作為一種分子通斷開關(guān)的KRAS發(fā)生突變時(shí)會(huì)處于“開啟”狀態(tài),。在80%～95%的胰腺導(dǎo)管腺?。≒DAC）當(dāng)中,，這個(gè)基因發(fā)生突變,，這也是這種一些疾病中較為常見的突變,。這些研究人員證實(shí)iExosome能夠運(yùn)送特異性地靶向KRAS的siRNA和shRNA分子，并且比他們的合成對(duì)應(yīng)物脂質(zhì)體（liposome）更加高效,。脂質(zhì)體不具有外泌體表現(xiàn)出的天然復(fù)雜性和優(yōu)勢,。德州大學(xué)MD安德森一些疾病中心一些疾病生物學(xué)助理教授ValerieLeBleu博士說，“我們的研究提示著與脂質(zhì)體相比,，外泌體表現(xiàn)出運(yùn)送siRNA分子和壓制侵襲性胰腺瘤生長的優(yōu)異能力,。我們也證實(shí)外泌體表面上的CD47存在允許它們躲避來自循環(huán)單核細(xì)胞的吞噬作用,?！蓖饷隗w的提取有超速離心、試劑盒,、超濾法,、蔗糖密度梯度離心等，然而各種方法均有其利弊,。深圳外泌體提取試劑廠家直銷

所有培養(yǎng)的細(xì)胞類型均可分泌外泌體,，且外泌體天然存在于體液中，包括血液,、唾液,、尿液、腦脊液和乳汁中,。有關(guān)他們分泌和攝取及其組成,、“運(yùn)載物”和相應(yīng)功能的精確分子機(jī)制剛剛開始研究。外泌體目前被視為特異性分泌的膜泡,，參與細(xì)胞間通訊,，對(duì)外泌體的研究興趣日益增長，無論是研究其功能還是了解如何將其用于微創(chuàng)診斷的開發(fā),。1983年,，外泌體初次于綿羊網(wǎng)織紅細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn),，1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體,。其主要來源于細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體,，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。南京外泌體提取試劑廠家供應(yīng)外泌體是一種能被機(jī)體內(nèi)大多數(shù)細(xì)胞分泌的直徑大約為30~150nm的具有脂質(zhì)雙層膜的微小膜泡,。

目前的主流觀點(diǎn)認(rèn)為,，外泌體的產(chǎn)生過程為：細(xì)胞膜內(nèi)陷，形成內(nèi)體（endosome）,，再形成多泡體（multivesicularbodies,，MVB），較后分泌到胞外成為外泌體,。外泌體中攜帶有母細(xì)胞的多種蛋白質(zhì),、脂類、DNA和RNA等重要信息,。外泌體較早見于1981年,，EGTrams等在體外培養(yǎng)的綿羊紅細(xì)胞上清液中發(fā)現(xiàn)了有膜結(jié)構(gòu)的小囊泡，并命名為exosome,。對(duì)于外泌體的作用,，當(dāng)時(shí)推測為細(xì)胞排泄廢物的一種方式。1996年GRaposo等發(fā)現(xiàn)類似于B淋巴細(xì)胞的免疫細(xì)胞也會(huì)分泌抗原呈遞外泌體（antigenpresentingvesicle）,，所分泌的外泌體可以直接刺激效應(yīng)CD4+細(xì)胞的抗一些病癥反應(yīng),。2007年HValadi等進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)細(xì)胞之間可以通過外泌體中RNA交換遺傳物質(zhì)。隨著有關(guān)外泌體研究越來越多,，研究者發(fā)現(xiàn)它普遍參與了機(jī)體免疫應(yīng)答,、抗原呈遞、細(xì)胞分化,、一些病癥生長于侵襲等各種生物過程中,。目前人們多采用超速離心、免疫磁珠,、超濾,、沉淀或試劑盒等方法實(shí)現(xiàn)外泌體的提取分離。

