無血清細胞凍存：在細胞培養(yǎng)中,，細胞凍存是較關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一，尤其在細胞治好,、細胞存儲中對細胞凍存更有特殊要求,，下面就根據(jù)降溫速度以及凍存液組分對細胞凍存做詳細介紹,。根據(jù)降溫速度區(qū)分，細胞凍存可以分為程序降溫凍存與非程序降溫凍存,。根據(jù)凍存方式不同可以分為慢速凍存（程序降溫法）與快速凍存（非程序降溫法）,。程序降溫凍存技術(shù)要點是慢凍，標準的凍存程序為降溫速率-1～-2/℃min,；當溫度達-25℃以下時,，可增至-5℃～-10℃/min。之前,，常用的傳統(tǒng)方法是將凍存管置于4℃30分鐘--20℃60分鐘--80℃過夜-液氮罐,。不過，由于步驟較多,，間隔時間又長,，很容易遺忘。之后,，人們也開始使用程序降溫盒,。將凍存管放入程序降溫盒中，再將程序降溫盒放入-80℃冰箱,。以1℃/min的速度進行降溫,。無血清細胞凍存液的優(yōu)勢：無需程序降溫，可直接放置-80℃凍存,，操作簡單,。廈門正規(guī)無血清細胞凍存液

細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,，可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來,，這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞,，可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種,，起到了細胞保種的作用。為什么要進行細胞凍存,？連續(xù)培養(yǎng)的細胞系容易發(fā)生遺傳漂變，有限細胞系較終會發(fā)生衰老,，所有培養(yǎng)的細胞都易受到微生物污染,，即使運轉(zhuǎn)情況較好的實驗室也會遇到設(shè)備故障的問題。由于已建立的細胞系是一種寶貴資源,，更換細胞系成本高昂,，而且耗費時間，因此,，十分有必要將細胞冷凍起來長期保存,。除此之外,，還可以利用細胞凍存的形式來購買、寄贈,、交換和運送某些細胞,。南京南昌無血清細胞凍存液無血清細胞凍存液產(chǎn)品性能：2-8℃即可穩(wěn)定保存，無需冷凍,，即取即用,。

如何提高細胞凍存成功率：1.沒有控制好細胞的生長密度細胞的密度對細胞的生存質(zhì)量有著重要的影響，畢竟它們是一群又不能擠著了也不能孤獨的嬌貴寶寶,。密度過高會讓細胞沒有足夠的生存空間,，密度過低會讓細胞無法互相連接健康生長。建議大家在細胞接種前,，一定要調(diào)整好適合細胞生長的濃度,，提高細胞的存活率。2.溫度控制不達標慢凍快融是細胞凍存復蘇的中心關(guān)鍵詞之一,。常規(guī)的凍存操作中,，都會要求嚴格的梯度降溫，常見的是-4℃→-20℃至-40℃→-80℃→液氮,，一定要避免溫度原因?qū)е录毎匀∠麥?；除非使用了成分?jīng)過優(yōu)化、經(jīng)過嚴格測試的凍存液,，才能免去程序降溫這個繁瑣的步驟,。保存的時候也要保證整個細胞都是處于液氮的液面下方，避免溫度對細胞存活的影響,。

細胞凍存,，我們應(yīng)該注意哪些事項：凍存細胞的效果好壞要看細胞復蘇時的存活率。細胞凍存時,，細胞內(nèi)部會產(chǎn)生晶體,，水凝固形成的高濃度溶質(zhì)會對細胞產(chǎn)生損傷，所以在凍存過程中要盡可能降低晶體的產(chǎn)生,。為了提高復蘇存活率,，可通過以下方法完成：a）降溫的速度不能太快，讓細胞內(nèi)的水分緩慢離開細胞,；b）在低溫環(huán)境下凍存細胞可以降低高濃度鹽對細胞中蛋白質(zhì)的影響,；c）凍存試劑要采用親水的低溫保護劑；d）復蘇時的速度要快,，這樣可以減少細胞內(nèi)部冰晶溶解時產(chǎn)生的某些可溶性成分,。無血清凍存液使用方法：收集懸浮細胞或貼壁細胞，離心去除上清培養(yǎng)液,。

無血清細胞凍存液,，含多種保護劑成分,。一些保護劑，易于穿透細胞,，避免細胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細胞,，同時另一些保護劑不能穿透細胞，但可以在冰晶形成之前,，優(yōu)先結(jié)合細胞外的水分子,，降低細胞外溶液的電解質(zhì)濃度，減少陽離子進入細胞的數(shù)量,，為多種保護劑組合,，在細胞內(nèi)外進行雙重保護，較大提高了細胞復蘇存活率,。無血清細胞凍存液不含牛血清,，無動物源組份。2-8℃即可穩(wěn)定保存,，無需冷凍,，即取即用。凍存細胞,，無需程序降溫,。凍存細胞復蘇率在90%以上。含多種保護劑成分,一些保護劑,易于穿透細胞,。徐州貴陽無血清細胞凍存液

清洗細胞,，充分洗凈殘留凍存液。廈門正規(guī)無血清細胞凍存液

凍存細胞復蘇方法：1.從冰箱里取出細胞冷凍保存管,，立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍,。2.待凍存管中細胞混合液完全融化后，立即加入1ml細胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細胞混合,，再將細胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細胞培養(yǎng)基的試管中,，混合均勻。3.離心收集培養(yǎng)細胞（參考離心條件：1,000~2,000rpm,，4℃,，3~5min），移去上清液,。4.清洗細胞,，充分洗凈殘留凍存液。5.加入適量的新鮮細胞培養(yǎng)基,，使用移液管緩緩地均勻細胞混合液,。適量地稀釋后,，將細胞混合液移至事先準備好的培養(yǎng)瓶中,。6.鏡檢后,，研究者可根據(jù)各自方法和需要來進行細胞培養(yǎng)。廈門正規(guī)無血清細胞凍存液