一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法:1.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸溶液溶解沉淀物,,成透明澄清黏稠溶液,;在冰水浴中,,調(diào)節(jié)pH=6.5,,用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中,,不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出,,4°C沉淀10小時,,去除上清液,,去除上清液,,絮狀溶液高速冷凍離心處理,,收集沉淀;2.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸再次溶液溶解沉淀物,,成透明澄清黏稠溶液,,冰水浴中,調(diào)節(jié)PH=6.5;溶液依次通過陽離子交換樹脂,、陰離子交換樹脂進(jìn)行脫鹽處理,;(8)將脫鹽后的膠原蛋白溶液,-40至-20°C預(yù)凍2?4小時,,然后真空冷凍干燥,,凍干產(chǎn)品經(jīng)進(jìn)一步處理得到含水率在3%以下的膠原蛋白微粉,滅菌,、包裝,,得到成品膠原蛋白粉末。建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中,,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿,。貴陽正規(guī)鼠尾膠原直銷價
鼠尾膠原蛋白的提取方法,采用酸法與酶法相結(jié)合的工藝,,保持恒低溫?zé)o菌的環(huán)境,,利用同樣濃度的鹽溶液進(jìn)行兩次鹽析與離心,簡化了提純步驟,。所用酸為低濃度酸溶液,,并采用檸檬酸替代醋酸進(jìn)行提純。從提取原料到樣品生成過程中,,進(jìn)行多次真空冷凍干燥,,并經(jīng)進(jìn)一步處理獲得含水率在3%以下的膠原蛋白微粉;較后由滅菌,、無菌包裝,成品膠原蛋白粉末的純度在98%以上,。本發(fā)明獲得的膠原蛋白降低了蛋白的免疫原性,,提高了產(chǎn)率和生物相容性,,降低了成本,適用于生物醫(yī)用材料,,所得到的膠原蛋白能完整地保留其特有的三股螺旋結(jié)構(gòu),。深圳鼠尾膠原銷售廠家氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動或攪拌,。
鼠尾膠原簡介:鼠尾I型膠原蛋白(Collagenfromrattail,TypeI)系采用Birkedal-Hansen方法在無菌下制備,,純度達(dá)到95%以上,可溶于0.006mol/L乙酸,。本品可用于細(xì)胞培養(yǎng)皿的包被,,特別適合普通細(xì)胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細(xì)胞的培養(yǎng);也可用于制備三維膠原凝膠,,使細(xì)胞在模擬的三維環(huán)境中生長,。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn):1、SDS-PAGE分析純度大于95%,。2,、無菌檢驗結(jié)果為陰性。3,、本品2μg/cm2包被細(xì)胞培養(yǎng)皿后培養(yǎng)PC-12細(xì)胞,,貼壁及生長正常。4,、本品濃度1mg/mL,,pH7.0時形成具有一定強度的三維膠原凝膠,NIH-3T3細(xì)胞在三維凝膠內(nèi)生長正常,、PC-12細(xì)胞在三維凝膠表面生長正常,。
酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原及相對分子質(zhì)量和濃度檢測鼠尾肌腱在醋酸溶液的酸解作用下,其腱性組織被水解成膠凍狀溶液,,從而分解成鼠尾Ⅰ型膠原蛋白分子,。抽取鼠尾Ⅰ型膠原150μL滴在薄膜上,可形成液滴狀膠原蛋白凝膠(,,其生物力學(xué)強度極差,,一碰即散。將鼠尾膠原蛋白進(jìn)行SDS-PAGE,,結(jié)果顯示:Ⅰ型膠原蛋白原液在相對分子質(zhì)量130000附近有明顯條帶,,另一條帶的相對分子質(zhì)量大于170000(圖2)。膠原蛋白濃度為1.8mg/mL,。吸取礦化液倒入小培養(yǎng)皿中,,將鼠尾Ⅰ型膠原纖維浸泡在礦化液中。礦化2、6d后,,分別將礦化后的Ⅰ型膠原纖維進(jìn)行TEM和電子衍射觀察,。吸去生理鹽水,將尾腱稱重(0.5-1克),。
鼠尾膠原:1實驗制備:實驗設(shè)備及材料:大鼠尾巴,、剪刀、鑷子,、止血鉗,、彎頭吸管、平皿,、三角燒瓶,、燒杯、量筒,、天平,、生理鹽水、75%酒精,、0.1%醋酸溶液,、蓋玻片、培養(yǎng)瓶,、鉆石筆,、鼠尾膠原。實驗內(nèi)容:1,、制備鼠尾膠原(兩個同學(xué)一組操作),。2、切割小玻片,。3,、利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶內(nèi)。實驗步驟:制備鼠尾膠原:1,、取大鼠尾巴洗凈,,75%酒精浸泡5分鐘;2,、手持尾巴,,用止血鉗夾住鼠尾的較高,折斷尾骨后拉出尾腱,;3,、將尾腱剪斷置于平皿中,生理鹽水浸泡,;4,、重復(fù)步驟2,、3,直至尾腱量夠用,;5,、吸去生理鹽水,將尾腱稱重(0.5-1克),。鼠尾膠原對前庭毛細(xì)胞具有良好的貼壁黏附促進(jìn)作用。重慶鼠尾膠原廠家供應(yīng)
使膠原纖維在電子顯微鏡下形成間距為680埃的明暗相間的特征性的橫紋結(jié)構(gòu),。貴陽正規(guī)鼠尾膠原直銷價
一種基于鼠尾膠原蛋白:1.一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,,為鼠尾膠原蛋白、聚乙烯醇,、殼聚糖,、水制成的凍干止血材料,各材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇?xì)ぞ厶菫?-10%0.2-5%0.2-2%,,余量為水,。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,其特征在于凍干止血材料中,,各材料重量配比為鼠尾膠原蛋白聚乙烯醇?xì)ぞ厶菫?%2%1%,,余量的水。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料,,其特征在于鼠尾膠原蛋白來源于各品系SFP級大鼠鼠尾,。貴陽正規(guī)鼠尾膠原直銷價