以鼠尾膠原為支架的類似物的建立:探尋建立類似物的培養(yǎng)方法。方法:原代培養(yǎng)人皮膚成纖維細(xì)胞,,制備鼠尾膠原,,將鼠尾膠原溶液,、濃縮培養(yǎng)基,、NaOH溶液和以血清重懸的成纖維細(xì)胞溶液在適當(dāng)?shù)谋壤禄旌虾笮纬赡z構(gòu)建類似物,。結(jié)果:形成的類似物中成纖維細(xì)胞生長狀態(tài)良好,,并且組織塊具有一定彈性和抗拉伸能力,。結(jié)論:①利用鼠尾膠原可以構(gòu)建類似物,該模型是進行皮膚部位型培養(yǎng)和制作復(fù)合皮的關(guān)鍵與基礎(chǔ),;②成纖維細(xì)胞膠原凝膠復(fù)合物有著良好的生物學(xué)特性,,它是研究成纖維細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)之間以及細(xì)胞之間相互作用的良好模型。膠原蛋白是一種蛋白質(zhì),,能幫助連接皮膚,,骨頭和肌腱等身體組織。徐州珠海鼠尾膠原
對于生物科研汪們來說,,大白鼠,、小白鼠們簡直渾身是寶,從毛發(fā),、皮膚,,到心肝脾肺,甚至各種排泄物,,都是我們重要的研究對象,。尾巴,自然也是,。所以耗子尾汁不僅存在,,甚至是我們生物實驗中必不可少的實驗材料和實驗對象。有不少人靠「耗子尾汁」發(fā)了CNS和頂刊,。沒有「耗子尾汁」,,很多課題可能都沒辦法開展。在以小鼠為模式生物進行科學(xué)研究的實驗室中,,日常和基本的一個實驗就是提取它們的遺傳物質(zhì)—DNA(脫氧核糖核酸)進行基因型鑒定,,檢測這些小動物的基因組中是否含有特定的DNA??梢岳斫鉃榻o小動物做核酸檢測,。金華鼠尾膠原廠家供應(yīng)涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,并且制作簡便,,成本低廉,。
一種海貍鼠尾膠原手術(shù)縫合線制備方法,其特征在于,,步驟如下:(1)膠原紡絲液的配制:將備用的海貍鼠尾筋切成薄片,,用無花果蛋白酶進行酶解處理,,再用雙氧水溶液殺酶;將殺酶后的切片用蒸餾水沖洗,,然后用乙酸溶液溶脹,,把溶脹后的切片分散攪拌,然后用濾網(wǎng)過濾,,除去雜質(zhì)及不溶脹物,,然后把該溶液離心脫泡制得膠原紡絲溶液;(2)手術(shù)縫合線纖維的成形:將膠原紡絲液裝入立式向上濕法紡絲機的紡絲液貯罐中,,用氮氣擠壓入含有pH=8-11,、質(zhì)量濃度為50-80%的硫酸鈉溶液的立式凝固浴中凝固成型,再經(jīng)過質(zhì)量濃度為60-90%的乙醇水溶液的脫水浴脫水,,再經(jīng)過假捻器加捻,,合股后再進入含有pH=9-11、質(zhì)量濃度為0.8-1.2%戊二醛的交聯(lián)浴中交聯(lián),,經(jīng)過水浴水洗,,再經(jīng)第二次加捻,除去水及交聯(lián)劑,,干燥后,,在卷繞輥上卷繞即得手術(shù)縫合線。
實驗應(yīng)用:鼠尾膠原在原代培養(yǎng)耳蝸血管紋邊緣細(xì)胞中的應(yīng)用,。目的:建立利用自制的鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法,。方法:制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的效果。結(jié)果:自制的鼠尾膠原能正常地培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞,,細(xì)胞角蛋白18表達(dá)陽性,,免疫組織化學(xué)結(jié)果和掃描電鏡證實所培養(yǎng)的細(xì)胞具有典型的分泌上皮細(xì)胞特征。結(jié)論:成功建立了利用自制鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法,,并且制作簡便,成本低廉,。制備鼠尾膠原:重復(fù)步驟2、3,,直至尾腱量夠用,。
實驗應(yīng)用:鼠尾膠原為底物的人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞培養(yǎng)模式的建立目的建立以鼠尾膠原為貼附底物的人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)模式,為人鼻腔黏液纖毛運輸系統(tǒng)的研究提供科學(xué)有效的方法.方法制備鼠尾膠原并鋪片,,以鼠尾膠原為貼附底物組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞,,培養(yǎng)7天時進行HE染色及掃描電鏡和透射電鏡觀察細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu),應(yīng)用高速攝像技術(shù)測量纖毛擺動頻率.結(jié)果鼠尾膠原要平坦均勻,,平均厚度約為1mm,;HE染色可見上皮細(xì)胞呈單層向周圍爬開;掃描電鏡下見纖毛上皮細(xì)胞呈不規(guī)則多角形,,纖毛周圍可見微絨毛;透射電鏡下可見纖毛上皮細(xì)胞間為緊密連接,;同一細(xì)胞任意兩點纖毛擺動頻率是相同的,;同一來源體外培養(yǎng)的鉤突和下鼻甲的纖毛擺動頻率是相同的.結(jié)論以鼠尾膠原為貼附底物人鼻腔纖毛上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)模式的成功建立,為今后研究鼻內(nèi)用藥對纖毛清理功能的影響提供了良好的方法和途徑,。前庭毛細(xì)胞貼附于培養(yǎng)皿底壁,,易于封接和長時間(約8h)的觀察和記錄。上海鼠尾膠原哪里買
期間不斷攪拌,,防止凍結(jié)成塊,,得到膠原溶脹液。徐州珠海鼠尾膠原
鼠尾膠原蛋白I型,,用那一種膠原酶可以溶解:1.將膠原加入到0.1M的醋酸中,制備成濃度為0.1%的溶液,。在室溫中攪拌1-3小時直到完全溶解,。2.建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿,。氯仿的量約為膠原溶液的10%,。不要晃動或攪拌。在2-8度中放置過夜,。在無菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液,。我們不建議用過濾的方法無菌化。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會導(dǎo)致丟失蛋白,。3.稀釋一定數(shù)量的膠原溶液,。4.按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶。在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時或者2-8度過夜,。5.從包被表面除去多余的液體,。過夜干燥。如果膠原溶液不是無菌的,,這時候可以在無菌細(xì)胞操作室中暴光在紫外線下過夜消毒,。在接種細(xì)胞前用無菌的水漂洗。論鼠尾膠原能促進毛細(xì)胞貼壁,,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,,并且制作簡便,成本低廉,。徐州珠海鼠尾膠原