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膠原蛋白的應用:1.膠原天然的緊密的纖維結構,,使膠原材料顯示出很強的韌性和強度,適用于薄膜材料的制備,;2.大較膠原被用作制造腸衣等可食用包裝材料.其獨特之處是:在熱處理過程中.隨著水分和油脂的蒸發(fā)和熔化.膠原幾乎與肉食的收縮率一致,。而其他的可食用包裝材料還沒被發(fā)現具有這品質;3.由于膠原分子鏈上含有大量的親水基團.所以與水結合的能力很強.這一性質使膠原在食品中可以用作填充劑和凝膠,;4.膠原在酸性和堿性介質中膨脹,,這一性質也應用于制備膠原基材料的處理工藝中。制備鼠尾膠原:搖晃,,使尾腱分散于醋酸溶液中,,4℃放置一星期,。開封鼠尾膠原報價
鼠尾膠原為貼附底物的人鼻腔纖毛上皮細胞的體外培養(yǎng)模式,為人鼻腔黏液纖毛運輸系統的研究提供科學有效的方法。方法制備鼠尾膠原并鋪片,以鼠尾膠原為貼附底物組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)人鼻腔纖毛上皮細胞,培養(yǎng)7天時進行HE染色及掃描電鏡和透射電鏡觀察細胞形態(tài)和結構,應用高速攝像技術測量纖毛擺動頻率,。結果鼠尾膠原要平坦均勻,平均厚度約為1mm;HE染色可見上皮細胞呈單層向周圍爬開;掃描電鏡下見纖毛上皮細胞呈不規(guī)則多角形,纖毛周圍可見微絨毛;透射電鏡下可見纖毛上皮細胞間為緊密連接;同一細胞任意兩點纖毛擺動頻率是相同的;同一來源體外培養(yǎng)的鉤突和下鼻甲的纖毛擺動頻率是相同的,。結論以鼠尾膠原為貼附底物人鼻腔纖毛上皮細胞的體外培養(yǎng)模式的成功建立,為今后研究鼻內用藥對纖毛除去功能的影響提供了良好的方法和途徑。珠海正規(guī)鼠尾膠原供應商鼠尾膠原蛋白I型在濃度1mg/ml以上,,pH 7左右時可形成具有一定強度三維膠,。
含細胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,1mg/ml三維膠為例):準備好懸浮于培養(yǎng)液的細胞,,并放置于冰浴中,。將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul0.1mol/LNaOH中(如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結),,立即混勻,。再加入23ul10xPBS或10x培養(yǎng)液,混勻(混勻后pH為7左右,,如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,,初次使用時需要用pH試紙測試)。加入760ul的細胞懸浮液,,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中,。將培養(yǎng)器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后,加入適當體積的細胞培養(yǎng)液,,轉移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。
含細胞三維膠原凝膠的制備(以配制1mg/mL三維膠1mL為例)準備好懸浮于培養(yǎng)液的細胞,并放置于冰浴中,。將200μL本品加到12μL0.1mol/LNaOH中(如果反過來把12μL0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,,會由于NaOH不能迅速混勻而產生局部的膠原凝結),立即混勻,。再加入23μL10×PBS或10×培養(yǎng)液,,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH為7左右,如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,,初次使用時需要測定pH值),。加入760μL的細胞懸浮液,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中,。將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后,,加入適當體積的細胞培養(yǎng)液,轉移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。本品在室溫下pH中性時可迅速成膠,,在操作過程中要盡量保持低溫。保存條件4℃保存,,切勿凍存,,有效期一年,。用無菌0.006mol/L乙酸將膠原蛋白稀釋到0.012mg/mL。
鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項:通過醋酸抽提,、氯化鈉沉淀,、磷酸氫二鈉沉淀等步驟制備的。鼠尾膠原蛋白可用于包被細胞培養(yǎng)器皿,,培養(yǎng)一些在普通細胞培養(yǎng)器皿中不易貼壁的細胞,。也可用于制備三維膠,模擬真實的生長環(huán)境,,使細胞在三維環(huán)境中生長,。1,在使用鼠膠原蛋白型包被的細胞培養(yǎng)皿中檢查到PC-12細胞的貼壁和生長,。1mg/ml濃度以上,,pH左右時可形成具有一定強度的三維膠,檢查到NIH-3T3細胞在三維膠內正常生長,、PC-12細胞在三維膠表面正常生長,。使用方法:1、細胞培養(yǎng)器皿的表面包被推薦濃度:1-5ug/cm0.012mg/ml,。按以下表格體積加到相應的培養(yǎng)器皿中,。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,,并且制作簡便,,成本低廉。整個操作請于冰上進行,,因室溫下鼠尾膠原I可迅速成膠,。太原鼠尾膠原哪里買
鼠尾膠原為貼附底物人鼻腔纖毛上皮細胞的體外培養(yǎng)模式的成功建立。開封鼠尾膠原報價
一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法,,采用酸法與酶法相結合的工藝,,保持恒低溫無菌的環(huán)境,利用同樣濃度的鹽溶液進行兩次鹽析與離心,,簡化了提純步驟,。所用酸為低濃度酸溶液,,并采用檸檬酸替代醋酸進行提純,。從提取原料到樣品生成過程中,進行多次真空冷凍干燥,,并經進一步處理獲得含水率在3%以下的膠原蛋白微粉,;較后由滅菌、無菌包裝,,成品膠原蛋白粉末的純度在98%以上,。本發(fā)明獲得的膠原蛋白降低了蛋白的免疫原性,,提高了產率和生物相容性,降低了成本,,適用于生物醫(yī)用材料,。開封鼠尾膠原報價
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