外泌體的提取,、分離方法：開發(fā)高效,、快速、穩(wěn)定,，并且保持外泌體結(jié)構(gòu)和生物功能完整性的方法,，是目前外泌體應(yīng)用于臨床的基礎(chǔ)和前提。從細(xì)胞上清和體液中提取分離外泌體的方法很多,，但是外泌體的純度和產(chǎn)量卻和分離方法息息相關(guān),。通常分離步驟少,、產(chǎn)率高，但是純度會(huì)受到影響,。鑒于每種分離方法都有其優(yōu)缺點(diǎn),，實(shí)驗(yàn)可以根據(jù)樣本來源、下游實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡?，選擇合適的外泌體分離方法,。2015年，國際囊泡組織(InternationSocietyforExtracelluarVesicles,ISEV)指出,，簡單依靠一種分離方法得到的外泌體的純度和產(chǎn)量都難滿足實(shí)驗(yàn)的需求,。因此，推薦聯(lián)合使用各種方法,，從而得到高純度和高產(chǎn)量的外泌體,。外泌體提純試劑盒的特色與優(yōu)勢：純化和富集的完整血漿/血清，尿液和細(xì)胞培養(yǎng)基中外泌體可用于功能研究,。

外泌體相關(guān)miRNA與肺病的診斷：miRNAs是一類含有20～25個(gè)核苷酸的非編碼小RNA,，能夠通過下調(diào)或壓制靶mRNAs來調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄水平上的基因表達(dá)，目前非編碼RNA被普遍發(fā)現(xiàn)存在于NSCLC患者外泌體中,，參與一些病癥的形成和演化過程,。單個(gè)miRNA可能通過壓制性復(fù)合物與多個(gè)mRNA結(jié)合，從而阻滯整個(gè)生物通路,。因此,，外泌體的miRNA具有成為NSCLC標(biāo)志物的優(yōu)勢。Chen等在152例肺病患者的研究中初次報(bào)道了循環(huán)游離miRNA的表達(dá),，與75例健康者相比,，發(fā)現(xiàn)了兩種高表達(dá)的miRNA（miR-25和miR-223）,。Rabinonowits等對(duì)27例肺病患者和9例健康人的血漿外泌體中12個(gè)miRNA的表達(dá)進(jìn)行了評(píng)估,，結(jié)果顯示，12個(gè)一些病癥相關(guān)的miRNA*在肺病患者中過度表達(dá),。Cazzoli等收集了30個(gè)血漿樣本,，發(fā)現(xiàn)4種外泌體miRNA（miR-378a、-379a,、-139-5p,、-200b-5p）在肺病患者血清中明顯升高，用于篩查患者與健康人ROC曲線下面積（AUC）為0.908,。利用PEG沉淀外泌體存在不少問題：比如純度和回收率低,，雜蛋白較多。南昌外泌體提取試劑廠家供應(yīng)

將人尿液來源細(xì)胞的培養(yǎng)基通過0.22微米濾膜過濾,，以去除大的細(xì)胞殘片以及其它雜質(zhì),。深圳外泌體提取試劑廠家直銷

外泌體是一種存在于細(xì)胞外的多囊泡體,，可通過細(xì)胞內(nèi)吞泡膜向內(nèi)凹陷形成多泡內(nèi)涵體，內(nèi)涵體與細(xì)胞膜融合后釋放其中的小囊泡,。外泌體的直徑在40-110nm之間,，其中包含RNA、蛋白質(zhì),、microRNA,、DN**段等多種物質(zhì)，存在于血液,、唾液,、尿液、腦脊液和母乳等多種體液中,。外泌體從發(fā)現(xiàn)至今已有30多年的歷史,，雖然較初被認(rèn)為可能是細(xì)胞的“垃圾”，所以才被排出來,，但是近年來研究表明外泌體具有功能活性并可進(jìn)行細(xì)胞間信息傳遞,。如今，研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)外泌體在抗原提呈細(xì)胞中呈遞抗原程中,、一些病癥細(xì)胞發(fā)生的發(fā)展,、神經(jīng)細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中都發(fā)揮著重要作用。專利申請(qǐng)利用分離培養(yǎng)人尿液來源細(xì)胞并收集培養(yǎng)基來進(jìn)行體外培養(yǎng),。深圳外泌體提取試劑廠家直銷