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來源: 發(fā)布時(shí)間:2022-04-01

外泌體相關(guān)miRNA與肺病的診斷:miRNAs是一類含有20~25個(gè)核苷酸的非編碼小RNA,,能夠通過下調(diào)或壓制靶mRNAs來調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄水平上的基因表達(dá),目前非編碼RNA被普遍發(fā)現(xiàn)存在于NSCLC患者外泌體中,,參與一些病癥的形成和演化過程。單個(gè)miRNA可能通過壓制性復(fù)合物與多個(gè)mRNA結(jié)合,,從而阻滯整個(gè)生物通路,。因此,外泌體的miRNA具有成為NSCLC標(biāo)志物的優(yōu)勢,。Chen等在152例肺病患者的研究中初次報(bào)道了循環(huán)游離miRNA的表達(dá),,與75例健康者相比,發(fā)現(xiàn)了兩種高表達(dá)的miRNA(miR-25和miR-223),。Rabinonowits等對27例肺病患者和9例健康人的血漿外泌體中12個(gè)miRNA的表達(dá)進(jìn)行了評估,,結(jié)果顯示,12個(gè)一些病癥相關(guān)的miRNA*在肺病患者中過度表達(dá),。Cazzoli等收集了30個(gè)血漿樣本,,發(fā)現(xiàn)4種外泌體miRNA(miR-378a、-379a,、-139-5p,、-200b-5p)在肺病患者血清中明顯升高,用于篩查患者與健康人ROC曲線下面積(AUC)為0.908,。離心除去細(xì)胞器,,留取上清。外泌體提?。撼叽缗抛枭V,。尺寸排阻色譜是基于大小而非分子量實(shí)現(xiàn)分離大分子。長沙外泌體提取試劑廠家批發(fā)價(jià)

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研究探討了外泌體是否可以作為RNAi的有效載體的可能性,。與脂質(zhì)體和其他合成藥物納米顆粒載體不同,,外泌體含有可能增強(qiáng)內(nèi)吞作用的跨膜和膜錨定蛋白,從而促進(jìn)其內(nèi)容物的遞送,。CD47是外泌體蛋白質(zhì)之一,,是一個(gè)普遍表達(dá)的整合素相關(guān)跨膜蛋白,其部分功能可以保護(hù)細(xì)胞免受吞噬作用,。CD47是信號調(diào)節(jié)蛋白α(SIRPα,,也稱為CD172a)的配體,CD47-SIRPα間的結(jié)合能夠發(fā)出“不要吃我”的信號,,從而壓制吞噬作用,。病基因RAS能夠促進(jìn)胰腺病細(xì)胞增殖,增強(qiáng)胞飲作用從而促進(jìn)一些病癥細(xì)胞攝取外泌體,。合成納米顆粒對細(xì)胞有一定毒性作用,,但使用外泌體能夠較小化對細(xì)胞的毒性。研究人員發(fā)現(xiàn),,CD47和病基因KRAS驅(qū)動(dòng)的胞飲作用都會(huì)壓制外泌體被循環(huán)系統(tǒng)的清理,,并增強(qiáng)胰腺病細(xì)胞對外泌體的特異性,。所以,外泌體的這種特性增強(qiáng)了它們通過遞送RNAi來特異性靶向胰腺病中的KRAS的能力,,并且使用外泌體作為單一靶向劑顯著改善了所有實(shí)驗(yàn)PDAC小鼠模型的總生存期,。溫州外泌體提取試劑直銷廠家外泌體的提取、分離方法:聚合物沉淀法,。

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外泌體項(xiàng)目獲批學(xué)科方向:從統(tǒng)計(jì)來看,,與前年相似外泌體立項(xiàng)集中的領(lǐng)域還是一些病癥學(xué),近年來外泌體發(fā)表的文章也絕大部分與其在一些病癥的形成,,耐藥性,,檢測等方面有關(guān)。例如2019年發(fā)表在MolecularCancer(IF=10.679)上的文章表明外泌體FMR1-AS1通過TLR7/NFκB/c-My信號通路在女性食管ai中促進(jìn)維持ai癥干細(xì)胞樣細(xì)胞的動(dòng)態(tài)平衡,。發(fā)表在JournalofExperimental&ClinicalCancerResearch(IF=5.646)上的一篇文章發(fā)現(xiàn)外泌體轉(zhuǎn)運(yùn)p-STAT3可促進(jìn)結(jié)直腸ai細(xì)胞獲得性5-FU耐藥性,。發(fā)表在Cancers(IF=6.162)上的一篇文章則研究了腹腔灌洗液中細(xì)胞外囊泡相關(guān)的miRNA作為子宮內(nèi)膜ai分子標(biāo)志物的可能性。此外,,在神經(jīng)系統(tǒng)和精神疾病,,中醫(yī)學(xué)及其他領(lǐng)域也有不少外泌體相關(guān)項(xiàng)目中標(biāo)。

