鼠尾膠原醋酸溶解:1.將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中,,制備成濃度為0.1%的溶液。在室溫中攪拌1-3小時(shí)直到完全溶解,。2.建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中,,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿。氯仿的量約為膠原溶液的10%,。不要晃動(dòng)或攪拌,。在2-8度中放置過(guò)夜,。在無(wú)菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液,。我們不建議用過(guò)濾的方法無(wú)菌化。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會(huì)導(dǎo)致丟失蛋白,。3.稀釋一定數(shù)量的膠原溶液,。4.按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶。在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時(shí)或者2-8度過(guò)夜,。使用溶解有一定比例胃蛋白酶的酸溶液對(duì)初步處理的鼠尾腱進(jìn)行酶解,。貴陽(yáng)鼠尾膠原哪里買(mǎi)
一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法:隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的發(fā)展,各種醫(yī)用耗材的更新?lián)Q代也是日新月異,。止血材料是常見(jiàn)的醫(yī)療器械產(chǎn)品,。但是現(xiàn)今市面上的止血材料不光存在著容易引起傷口傳染的缺點(diǎn);同時(shí)還存在著容易與傷口粘附不易去除,,導(dǎo)致傷口潰爛,,或者因?yàn)檎掣綄?dǎo)致傳染;再次就是止血材料多是通過(guò)吸收血液及添加凝血酶等外在因素止血,,很少有止血材料是使用能夠自身具有止血性質(zhì)的材料來(lái)生產(chǎn)的?,F(xiàn)今市面上的可吸收止血材料有氧化纖維素,、α-氰基丙烯酸酯類(lèi)組織膠、醫(yī)用止血明膠等,,但是都有各自的缺點(diǎn),。如氧化纖維素可引起組織周?chē)鶳H值升高;α-氰基丙烯酸酯類(lèi)組織膠降解過(guò)程中釋放出氰和甲醛等有毒物質(zhì),;醫(yī)用止血明膠黏附性較差,,易脫落,因其吸收血液后膨脹可能壓迫傷口周?chē)M織等,。廈門(mén)石家莊鼠尾膠原期間不斷攪拌,,防止凍結(jié)成塊,得到膠原溶脹液,。
膠原蛋白的提取方法:1.堿法提?。簤A法提取膠原蛋白常用的處理劑為石灰、氫氧化鈉,、碳酸鈉等,。如Holzer等[5]采用1%~1.5%石灰水浸泡的方法提取膠原蛋白。由于它容易造成肽鍵水解,,因此得到的水解產(chǎn)物分子量比較低,。所以,若想保留膠原的三股螺旋結(jié)構(gòu),,此法不可取,。2.鹽法提取:鹽法提取膠原蛋白所用的中性鹽有鹽酸-三羥甲基胺基甲烷(Tris-HCl),、氯化鈉,、檸檬酸鹽等。在中性條件下,,當(dāng)鹽的濃度達(dá)到一定量時(shí),,膠原溶解。并且可采用不同濃度的氯化鈉對(duì)提取的膠原蛋白進(jìn)行鹽析處理,,可以沉淀出不同類(lèi)型的膠原蛋白,。
鼠尾Ⅰ型膠原:組裝液的配置:1.50mmol/L甘氨酸+200mmol/L氯化鉀100mL,用1mol/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)酸堿度至9.2,。2.膠原纖維的重構(gòu)吸取膠原10μL至小培養(yǎng)皿中,,倒入0.5mL自組裝液,室溫放置20min,。予自組裝液自組裝24h,。吸取0.05%戊二醛2mL至小培養(yǎng)皿中,將自組裝24h的膠原浸泡在戊二醛中,。然后將膠原經(jīng)去離子水,、50%乙醇,、100%乙醇依次漂洗后進(jìn)行TEM觀察,。3.生物礦化形成仿生骨材料靜滴配置鈣磷礦化液將25mL鈣液(10mmol/L二水氯化鈣+150mmol/L氯化鈉+50mmol/L三羥甲基氨基甲烷+0.02%三氮化鈉)倒入燒杯中,,滴入聚丙烯(PAA)至濃度350μg/mL,;滴加1mol/L的氯化氫,,調(diào)節(jié)酸堿度至7.4,,然后緩慢滴入25mL磷液(6mmol/L磷酸氫二鈉),,約16滴/min,。I型膠原蛋白(Collagen, Type I)結(jié)構(gòu)上是由2個(gè)α1鏈和1個(gè)α2鏈組成的異源多聚體,。
一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法:一般的生物體中提取的膠原蛋白多為混合型,,之前多從牛皮,、豬皮,、牛腱中提取,,但這類(lèi)膠原蛋白不光有油脂等其他雜質(zhì),也存在著II型及其他一些膠原蛋白亞型,;同時(shí),,這種畜牧業(yè)大量飼養(yǎng)的動(dòng)物存在著例如瘋牛病等一些生物性疾病及病毒傳染,如果用此開(kāi)發(fā)醫(yī)用產(chǎn)品更加存在著品質(zhì)的不穩(wěn)定及潛在的風(fēng)險(xiǎn)及危害;再次,,人的真皮中主要含有I型和III型,但I(xiàn)II型不易大量獲得,,故應(yīng)用單一的I型膠原蛋白是解決體外應(yīng)用的醫(yī)用產(chǎn)品引起的抗原性問(wèn)題的關(guān)鍵,,這也是I型膠原蛋白抗原性低的原因之一,。同時(shí),I型膠原蛋白的三重螺旋的氨基酸結(jié)構(gòu)決定了它的一些特有的性能,,如機(jī)械性能,、促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng),、弱抗原性、可生物降解性和膠原的自締合性,。利用鼠尾Ⅰ型膠原構(gòu)建與人類(lèi)自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)相近的仿生骨材料,。重慶正規(guī)鼠尾膠原
制備鼠尾膠原:按每克尾腱50ml的比例,加入0.1%醋酸溶液,。貴陽(yáng)鼠尾膠原哪里買(mǎi)
鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法,。各個(gè)材料及其重量配比為鼠尾膠原蛋白∶聚乙烯醇∶殼聚糖為余量為水,采用冷凍干燥工藝制備,。本發(fā)明所制備的止血材料主要采用鼠尾膠原蛋白制備,,較傳統(tǒng)的止血材料不可吸收、容易引起機(jī)體過(guò)敏,、止血效果差等缺點(diǎn),,本發(fā)明所制備的止血材料具有人體內(nèi)可吸收,生物相容性好,;止血效果快,,具有很強(qiáng)的親水性;同時(shí)可啟動(dòng)血小板的凝聚,,一旦血小板凝聚,,就可形成血栓,進(jìn)而促使血漿結(jié)塊阻止血流,。同時(shí),,膠原表面的特定區(qū)域可以與細(xì)胞表面存在的類(lèi)似纖連蛋白的糖蛋白結(jié)合,可以起到防止腸粘連的功效,。貴陽(yáng)鼠尾膠原哪里買(mǎi)