網(wǎng)狀纖維的變化,反映了疾病的發(fā)生和發(fā)展的不同過程,,對(duì)疾病的診斷有極大意義,。網(wǎng)狀纖維的多少,、粗細(xì)緊密,、疏松或斷裂,,都是病理檢驗(yàn)的重要指標(biāo),,尤其是在臨床病理診斷中,可根據(jù)其存在和分布來鑒別與肉瘤,。而在HE染色標(biāo)本上,,網(wǎng)狀纖維不易顯色,。所以網(wǎng)狀纖維的組織化學(xué)染色,在臨床病理診斷上占著相當(dāng)重要的位置,。網(wǎng)狀纖維染色:網(wǎng)狀纖維是非常細(xì)而短的纖維,,大量堆積時(shí)則形成致密的網(wǎng)狀,故有網(wǎng)狀纖維之稱,。疏松組織中網(wǎng)狀纖維比較少,,它多分布在結(jié)締組織與其它組織交界處,如在上皮組織與結(jié)締組織交界處的基膜內(nèi),,血管周圍以及造血部位,,內(nèi)分泌腺的腺細(xì)胞團(tuán)索和外分泌腺的腺末房周圍等處均有豐富的網(wǎng)狀纖維,。0.5%過碘酸水溶液5分鐘,。或1%過碘酸95%酒精溶液,。北京咨詢糖原染色試劑盒廠家直銷
PAS染色試劑配制及染色方法:1.材料與方1.1 實(shí)驗(yàn)材料新鮮小白鼠肝臟,、腎臟標(biāo)本各30例,均來自我室實(shí)驗(yàn)材料,。1.2 主要試劑1.2.1 AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液,,其配方:無水乙醇80mL,冰醋酸5mL,、甲醛10mL,。1.2.2 Carnoy固定液 氯仿300mL,冰醋酸100mL,,95%酒精600mL,。1.2.3 過碘酸溶液 0.5g過碘酸(HIO)溶于100mL蒸餾水或者70%酒精溶液中,或者按如下配方配制:過碘酸0.8g,,95%乙醇70mL,,醋酸鈉0.27g,水20mL,。待溶解后置于4℃冰箱避光保存,。1.2.4 無色品紅液(Schiff氏液) 在三角燒內(nèi)加入蒸餾水500mL,煮沸后,,在保持微沸的情況下,,加入堿性品紅2.5g,并不斷搖動(dòng)約5min(勿使之沸騰),,使堿性品紅徹底溶解(溶解液為深紅色),。冷卻到50℃時(shí),過濾,,加入1N鹽酸50mL,,再待冷卻至25℃時(shí)加入偏重亞硫酸鈉2.5g,,塞住瓶口,搖動(dòng)容器以充分混合(此時(shí)顏色明顯變淡),,然后避光放置或冰箱內(nèi)24h江蘇糖原染色試劑盒廠家批發(fā)價(jià)糖尿病性腎小球硬化癥或血管病的診斷,。
糖原染色:1、概況PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在組織學(xué)上,,主要用來檢測(cè)組織中的糖類,。過碘酸把糖類相鄰兩個(gè)碳上的羥基氧化成醛基,再用Schiff試劑和醛基反應(yīng)使呈現(xiàn)紫紅色,。2,、原理PAS染色又稱過碘酸雪夫染色,糖原染色,。一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì),。過碘酸能使細(xì)胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化成二醛,再與Schiff氏液的無色品紅結(jié)合,,紅色,,定位于胞漿上。3,、應(yīng)用隨著醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展,,糖原染色應(yīng)用的范圍更加普遍,如用以證明與鑒別細(xì)胞內(nèi)空泡狀的性質(zhì),,心肌病變及其他心血管疾病的診斷,,糖原累積病診斷和研究,糖尿病的診斷和研究,,用于某些的診斷等~
糖原染色(PAS):(1)原理:過碘酸將血細(xì)胞內(nèi)的糖原氧化,,生成醛基。醛基與雪夫液中的無色品紅結(jié)合,,形成紫色化合物,,定位于細(xì)胞質(zhì)中。(2)操作方法:干燥涂片,,滴加甲醛固定液固定10分鐘,,流水沖洗,晾干,。滴加過碘酸溶液作用20分鐘,,流水沖洗,晾干,。滴加雪夫液作用60分鐘,,流水沖洗,晾干。滴加甲基綠溶液復(fù)染10分鐘,,流水沖洗,,晾干鏡檢。(4)臨床意義:根據(jù)染色陽(yáng)性程度和陽(yáng)性物形態(tài)鑒別主要用于急性淋巴細(xì)胞白血病和急性非淋巴細(xì)胞白血病鑒別,,還有助于紅白血病與巨幼細(xì)胞貧血和溶血性貧血的鑒別診斷過碘酸將血細(xì)胞內(nèi)的糖原氧化,,生成醛基。
糖原染色試劑盒,。含乙二醇基的多糖經(jīng)過碘酸氧化,,產(chǎn)生醛基,與雪夫(Schiff)試劑中無色品紅結(jié)合,,形成紫紅色沉淀物定位于含糖原的胞漿中,。該反應(yīng)稱為碘酸-雪夫(PAS)反應(yīng)。(1)雪夫液配制:堿性品紅1g溶于200ml沸水中,,冷卻60℃時(shí)過濾,,加1mmol/L鹽酸20ml,再冷卻至25℃左右,,加偏重亞硫酸鈉(Na2S2O5)2g,,混合后放棕色瓶中,,置暗處24h,,無色即可放冰箱中保存,呈微紅色,,則加活性炭1~2g,,吸附過濾使成無色液體,放冰箱中保存,。若溶液變紅,,即不能再用。(2)10g/L過碘酸水溶液:過碘酸(HIO4·2H2O)1g,加蒸餾水至10ml,。亞硫酸鈉須有濃厚氣味,,器皿必須潔凈而干燥。北京品質(zhì)好的糖原染色試劑盒廠家直銷
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糖原及粘液染色法:操作方法:(1)石蠟切片脫蠟至水。(2)0.5%過碘酸水溶液5分鐘,?;?%過碘酸95%酒精溶液(過碘酸再結(jié)晶應(yīng)重新配制使用)。(3)蒸餾水洗,,70%酒精洗,。(4)Schiff氏液15-30分鐘。(Schiff氏液從冰箱取出升至室溫使用)(5)流水沖洗10分鐘,。(6)蘇木素浸染細(xì)胞核2-3分鐘,。(7)脫水,、透明、封蓋,。結(jié)果:糖原呈紅色,,細(xì)胞核呈藍(lán)色。試劑配制:(1)0.5%過碘酸(HIO4)水溶液或70%酒精溶液,。(2)Schiff氏試劑,。堿性品紅1g蒸餾水200ml1N鹽酸(98.3ml比重1.16鹽酸,加入蒸餾水成1000ml)20ml偏重亞硫酸鈉或鉀1g堿性品紅1g加入200ml蒸餾水,,攪拌加熱沸騰,,待冷卻至50℃過濾,加入當(dāng)量鹽酸至25℃時(shí)加入偏重亞硫酸鈉,。置于暗處,,兩天后溶液變桔黃色或草黃色,然后加入少量活性碳并震蕩,、過濾,,此時(shí)溶液應(yīng)為無色。保存冰箱備用,。溶液如顯淺紅色或草黃色,,染色效果較差北京咨詢糖原染色試劑盒廠家直銷