)道稱,,LCC-exosome中的miR-210可以通過調(diào)節(jié)基質(zhì)細(xì)胞中酪氨酸受體激酶A3的含量,,促進(jìn)一些病癥血管的生成;而LCC-exosome中的miR-23a則可以通過啟動(dòng)脯氨酰羥化酶及壓制緊密結(jié)合蛋白ZO-1來促進(jìn)肺病的生血管作用,。此外,,有研究發(fā)現(xiàn),,外泌體中的內(nèi)容物可以觸發(fā)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)。晚期肺病患者血清中外泌體波形蛋白表達(dá)增加,,促使人正常支氣管上皮細(xì)胞出現(xiàn)EMT,,從而使肺支氣管正常上皮細(xì)胞出現(xiàn)增殖,遷移能力,。色譜法,。這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一,但是需要特殊的設(shè)備,,應(yīng)用不普遍用于外泌體提取的體液收集注意事項(xiàng):抽血技巧,。貴陽正規(guī)外泌體提取試劑廠家供應(yīng)
外泌體提取:1,、過濾,。超濾膜也可用于分離外泌體。根據(jù)外泌體的大小,,從蛋白質(zhì)和其他大分子中分離外泌體,。較常見的過濾膜具有0.8μm、0.45μm或0.22μm的孔徑,,可用于收集大于800nm,、400nm或200nm的外泌體,也有設(shè)計(jì)成微柱多孔硅纖毛結(jié)構(gòu)以分離40-100nm外泌體:不過,,該方法由于過濾膜的粘附,,可能會(huì)損失外泌體,并且過濾時(shí)的壓力和剪切力,,可能會(huì)使外泌體變形受損,。2、基于聚合物的沉淀技術(shù),?;诰酆衔锏某恋砑夹g(shù)通常包括將樣本與含聚合物的沉淀溶液混合,在4℃溫育并低速離心,。用于聚合物沉淀的較常見聚合物之一是聚乙二醇(PEG),。用這種聚合物沉淀具有許多優(yōu)點(diǎn),包括對分離的外泌體影響小,、pH中性等,。目前大多數(shù)快速分離外泌體的商品化試劑盒都是基于此方法,。然而基于聚合物的沉淀方法可能會(huì)同時(shí)分離非囊泡污染物(包括脂蛋白)而且,,聚合物材料的混雜可能會(huì)影響下游分析太原正規(guī)外泌體提取試劑廠家批發(fā)價(jià)外泌體的提取有超速離心、試劑盒,、超濾法,、蔗糖密度梯度離心等,,然而各種方法均有其利弊。
人體內(nèi)多種細(xì)胞及體液均可分泌外泌體,,包括內(nèi)皮細(xì)胞,、免疫細(xì)胞、血小板,、平滑肌細(xì)胞等,。當(dāng)其由宿主細(xì)胞被分泌到受體細(xì)胞中時(shí),外泌體可通過其攜帶的蛋白質(zhì),、核酸,、脂類等來調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物學(xué)活性。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊主要通過以下三種方式:一是外泌體膜蛋白可以與靶細(xì)胞膜蛋白結(jié)合,,進(jìn)而啟動(dòng)靶細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路,。二是在細(xì)胞外基質(zhì)中,外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切,,剪切的碎片可以作為配體與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合,,從而啟動(dòng)細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)通路。有報(bào)道稱一些外泌體膜上蛋白在其來源細(xì)胞膜上未能檢測出,。三是外泌體膜可以與靶細(xì)胞膜直接融合,,非選擇性的釋放其所含的蛋白質(zhì)、mRNA以及microRNA,。
外泌體相關(guān)技術(shù)在過去幾年一直在快速發(fā)展,,預(yù)計(jì)市場將大幅增長,因?yàn)樗鼈兛杀粦?yīng)用到液體活檢,、精細(xì)醫(yī)學(xué)和再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,。特別是,一些疾病衍生的外泌體通過調(diào)節(jié)血管生成,、轉(zhuǎn)移和免疫來影響細(xì)胞的侵襲性,,使其成為用于一些疾病檢測、診斷和治病選擇的極其有用的生物標(biāo)志物來源,。在風(fēng)險(xiǎn)投資方面,,有很多市場活動(dòng)。2016年1月,,ExosomeDiagnostics公司在B輪融資中獲得6000萬美元資金,,并于2017年7月獲得3000萬美元的C輪融資。同樣,,CodiakBiosciences公司于2016年由MDAnderson一些疾病中心與兩家風(fēng)險(xiǎn)投資公司共同成立,,以8000多萬美元的A和B輪融資成立該公司。2017年11月29日,,CodiakBioSciences公司又增加了7650萬美元的C輪融資,。在整個(gè)A,、B和C輪融資中,CodiakBioSciences公司募集了驚人的1.685億美元,。外泌體提?。捍胖榉ň哂刑禺愋愿摺⒉僮骱啽?、不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點(diǎn),。
外泌體的提取方法:1、色譜法,。色譜法是利用根據(jù)凝膠孔隙的孔徑大小與樣品分子尺寸的相對關(guān)系而對溶質(zhì)進(jìn)行分離的分析的方法,。樣品中大分子不能進(jìn)入凝膠孔,只能沿多孔凝膠粒子之間的空隙通過色譜柱,,首先被流動(dòng)相洗脫出來,;小分子可進(jìn)入凝膠中絕大部分孔洞,在柱中受到更強(qiáng)地滯留,,更慢地被洗脫出,。分離到的外泌體在電鏡下大小均一,但是需要特殊的設(shè)備,,應(yīng)用不普遍,。2、超濾離心,。由于外泌體是一個(gè)大小約幾十納米的囊狀小體,,大于一般蛋白質(zhì),利用不同截留相對分子質(zhì)量(MWCO)的超濾膜對樣品進(jìn)行選擇性分離,,便可獲得外泌體,。超濾離心法簡單高效,且不影響外泌體的生物活性,,是提取細(xì)胞外泌體的一種新方法外泌體提?。壕垡叶迹≒EG)為常用的多聚物,可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀,。昆明正規(guī)外泌體提取試劑報(bào)價(jià)
外泌體提?。嚎梢詫⒉煌南疵撊芤簯?yīng)用于該方法。貴陽正規(guī)外泌體提取試劑廠家供應(yīng)
CD47是信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白α(SIRPα,,也稱為CD172a)的配體,,CD47-SIRPα間的結(jié)合能夠發(fā)出“不要吃我”的信號(hào),從而壓制吞噬作用,。病基因RAS能夠促進(jìn)胰腺病細(xì)胞增殖,,增強(qiáng)胞飲作用從而促進(jìn)一些病癥細(xì)胞攝取外泌體。合成納米顆粒對細(xì)胞有一定毒性作用,,但使用外泌體能夠較小化對細(xì)胞的毒性,。研究人員發(fā)現(xiàn),,CD47和病基因KRAS驅(qū)動(dòng)的胞飲作用都會(huì)壓制外泌體被循環(huán)系統(tǒng)的清理,,并增強(qiáng)胰腺病細(xì)胞對外泌體的特異性,。所以,外泌體的這種特性增強(qiáng)了它們通過遞送RNAi來特異性靶向胰腺病中的KRAS的能力,,并且使用外泌體作為單一靶向劑顯著改善了所有實(shí)驗(yàn)PDAC小鼠模型的總生存期,。貴陽正規(guī)外泌體提取試劑廠家供應(yīng)