一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法：膠原蛋白是脊椎動物和無脊椎動物支持結(jié)構(gòu)的主要組成。在人的身體中這是皮膚,、筋、軟骨,、骨骼及結(jié)締組織的較主要的蛋白質(zhì)。膠原蛋白占人體蛋白質(zhì)總量的三分之一,，不論來源于哪一種動物或哪一種組織的膠原都有許多共同特性,。氨基酸組成中約有三分之一為甘氨酸，有脯氨酸和羥脯氨酸,。根據(jù)其遺傳分子結(jié)構(gòu)遺傳基因的差別,，膠原蛋白分為20幾個亞型。但較為常見的為Ι,、Π,、ΙΙΙ型膠原蛋白,，即間質(zhì)膠原蛋白,。其中I型較為豐富且品質(zhì)優(yōu)良。I型膠原蛋白分布非常普遍,，是主纖維束的主要成分,，給結(jié)締組織以強(qiáng)度；是較豐富的膠原蛋白類型,，尤其是在皮膚真皮,、骨、筋和腱中,。鼠尾膠原對前庭毛細(xì)胞具有良好的貼壁黏附促進(jìn)作用,。寧波貴陽鼠尾膠原

含細(xì)胞三維膠原凝膠的制備（以配制1mg/mL三維膠1mL為例）準(zhǔn)備好懸浮于培養(yǎng)液的細(xì)胞，并放置于冰浴中,。將200μL本品加到12μL0.1mol/LNaOH中（如果反過來把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,，會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)），立即混勻,。再加入23μL10×PBS或10×培養(yǎng)液,，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中（混勻后pH為7左右，如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,，初次使用時需要測定pH值）,。加入760μL的細(xì)胞懸浮液,，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中。將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后,，加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液,，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。本品在室溫下pH中性時可迅速成膠,，在操作過程中要盡量保持低溫,。保存條件4℃保存，切勿凍存,，有效期一年,。成都正規(guī)鼠尾膠原平均價格使用溶解有一定比例胃蛋白酶的酸溶液對初步處理的鼠尾腱進(jìn)行酶解。

膠原蛋白的適用征狀：1,、由于工作勞累,，睡眠不足形成的皮膚晦暗無光、發(fā)黃,、皮膚彈性差等皮膚衰老的不良癥狀,。2、由于年齡,、太陽輻射因素引起的皮膚松弛,、下垂、皺紋,、干燥等皮膚衰老現(xiàn)象,。3、由于體內(nèi)異常黑色素分泌旺盛,，大量沉積皮膚表面,，肌膚不能及時代謝出異常黑色素，形成各種色斑,。4,、由于長期戶外活動及皮膚保養(yǎng)不當(dāng)使膚質(zhì)受到損傷，過早出現(xiàn)細(xì)紋,皮膚干燥,、脫皮,、、毛孔粗大等不良癥狀,。5,、由于內(nèi)分泌功能紊亂，皮膚膚質(zhì)差,、皮膚發(fā)油,、發(fā)暗，易長青春痘留下的色印、色素沉著等,。6,、由于生活無規(guī)律,吸煙等因素,造成的黑眼圈,眼袋等問題。7.長期電腦旁工作,，電腦輻射造成脫發(fā),，內(nèi)分泌紊亂問題。

鼠尾膠原備用膠凝程序：1）在冰上放置以下物品：膠原蛋白I,、無菌10×PBS,、無菌蒸餾水、無菌1MNaOH,。2）確定膠原蛋白I待使用溶液所需的較終濃度的體積,。3）在冰上放置無菌管以收存膠原蛋白I。4）在無菌條件下執(zhí)行以下步驟,。4.1加入10×PBS（終體積/10）mL4.2計算要使用的膠原蛋白I的體積（不要添加到管中直到步驟4.6為止）終體積x終膠原蛋白I濃度（mg/mL）,。4.3向10×PBS溶液中加入（要加入的膠原體積×0.023）mL的無菌冰冷1MNaOH。4.4向4.3溶液中加入下述體積的無菌冰冷蒸餾水：添加蒸餾水體積=V（終）—V（膠原蛋白）—V(10×PBS）—V（1MNaOH）4.5混合管中的物質(zhì)并放入冰中,。4.6加入膠原蛋白I并計算體積,，混勻，冰上備用,。5）膠原蛋白I溶液可立即使用或在冰上放置2-3小時,。6）使用時，無菌條件下將溶液加入到細(xì)胞培養(yǎng)裝置中37°C凝膠30min,。整個操作請?jiān)跓o菌環(huán)境下無菌操作,，避免污染以影響細(xì)胞生長。

鼠尾膠原在心肌細(xì)胞氧化損傷中的保護(hù)作用：膠原蛋白具有抗氧化作用,，但既往在實(shí)驗(yàn)室主要將鼠尾膠原用于促進(jìn)細(xì)胞貼壁和支架構(gòu)建,，對于其抗氧化作用目前尚無相關(guān)研究。目的：探討鼠尾膠原對過氧化氫導(dǎo)致離體心肌細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用,。方法：將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細(xì)胞隨機(jī)接種到鋪有鼠尾膠原的培養(yǎng)皿（實(shí)驗(yàn)組）和普通培養(yǎng)皿（對照組）中，并且均用0,，10,，100μmol/LH2O2誘導(dǎo)。24h后,，以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細(xì)胞的形態(tài),，應(yīng)用MTT比色法檢測心肌細(xì)胞存活率，TUNEL法檢測心肌細(xì)胞凋亡形態(tài),，流式細(xì)胞技術(shù)檢測心肌細(xì)胞凋亡率,，黃嘌呤氧化酶法檢測超氧化物歧化酶活力，硫代巴比妥比色法檢測丙二醛水平，Western-Blot檢測凋亡蛋白Bax,、Bcl-2的表達(dá),。鼠尾膠原蛋白I型在濃度1mg/ml以上，pH 7左右時可形成具有一定強(qiáng)度三維膠,。成都正規(guī)鼠尾膠原平均價格

鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)長時程的記錄。寧波貴陽鼠尾膠原

膠原蛋白的應(yīng)用：1.膠原天然的緊密的纖維結(jié)構(gòu),，使膠原材料顯示出很強(qiáng)的韌性和強(qiáng)度,，適用于薄膜材料的制備；2.大較膠原被用作制造腸衣等可食用包裝材料．其獨(dú)特之處是：在熱處理過程中．隨著水分和油脂的蒸發(fā)和熔化．膠原幾乎與肉食的收縮率一致,。而其他的可食用包裝材料還沒被發(fā)現(xiàn)具有這品質(zhì),；3.由于膠原分子鏈上含有大量的親水基團(tuán)．所以與水結(jié)合的能力很強(qiáng)．這一性質(zhì)使膠原在食品中可以用作填充劑和凝膠；4.膠原在酸性和堿性介質(zhì)中膨脹,，這一性質(zhì)也應(yīng)用于制備膠原基材料的處理工藝中,。寧波貴陽鼠尾膠原