鼠尾膠原,，10mg包裝，配制方法如下：1.配0.1M的乙酸溶液100ml,。即取575ul冰乙酸加超純水至100ml,，容量瓶配制比較準確。2.用吸管吸取10ml剛配好的0.1M乙酸溶液（不要用*加,，吸十次不如加一次z準確）,，加入盛膠原的瓶中，輕輕顛倒,，不要震蕩,，蛋白容易起泡,。幾分鐘即可,，蛋白質非常好溶解,。3.將膠原溶液移入事先壓好的玻璃瓶中，比青霉素瓶大點的就行,。用*在瓶底加1ml氯仿,，打到一檔就行，避免加入氣泡,。然后4度過夜除菌,。4.第二天將上層膠原溶液分裝進EP管中。用封口膜封口,，4度保存,，勿冷凍。吸去生理鹽水,，將尾腱稱重（0.5-1克）,。武漢正規(guī)鼠尾膠原直銷廠家

鼠尾膠原醋酸溶解：1．將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中，制備成濃度為0.1%的溶液,。在室溫中攪拌1-3小時直到完全溶解,。2．建議將溶液轉移到擰口的玻璃瓶中，并小心的在瓶底鋪上一層氯仿,。氯仿的量約為膠原溶液的10%,。不要晃動或攪拌。在2-8度中放置過夜,。在無菌條件下轉移上層的膠原溶液,。我們不建議用過濾的方法無菌化。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會導致丟失蛋白,。3．稀釋一定數(shù)量的膠原溶液,。4．按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶。在室溫或37度結合數(shù)小時或者2-8度過夜,。5．從包被表面除去多余的液體,。過夜干燥。如果膠原溶液不是無菌的,，這時候可以在無菌細胞操作室中暴光在紫外線下過夜消毒,。在接種細胞前用無菌的水漂洗。太原正規(guī)鼠尾膠原產(chǎn)品介紹將無菌5cm左右的紗布海綿貼在150mm培養(yǎng)皿的蓋子上來制備氨蒸氣室,。

鼠尾膠原膠凝程序：膠原蛋白I按以下步驟使其pH達到堿性時凝膠,。1）將無菌5cm左右的紗布海綿貼在150mm培養(yǎng)皿的蓋子上來制備氨蒸氣室。用氫氧化銨使紗布飽和,，把蓋子放在150mm的培養(yǎng)皿上,，暫放置一邊。2）將膠原蛋白I均勻涂布在要包被物的表面上,，厚度可以根據(jù)需要改變,，膠原蛋白I（50-100μL）足以涂覆22mm的蓋玻片,。對于直徑100mm的培養(yǎng)皿，每個加入約6mL;對于60mm培養(yǎng)皿添加約2.3mL,，對于35mm培養(yǎng)皿添加約1mL,。3）將涂有膠原蛋白的蓋玻片或帶有蓋子的培養(yǎng)皿轉移到氨蒸氣室并暴露三分鐘。4）在無菌蒸餾水中（35mm培養(yǎng)皿加5mL,，60mm培養(yǎng)皿加10mL等）浸泡涂布的蓋玻片或培養(yǎng)皿30min,。吸取原蒸餾水并加0.5-1.0mL無菌蒸餾水，放置在層流罩中過夜,。5）吸出蒸餾水,，用含血清的平衡鹽緩沖液溶液代替并保存在2-8°C。

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用說明：不含細胞的三維膠原的制備（以配制1毫升,，1mg/ml三維膠為例）：將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,，加入690ulH2O。然后加到12ul0.1mol/LNaOH中（如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,，會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結）,，立即混勻。再加入100ul10×PBS或10×培養(yǎng)液,，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH為7左右,，如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅，初次使用時需要用pH試紙測試),。將培養(yǎng)器皿在室溫(25度左右)下放置20分鐘待膠凝固后,，轉移到培養(yǎng)箱內(nèi)。如果配制中使用的是10×PBS,，使用前需要加入適當體積的細胞培養(yǎng)液預平衡,。制備鼠尾膠原：將尾腱置于平皿內(nèi)剪碎，轉移至三角燒瓶中,。

鼠尾膠原備用膠凝程序：1）在冰上放置以下物品：膠原蛋白I,、無菌10×PBS、無菌蒸餾水,、無菌1MNaOH,。2）確定膠原蛋白I待使用溶液所需的較終濃度的體積。3）在冰上放置無菌管以收存膠原蛋白I,。4）在無菌條件下執(zhí)行以下步驟,。4.1加入10×PBS（終體積/10）mL4.2計算要使用的膠原蛋白I的體積（不要添加到管中直到步驟4.6為止）終體積x終膠原蛋白I濃度（mg/mL）。4.3向10×PBS溶液中加入（要加入的膠原體積×0.023）mL的無菌冰冷1MNaOH,。4.4向4.3溶液中加入下述體積的無菌冰冷蒸餾水：添加蒸餾水體積=V（終）—V（膠原蛋白）—V(10×PBS）—V（1MNaOH）4.5混合管中的物質并放入冰中,。4.6加入膠原蛋白I并計算體積，混勻，冰上備用,。5）膠原蛋白I溶液可立即使用或在冰上放置2-3小時,。6）使用時，無菌條件下將溶液加入到細胞培養(yǎng)裝置中37°C凝膠30min,。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,，并且制作簡便,，成本低廉。鼠尾膠原醋酸溶解：氯仿的量約為膠原溶液的10%,。北京鼠尾膠原報價

可用于制備三維膠原凝膠,，使細胞在模擬的三維環(huán)境中生長。武漢正規(guī)鼠尾膠原直銷廠家

鼠尾膠原蛋白的提取方法：1.一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法,，其特征在于,，包括以下步驟:(1)將無組織纖維、脂肪和多糖殘留的鼠尾腱,，真空冷凍干燥備用,；(2)凍干鼠尾腱經(jīng)低溫凍干粉碎至200?400目；(3)在冰水浴中將粉碎的鼠尾腱在醋酸溶液中溶脹,，鼠尾腱與醋酸的固液比為I克:10mL?I克:120mL,，期間不斷攪拌，防止凍結成塊,，得到膠原溶脹液,；(4)稱取胃蛋白酶加入到膠原溶脹液中，鼠尾腱與蛋白酶質量比為50:I?100:1,，在4°C,，48?74小時酶解，期間間歇性攪拌,。武漢正規(guī)鼠尾膠原直銷廠家