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來源: 發(fā)布時間:2022-06-12

糖原染色是病理學中常規(guī)的染色方法之一,,McManus在1946年較先使用高碘酸-雪夫技術顯示黏蛋白,,該法常用來顯示糖原和其他多糖,,該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原,,還能顯示中性黏液性物質和某些酸性物質以及軟骨,、垂體,、霉菌,、色素,、淀粉樣物質,、基底膜等。過碘酸(又稱高碘酸)是一種強氧化劑,,它能氧化糖類及有關物質中的1,,2-乙二醇基,使之變?yōu)槎?,醛不Schiff試劑能結合成一種品紅化合物,,產(chǎn)生紫紅色。由于高碘酸還可氧化細胞內其他物質,,使用時應注意選擇好高碘酸濃度和氧化時間,,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過氧化,這是很關鍵的步驟,。PAS技術是很少可檢測不同種類的黏液物質(如糖原,、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技術卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原,。若要冸確鑒別黏液物質(如黏蛋白或糖原),,需加入糖原消化步驟。大多數(shù)情冴下可用α–淀粉酶或麥芽淀粉酶來催化糖原的糖苷鍵水解,,形成水溶性的雙糖-麥芽糖,,在應用PAS技術之前將糖原從組織切片上除去。人類的唾液被認為是消化糖原的一種有效手段,但是出于安全以及缺乏標冸唾液的考慮,,不主張應用唾液在滴加染液時,,務必使染液完全覆蓋組織,但不能溢出圈外,,避免浪費試劑,。福建咨詢糖原染色試劑盒推薦廠家

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糖原染色在使用過程中需要注意以下幾個方面:盡可能選取小塊新鮮組織及時固定。糖原易溶于水,,在酶的作用下很容易分解葡萄糖,,更易溶于水,固定之前決不能用水或生理鹽水等浸洗,。應避免用水溶性固定液,,宜采用酒精性固定液,如Carnoy液,,能較好地保存糖原,,但有使糖原流動到細胞一側的現(xiàn)象,多數(shù)人認為是由于固定劑把細胞內的糖原推向固定劑對組織浸透的方向而造成,。其他組織應用中性福爾馬林固定為佳,。組織在4℃左右溫度內固定與保存,是針對糖的性質和避免糖原溶于水而采取的相應措施,。乙醇能沉淀白蛋白,、球蛋白,亦能 白和糖原沉淀,,但仍可溶于水,,因此較好不單獨使用乙醇固定,以乙醇為溶劑的混合固定液固定為佳天津正規(guī)糖原染色試劑盒量大從優(yōu)過碘酸氧化時間不宜過久,,氧化時的溫度以18~22℃佳,。

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含乙二醇基的多糖經(jīng)過碘酸氧化,產(chǎn)生醛基,,與雪夫(Schiff)試劑中無色品紅結合,,形成紫紅色沉淀物定位于含糖原的胞漿中。該反應稱為碘酸-雪夫(PAS)反應,。(1)雪夫液配制:堿性品紅1g溶于200ml沸水中,,冷卻60℃時過濾,加1mmol/L鹽酸20ml,,再冷卻至25℃左右,,加偏重亞硫酸鈉(Na2S2O5)2g,混合后放棕色瓶中,,置暗處24h,,無色即可放冰箱中保存,,呈微紅色,則加活性炭1~2g,,吸附過濾使成無色液體,,放冰箱中保存。若溶液變紅,,即不能再用,。(2)10g/L過碘酸水溶液:過碘酸(HIO4·2H2O)1g,加蒸餾水至10ml。溶解后蓋緊放冰箱備用,,一般可用3個月,,變黃則失效,。糖原染色試劑盒,。

糖原染色試劑盒。含乙二醇基的多糖經(jīng)過碘酸氧化,,產(chǎn)生醛基,,與雪夫(Schiff)試劑中無色品紅結合,形成紫紅色沉淀物定位于含糖原的胞漿中,。該反應稱為碘酸-雪夫(PAS)反應,。(1)雪夫液配制:堿性品紅1g溶于200ml沸水中,冷卻60℃時過濾,,加1mmol/L鹽酸20ml,,再冷卻至25℃左右,加偏重亞硫酸鈉(Na2S2O5)2g,,混合后放棕色瓶中,,置暗處24h,無色即可放冰箱中保存,,呈微紅色,,則加活性炭1~2g,吸附過濾使成無色液體,,放冰箱中保存,。若溶液變紅,即不能再用,。(2)10g/L過碘酸水溶液:過碘酸(HIO4·2H2O)1g,加蒸餾水至10ml,。溶解后蓋緊放冰箱備用,一般可用3個月,,變黃則失效,。幫助鑒別白血病細胞和腺骨髓轉移的腺細胞,腺細胞呈陽性反應,。

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PAS染色試劑配制及染色方法:1.材料與方1.1 實驗材料新鮮小白鼠肝臟,、腎臟標本各30例,均來自我室實驗材料。1.2 主要試劑1.2.1 AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液,,其配方:無水乙醇80mL,,冰醋酸5mL、甲醛10mL,。1.2.2 Carnoy固定液 氯仿300mL,,冰醋酸100mL,95%酒精600mL,。1.2.3 過碘酸溶液 0.5g過碘酸(HIO)溶于100mL蒸餾水或者70%酒精溶液中,,或者按如下配方配制:過碘酸0.8g,95%乙醇70mL,,醋酸鈉0.27g,,水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存,。1.2.4 無色品紅液(Schiff氏液) 在三角燒內加入蒸餾水500mL,,煮沸后,在保持微沸的情況下,,加入堿性品紅2.5g,,并不斷搖動約5min(勿使之沸騰),使堿性品紅徹底溶解(溶解液為深紅色),。冷卻到50℃時,,過濾,加入1N鹽酸50mL,,再待冷卻至25℃時加入偏重亞硫酸鈉2.5g,,塞住瓶口,搖動容器以充分混合(此時顏色明顯變淡),,然后避光放置或冰箱內24h過碘酸溶液和蘇木素溶液濃度更低,,不宜過染。浙江提供糖原染色試劑盒廠家供應

利用化學試劑與細胞內的某些物質進行化學反應,。福建咨詢糖原染色試劑盒推薦廠家

糖原及粘液染色法注意事項:1,、糖原的固定要及時,而且標本要新鮮,。2,、如用無水酒精作糖原的固定劑,有它的弊病,,因無水酒精滲透較慢,,而且容易產(chǎn)生極化,(極化是糖原顆粒趨向于細胞的一端),。故用Gendre氏固定液效果較佳,,其配法如下:苦味酸飽和于95%酒精85ml40%甲醛10ml冰醋酸5ml3,、各種試劑必須化學純,亞硫酸鈉須有濃厚氣味,,器皿必須潔凈而干燥,,染色缸亦是。4,、如果Schiff氏試劑,,在經(jīng)過活性碳吸附漂白后不顯無色,首先應考慮試劑中的偏重亞硫酸鈉是否失效,。如果偏重亞硫酸鈉氣味不濃,,使用時可考慮適當?shù)脑黾佑昧俊F浯慰紤]堿性品紅本身,,常常雖屬同一生產(chǎn)廠家,,但不同批號,其效果就可能不同,,應特別引起注意~福建咨詢糖原染色試劑盒推薦廠家