外泌體的提取方法：1、色譜法,。色譜法是利用根據(jù)凝膠孔隙的孔徑大小與樣品分子尺寸的相對關(guān)系而對溶質(zhì)進(jìn)行分離的分析的方法,。樣品中大分子不能進(jìn)入凝膠孔，只能沿多孔凝膠粒子之間的空隙通過色譜柱,，首先被流動(dòng)相洗脫出來,；小分子可進(jìn)入凝膠中絕大部分孔洞，在柱中受到更強(qiáng)地滯留,，更慢地被洗脫出,。分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設(shè)備,，應(yīng)用不普遍,。2、超濾離心,。由于外泌體是一個(gè)大小約幾十納米的囊狀小體，大于一般蛋白質(zhì),，利用不同截留相對分子質(zhì)量(MWCO)的超濾膜對樣品進(jìn)行選擇性分離,，便可獲得外泌體。超濾離心法簡單高效,，且不影響外泌體的生物活性,，是提取細(xì)胞外泌體的一種新方法。外泌體（Exosome）發(fā)現(xiàn)于1986年,，是一種直徑約30~100nm的雙層膜囊泡狀結(jié)構(gòu)小體,。天津外泌體提取試劑進(jìn)貨價(jià)

人體內(nèi)多種細(xì)胞及體液均可分泌外泌體，包括內(nèi)皮細(xì)胞,、免疫細(xì)胞、血小板,、平滑肌細(xì)胞等,。當(dāng)其由宿主細(xì)胞被分泌到受體細(xì)胞中時(shí)，外泌體可通過其攜帶的蛋白質(zhì),、核酸,、脂類等來調(diào)節(jié)受體細(xì)胞的生物學(xué)活性。外泌體介導(dǎo)的細(xì)胞間通訊主要通過以下三種方式：一是外泌體膜蛋白可以與靶細(xì)胞膜蛋白結(jié)合,，進(jìn)而靶細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)的信號通路,。二是在細(xì)胞外基質(zhì)中，外泌體膜蛋白可以被蛋白酶剪切,，剪切的碎片可以作為配體與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合,，從而細(xì)胞內(nèi)的信號通路。有報(bào)道稱一些外泌體膜上蛋白在其來源細(xì)胞膜上未能檢測出,。三是外泌體膜可以與靶細(xì)胞膜直接融合,，非選擇性的釋放其所含的蛋白質(zhì),、mRNA以及microRNA南京外泌體提取試劑直銷價(jià)外泌體的提取有超速離心、試劑盒,、超濾法,、蔗糖密度梯度離心等，然而各種方法均有其利弊,。

外泌體的功能取決于其所來源的細(xì)胞類型,，其可參與到機(jī)體免疫應(yīng)答、抗原提呈,、細(xì)胞遷移,、細(xì)胞分化、一些病癥侵襲等方方面面,。有研究表明一些病癥來源的外泌體參與到一些病癥細(xì)胞與基底細(xì)胞的遺傳信息的交換，從而導(dǎo)致大量新生血管的生成,，促進(jìn)了一些病癥的生長與侵襲,。功能：當(dāng)外泌體在1980年初次被發(fā)現(xiàn)后，其被認(rèn)為是細(xì)胞排泄廢物的一種方式,，如今隨著大量對其生物來源,、其物質(zhì)構(gòu)成及運(yùn)輸、細(xì)胞間信號的傳導(dǎo)以及在體液中的分布的研究發(fā)現(xiàn)外泌體具有多種多樣的功能,。