外泌體的提取方法學(xué)規(guī)范,、統(tǒng)一定量及鑒定等,。關(guān)于外泌體的提取有超速離心,、試劑盒,、超濾法、蔗糖密度梯度離心等,,然而各種方法均有其利弊,。超速離心法是目前外泌體相關(guān)文章中的主流方法,由于離心步驟繁瑣,,費(fèi)事費(fèi)力,,而且步驟多導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)中容易污染,且損耗量大,,使得較終回收的外泌體不穩(wěn)定,。而且對于抽提細(xì)胞上清來說,更是極為不請便,,試想用提取300ml的上清需要6個(gè)50ml離心管,,無論是過濾還是后續(xù)的每一步的離心去沉淀,都具有操作極其不便的缺點(diǎn),,總之非常麻煩,。而超濾法存在外泌體會(huì)堵塞膜孔,造成濃縮效率低,,濃縮管重復(fù)利用差,,甚至堵塞在膜孔的外泌體還可能會(huì)粘連成團(tuán),,造成損失及較后的數(shù)據(jù)有誤差,對于后續(xù)實(shí)驗(yàn)也有影響,。外泌體的提取,、分離方法:超高速離心法。

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外泌體提?。撼叽缗抛枭V,。尺寸排阻色譜(Size-exclusionchromatography,SEC)是基于大小而非分子量實(shí)現(xiàn)分離大分子,。該技術(shù)應(yīng)用填充多孔聚合物微球的柱子,,分子根據(jù)其直徑通過微球,半徑小的分子需要更長的時(shí)間才能通過色譜柱的孔隙遷移,,而大分子則從色譜柱中更早地洗脫,。尺寸排阻色譜可以精確分離大小分子。此外,,可以將不同的洗脫溶液應(yīng)用于該方法,。與離心方法相比,色譜分離已被證明具有更多優(yōu)勢,,因?yàn)橥ㄟ^色譜分離的外泌體不受剪切力的影響,,這可能會(huì)改變囊泡的結(jié)構(gòu)。目前,,SEC是一種普遍接受的分離血液和尿液中外泌體的技術(shù),。不過,該方法耗時(shí)較長,,不適合大量樣本處理外泌體的提取方法,,先用含無外泌體血清的培養(yǎng)基對人脂肪來源間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行饑餓培養(yǎng)。北京外泌體提取試劑直銷價(jià)

外泌體提?。壕垡叶迹≒EG)為常用的多聚物,,可與疏水性蛋白和脂質(zhì)分子結(jié)合共沉淀。長沙外泌體提取試劑廠家批發(fā)價(jià)

外泌體與免疫系統(tǒng):不同的細(xì)胞來源的外泌體,,包括免疫細(xì)胞(B細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞),、病細(xì)胞、上皮細(xì)胞和間充質(zhì)細(xì)胞,,釋放出帶有載體的外泌體,,可影響先天免疫系統(tǒng)和適應(yīng)性免疫系統(tǒng)中受體細(xì)胞的增殖和各自的活性。CD4+和CD8+T細(xì)胞可直接或間接地受到外泌體的影響,,刺激或壓制其增殖和功能,。外泌體與代謝性和心血管疾病:外泌體可以通過攜帶miRNA或代謝物分子在代謝性疾病和心血管疾病的發(fā)生的發(fā)展過程中起作用。體外培養(yǎng)心血管疾病的細(xì)胞收集的外泌體與疾病相關(guān)的代謝適應(yīng)有關(guān),;體外培養(yǎng)的間充質(zhì)干細(xì)胞和胚胎干細(xì)胞的外泌體具有保護(hù)心血管的作用,。這些發(fā)現(xiàn)表明不同來源的外泌體可以通過傳遞miRNA,蛋白等物質(zhì)改變受體細(xì)胞的代謝狀態(tài),。外泌體檢測作為一種新型的液體活檢熱點(diǎn)技術(shù)已被許多臨床科研機(jī)構(gòu)普遍地應(yīng)用于一些病癥和疾病的無創(chuàng)診斷長沙外泌體提取試劑廠家批發(fā)價(jià)