鼠尾膠原包被培養(yǎng)板：胎干細(xì)胞在體外可誘導(dǎo)分化為血管內(nèi)皮細(xì)胞,進(jìn)而形成血管,因而成為血管組織工程理想的種子細(xì)胞來(lái)源之一。目的:探討建立定向誘導(dǎo)人胚胎干細(xì)胞向血管內(nèi)皮細(xì)胞分化的方法,。方法:在小鼠胚胎成纖維細(xì)胞飼養(yǎng)層上培養(yǎng)人胚胎干細(xì)胞H1,將H1細(xì)胞團(tuán)塊轉(zhuǎn)移到鼠尾膠原包被的培養(yǎng)板,貼壁24-48h后,培養(yǎng)基換為含不同輔助因子和內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑的EGM-2內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基,。結(jié)果與結(jié)論:①在EGM-2內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基誘導(dǎo)下,細(xì)胞逐步表達(dá)內(nèi)皮細(xì)胞特異性標(biāo)記基因VEGFR-2、PECAM1,、vWF,、CD34、VE-cadherin,、GATA-2,。②分化細(xì)胞表達(dá)內(nèi)皮細(xì)胞特異性標(biāo)記VE-cadherin、CD31,。③分化細(xì)胞具有吞噬低密度脂蛋白功能,。說(shuō)明將人胚胎干細(xì)胞接種在鼠尾膠原包被培養(yǎng)板上,通過(guò)EGM-2內(nèi)皮培養(yǎng)體系誘導(dǎo),可直接分化為功能性血管內(nèi)皮細(xì)胞。為研究胞外基質(zhì)對(duì)誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞血管內(nèi)皮細(xì)胞分化的作用以及相關(guān)信號(hào)分子機(jī)制打下了基礎(chǔ),。鼠尾膠原是一種天然培養(yǎng)基,，它具有促進(jìn)體外培養(yǎng)細(xì)胞（特別是上皮細(xì)胞）貼壁的作用。太原鼠尾膠原

鼠尾膠原：1實(shí)驗(yàn)制備：實(shí)驗(yàn)設(shè)備及材料：大鼠尾巴,、剪刀,、鑷子、止血鉗,、彎頭吸管,、平皿,、三角燒瓶、燒杯,、量筒,、天平、生理鹽水,、75%酒精,、0.1%醋酸溶液、蓋玻片,、培養(yǎng)瓶,、鉆石筆、鼠尾膠原,。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：1,、制備鼠尾膠原（兩個(gè)同學(xué)一組操作）。2,、切割小玻片,。3、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),。實(shí)驗(yàn)步驟：制備鼠尾膠原：1,、取大鼠尾巴洗凈，75%酒精浸泡5分鐘,；2,、手持尾巴，用止血鉗夾住鼠尾的較高,，折斷尾骨后拉出尾腱,；3、將尾腱剪斷置于平皿中,，生理鹽水浸泡,；4、重復(fù)步驟2,、3,，直至尾腱量夠用；5,、吸去生理鹽水，將尾腱稱(chēng)重（0.5-1克）,。杭州南昌鼠尾膠原凍干鼠尾腱經(jīng)低溫凍干粉碎至目,。

鼠尾膠原、多聚賴氨酸和明膠3種基質(zhì)對(duì)角膜上皮細(xì)胞增殖的影響：目的探討鼠尾膠原,、多聚賴氨酸和明膠3種基質(zhì)對(duì)體外培養(yǎng)角膜上皮細(xì)胞增殖的影響,。方法采用鼠尾膠原,、多聚賴氨酸和明膠作為基質(zhì)包被培養(yǎng)器皿,以普通培養(yǎng)器皿作對(duì)照,培養(yǎng)角膜上皮細(xì)胞,觀察細(xì)胞形態(tài),進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)并描繪細(xì)胞生長(zhǎng)曲線,比較不同基質(zhì)對(duì)角膜上皮細(xì)胞的增殖作用。結(jié)果使用基質(zhì)包被的培養(yǎng)器皿培養(yǎng)角膜上皮細(xì)胞,細(xì)胞增殖速度較普通組快,細(xì)胞形態(tài),、活力和長(zhǎng)勢(shì)比普通組更佳,促進(jìn)增殖的能力為鼠尾膠原多聚賴氨酸明膠,。結(jié)論鼠尾膠原可促進(jìn)角膜上皮細(xì)胞增殖,且增殖效果優(yōu)于多聚賴氨酸和明膠。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄,，并且制作簡(jiǎn)便，成本低廉,。

實(shí)驗(yàn)應(yīng)用：鼠尾膠原在原代培養(yǎng)耳蝸血管紋邊緣細(xì)胞中的應(yīng)用,。目的：建立利用自制的鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法。方法:制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的效果,。結(jié)果：自制的鼠尾膠原能正常地培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞,，細(xì)胞角蛋白18表達(dá)陽(yáng)性，免疫組織化學(xué)結(jié)果和掃描電鏡證實(shí)所培養(yǎng)的細(xì)胞具有典型的分泌上皮細(xì)胞特征,。結(jié)論：成功建立了利用自制鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法,，并且制作簡(jiǎn)便,成本低廉。利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),。

一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血的優(yōu)點(diǎn)：1,、本發(fā)明制作的止血材料采用溫和的冷凍干燥操作工藝不光光提高了生產(chǎn)效率，同時(shí)避開(kāi)了使用其他設(shè)備帶來(lái)的成本上升問(wèn)題,。2,、本發(fā)明專(zhuān)利生產(chǎn)的止血材料(止血海綿)，其動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明其具有非常好的止血效果,。也可應(yīng)用于內(nèi)臟出血,。具有廣闊的應(yīng)用前景。3,、本發(fā)明制備的止血材料具有可完全被人體吸收,，與出血?jiǎng)?chuàng)面一接觸，其接觸面迅速形成凝膠而粘附在出血?jiǎng)?chuàng)面上,，外面則形成連續(xù)的壓迫干層,。啟動(dòng)凝血因子。同時(shí),，聚乙烯醇為成膜材料,，兩種的協(xié)同效應(yīng)形成了一種理想的止血狀態(tài)和結(jié)構(gòu)。制備鼠尾膠原：重復(fù)步驟2,、3,，直至尾腱量夠用。正規(guī)鼠尾膠原供應(yīng)商

制備鼠尾膠原：將尾腱置于平皿內(nèi)剪碎，轉(zhuǎn)移至三角燒瓶中,。太原鼠尾膠原

利用鼠尾Ⅰ型膠原構(gòu)建與人類(lèi)自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)相近的仿生骨材料,。方法通過(guò)醋酸酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白，并重構(gòu)成膠原纖維,。然后,，將重構(gòu)后的膠原纖維放置在礦化液中模仿骨生物礦化2～6d，通過(guò)透射電子顯微鏡和電子衍射觀察骨生物礦化,。結(jié)果酸解提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白能夠重構(gòu)成膠原纖維,，并且具有特征性的D-Band結(jié)構(gòu)。透射電子顯微鏡和電子衍射顯示：礦化2d后,，羥基磷灰石鈣前體滲入膠原纖維,，膠原纖維部分礦化；礦化6d后,，膠原纖維內(nèi)部完全礦化,，形成Ⅰ型膠原蛋白/羥基磷灰石鈣的仿生骨材料。結(jié)論利用酸解法提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白可以重構(gòu)成膠原纖維,，經(jīng)礦化可形成與人類(lèi)自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)一致的仿生骨材料,。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實(shí)驗(yàn)的長(zhǎng)時(shí)程記錄,，并且制作簡(jiǎn)便,，成本低廉。太原鼠尾膠原