外泌體(Exosome)是由細(xì)胞分泌而來的微小囊泡,，直徑約為30-200nm，密度在1.13-1.21g/ml,，具有杯狀形態(tài),、雙層膜結(jié)構(gòu)，天然存在于血液,、尿液,、唾液、母乳和細(xì)胞培養(yǎng)基等生物體液中,。包括瘤細(xì)胞在內(nèi)幾乎所有類型的細(xì)胞（免疫細(xì)胞,、神經(jīng)細(xì)胞、干細(xì)胞),，都可以產(chǎn)生并釋放exosome,。Exosome內(nèi)含有與細(xì)胞來源相關(guān)的蛋白質(zhì)rRNA和microRNA，Exosome可通過細(xì)胞膜受體直接受體細(xì)胞,，也可運(yùn)輸?shù)鞍踪|(zhì),、mRNA、miRNA、lncRNA,、circRNA,，甚至細(xì)胞器進(jìn)入受體細(xì)胞，參與細(xì)胞間通訊,。Exosome在免疫應(yīng)答,、炎癥反應(yīng)、血管生成,、凋亡,、凝血和廢物處理等生理過程發(fā)揮關(guān)鍵作用，不同細(xì)胞來源的exosome所含有的RNA和蛋白成分不盡相同,，可作為多種疾病的早期診斷標(biāo)記物,，也能作為靶向藥物的載體進(jìn)行疾病。miRNA是一類22nt左右大小的非編碼分子,，它可以通過外泌體從一個(gè)地方轉(zhuǎn)運(yùn)到另外一個(gè)地方行使基因沉默功能,。通過檢測外泌體中miRNA表達(dá)變化，可以發(fā)現(xiàn)外泌體中miRNA特異性功能超速離心法是目前外泌體相關(guān)文章中的主流方法,，由于離心步驟繁瑣,。

外泌體(exosomes，Exos)是細(xì)胞分泌的一種膜囊泡,，因其可以將供體細(xì)胞的信息通過其攜帶的蛋白質(zhì),、mRNA、miRNA等傳遞到受體細(xì)胞,，實(shí)現(xiàn)細(xì)胞之間的信息交流及物質(zhì)交換,，并且可以作為藥物載體轉(zhuǎn)運(yùn)藥物而引起科學(xué)家的普遍關(guān)注(Fig1)。外泌體作為內(nèi)源性的天然藥物載體有著獨(dú)特的優(yōu)勢,，表面由脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成,，使其可以穿透許多生物膜，提高藥物的運(yùn)輸效率和靶向性,，可以穩(wěn)定存在于血液中,，納米級尺寸明顯增強(qiáng)藥物在瘤部位的滲透滯留效應(yīng)(permeabilityandretentioneffect,EPR)。目前,，許多抗藥物、基因藥物及藥物均被成功載入外泌體,。但是由于沒有較好的外泌體分離純化和載藥的方法,，使得其作為藥物載體的應(yīng)用受到限制。如何高效地提取外泌體是實(shí)現(xiàn)這項(xiàng)新興液體活檢技術(shù)臨床常規(guī)化應(yīng)用的關(guān)鍵,。北京外泌體提取試劑

用無菌針管吸取上層含有外泌體的液體,，置于80℃儲(chǔ)存?zhèn)溆谩Ｌ旖蛲饷隗w提取試劑進(jìn)貨價(jià)

目前的主流觀點(diǎn)認(rèn)為，外泌體的產(chǎn)生過程為：細(xì)胞膜內(nèi)陷,，形成內(nèi)體（endosome）,，再形成多泡體（multivesicularbodies，MVB）,，較后分泌到胞外成為外泌體,。外泌體中攜帶有母細(xì)胞的多種蛋白質(zhì)、脂類,、DNA和RNA等重要信息,。外泌體較早見于1981年，EGTrams等在體外培養(yǎng)的綿羊紅細(xì)胞上清液中發(fā)現(xiàn)了有膜結(jié)構(gòu)的小囊泡,，并命名為exosome,。對于外泌體的作用，當(dāng)時(shí)推測為細(xì)胞排泄廢物的一種方式,。1996年GRaposo等發(fā)現(xiàn)類似于B淋巴細(xì)胞的免疫細(xì)胞也會(huì)分泌抗原呈遞外泌體（antigenpresentingvesicle）,，所分泌的外泌體可以直接刺激效應(yīng)CD4+細(xì)胞的抗一些病癥反應(yīng)。2007年HValadi等進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)細(xì)胞之間可以通過外泌體中RNA交換遺傳物質(zhì),。隨著有關(guān)外泌體研究越來越多,，研究者發(fā)現(xiàn)它普遍參與了機(jī)體免疫應(yīng)答、抗原呈遞,、細(xì)胞分化,、一些病癥生長于侵襲等各種生物過程中。目前人們多采用超速離心,、免疫磁珠,、超濾、沉淀或試劑盒等方法實(shí)現(xiàn)外泌體的提取分離,。天津外泌體提取試劑進(jìn)貨價(jià)

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