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外泌體在肺病進程中的作用:肺病細胞來源外泌體(LCC-exosome)可以通過刺激一些病癥血管的形成來促進一些病癥的生長,。據(jù)相關報道稱,LCC-exosome中的miR-210可以通過調節(jié)基質細胞中酪氨酸受體激酶A3的含量,,促進一些病癥血管的生成,;而LCC-exosome中的miR-23a則可以通過啟動脯氨酰羥化酶及壓制緊密結合蛋白ZO-1來促進肺病的生血管作用。此外,有研究發(fā)現(xiàn),,外泌體中的內(nèi)容物可以觸發(fā)上皮-間質轉化(EMT),。晚期肺病患者血清中外泌體波形蛋白表達增加,促使人正常支氣管上皮細胞出現(xiàn)EMT,,從而使肺支氣管正常上皮細胞出現(xiàn)增殖,,遷移能力。色譜法,。這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一,,但是需要特殊的設備,應用不普遍外泌體提純試劑盒的特色與優(yōu)勢:無需耗時的超速離心,,過濾或特殊注射器,。寧波正規(guī)外泌體提取試劑哪家便宜
外泌體提取:尺寸排阻色譜,。尺寸排阻色譜(Size-exclusionchromatography,,SEC)是基于大小而非分子量實現(xiàn)分離大分子。該技術應用填充多孔聚合物微球的柱子,,分子根據(jù)其直徑通過微球,,半徑小的分子需要更長的時間才能通過色譜柱的孔隙遷移,而大分子則從色譜柱中更早地洗脫,。尺寸排阻色譜可以精確分離大小分子,。此外,可以將不同的洗脫溶液應用于該方法,。與離心方法相比,,色譜分離已被證明具有更多優(yōu)勢,因為通過色譜分離的外泌體不受剪切力的影響,,這可能會改變囊泡的結構,。目前,SEC是一種普遍接受的分離血液和尿液中外泌體的技術,。不過,,該方法耗時較長,不適合大量樣本處理,。正規(guī)外泌體提取試劑廠家批發(fā)價外泌體的特殊結構和功能,,使得它具有潛在的應用價值,可以作為診斷多種疾病的生物指標,。
外泌體鑒定:外泌體分離之后,,需要經(jīng)過一系列鑒定才能確定分離的是外泌體。鑒定方法從物理特征到表面分子標志物,,多角度進行鑒定,。l透射電鏡鑒定法:簡稱TEM,適合外泌體雙層囊膜超微結構觀察,即通常為茶托型或一側凹陷的半球形,。l納米顆粒追蹤分析法:簡稱NTA,,該方法能保證外泌體原始狀態(tài)、檢測速度快,,檢測后能提供外泌體粒徑和濃度信息,。lWesternblot分子標志物檢測:外泌體標志蛋白包括四跨膜蛋白家族,如CD9,、CD63和CD81,;細胞質蛋白,如肌動蛋白(Actin)和鈣磷脂結合蛋白(Annexins),;使用可截留100KD分子量的膜,,通過離心截留上清中的外泌體,截留完成后,。
所有培養(yǎng)的細胞類型均可分泌外泌體,,且外泌體天然存在于體液中,包括血液,、唾液,、尿液、腦脊液和乳汁中,。有關他們分泌和攝取及其組成,、“運載物”和相應功能的精確分子機制剛剛開始研究。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡,,參與細胞間通訊,,對外泌體的研究興趣日益增長,無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開發(fā),。1983年,外泌體初次于綿羊網(wǎng)織紅細胞中被發(fā)現(xiàn),,1987年Johnstone將其命名為“exosome”,。多種細胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,,經(jīng)多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中,。一方面可以作為診斷多種疾病的生物指標。
外泌體與免疫系統(tǒng):不同的細胞來源的外泌體,,包括免疫細胞(B細胞和樹突狀細胞),、病細胞、上皮細胞和間充質細胞,,釋放出帶有載體的外泌體,,可影響先天免疫系統(tǒng)和適應性免疫系統(tǒng)中受體細胞的增殖和各自的活性。CD4+和CD8+T細胞可直接或間接地受到外泌體的影響,刺激或壓制其增殖和功能,。外泌體與代謝性和心血管疾?。和饷隗w可以通過攜帶miRNA或代謝物分子在代謝性疾病和心血管疾病的發(fā)生的發(fā)展過程中起作用。體外培養(yǎng)心血管疾病的細胞收集的外泌體與疾病相關的代謝適應有關,;體外培養(yǎng)的間充質干細胞和胚胎干細胞的外泌體具有保護心血管的作用,。由于外泌體是一個大小約幾十納米的囊狀小體,大于一般蛋白質,。合肥正規(guī)外泌體提取試劑銷售廠家
重復離心操作還有可能對囊泡造成損害,,從而降低其質量。寧波正規(guī)外泌體提取試劑哪家便宜
外泌體研究的主要應用:外泌體的功能取決于其所來源的細胞類型,,其可參與到機體免疫應答,、抗原提呈、細胞遷移,、細胞分化,、一些病癥侵襲等方方面面。有研究表明一些病癥來源的外泌體參與到一些病癥細胞與基底細胞的遺傳信息的交換,,從而導致大量新生血管的生成,,促進了一些病癥的生長與侵襲。一些病癥,。一些病癥轉移,。來自白血病干細胞的外泌體促進急性骨髓性白血病(AML)細胞的增殖,、遷移和壓制細胞凋亡,。治病靶標。利用外泌體遞送小干擾RNA來沉默KRASG12D,,從而特異性高效靶向至胰腺病細胞,,以明顯降低RAS活化、病細胞增殖和轉移過程,。免疫,。β細胞將含有蛋白質和miRNA的外泌體釋放到細胞外,并可轉移到其他代謝部位或免疫內(nèi)皮細胞,,有利于維持葡萄糖體內(nèi)平衡或造成胰島素抵抗,。心血管。外泌體介導miR-155從平滑肌細胞轉移到內(nèi)皮細胞導致了內(nèi)皮細胞的損傷促進動脈硬化,。分子標記,。疾病診斷。在酒精性肝病,、NASH,、菌類性肝炎,、藥物性肝損傷和肝細胞病中發(fā)現(xiàn)循環(huán)EVs的水平上升寧波正規(guī)外泌體提取試劑哪家便宜