凍存細(xì)胞復(fù)蘇方法：1.從冰箱里取出細(xì)胞冷凍保存管，立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍,。2.待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后，立即加入1ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合,，再將細(xì)胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細(xì)胞培養(yǎng)基的試管中，混合均勻。3.離心收集培養(yǎng)細(xì)胞（參考離心條件：1,000~2,000rpm,，4℃,，3~5min），移去上清液,。4.清洗細(xì)胞,，充分洗凈殘留凍存液。5.加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基,，使用移液管緩緩地均勻細(xì)胞混合液,。適量地稀釋后，將細(xì)胞混合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶中,。6.鏡檢后,，研究者可根據(jù)各自方法和需要來進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。無血清細(xì)胞凍存液：為多種保護(hù)劑組合,，在細(xì)胞內(nèi)外進(jìn)行雙重保護(hù),，較大提高了細(xì)胞復(fù)蘇存活率。無錫開封無血清細(xì)胞凍存液

血清血液成分（加入抗凝劑）血液凝固析出的淡黃色透明液體,。如將血液自血管內(nèi)抽出,，放入試管中，不加抗凝劑,，則凝血反應(yīng),，血液迅速凝固，形成膠凍,。凝血塊收縮,，其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清，也可于凝血后經(jīng)離心取得,。在凝血過程中,，纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊，所以血清中無纖維蛋白原,，這一點(diǎn)是與血漿比較大的區(qū)別,。而在凝血反應(yīng)中,，血小板釋放出許多物質(zhì),，各凝血因子也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化,，如凝血酶原變成凝血酶,，并隨血清存放時間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處,。但大量未參加凝血反應(yīng)的物質(zhì)則與血漿基本相同,。為避免抗凝劑的干擾，血液中許多化學(xué)成分的分析，都以血清為樣品,。太原無血清細(xì)胞凍存液單價無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能：特別配方（主要成分為DMSO和氨基酸）有效提高細(xì)胞凍存活率和復(fù)蘇活力,。

細(xì)胞凍存，我們應(yīng)該注意哪些事項(xiàng)：1,、凍存細(xì)胞是為了留種,，所以要選擇高濃度的細(xì)胞量進(jìn)行凍存。正常情況下,，當(dāng)細(xì)胞濃度達(dá)到1*105/ml時即可凍存,，具體是多少量主要根據(jù)個人觀察。2,、二甲基亞砜（DMSO)因?yàn)榇┩讣?xì)胞的能力較強(qiáng),，因此作為常用的凍存劑，也可以叫做細(xì)胞保護(hù)劑加入到細(xì)胞懸液中,。網(wǎng)上有些分享說道,，如果選用DMSO，整個細(xì)胞懸液的制作過程都要在4℃環(huán)境下進(jìn)行,。本人采用過這種方法凍存過A549和某一原代細(xì)胞,，發(fā)現(xiàn)A549復(fù)蘇存活率和正常凍存的過程相比并沒有明顯區(qū)別，而原代細(xì)胞的接種率確實(shí)有所上升,，可能是因?yàn)槭茿549細(xì)胞比較皮實(shí),，這種方法更適用于比較脆弱的細(xì)胞吧。

無血清細(xì)胞凍存液相對于含血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢有：1.即用型,，無需現(xiàn)配,，直接將細(xì)胞懸浮于凍存液中即可。2.通用型,，適用于凍存各種細(xì)胞系,、原代細(xì)胞。3.無需程序降溫,，可直接放置-80℃凍存,，操作簡單。4.不含血清,，較大減少細(xì)胞污染,。5.因不含血清，批次間差異小,。6.無需液氮,，-80℃冰箱長期凍存。7.可培養(yǎng)板整板凍存,，例如雜交瘤細(xì)胞凍存時可節(jié)省篩選過程,。無血清細(xì)胞凍存液是不含血清和動物源成分，含DMSO、糖類,、氨基酸等成分的一款通用型細(xì)胞凍存液,。無血清凍存液使用方法：收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞，離心去除上清培養(yǎng)液,。

細(xì)胞凍存液的作用是什么,？滲透性冷凍保護(hù)劑：可以滲透到細(xì)胞內(nèi)，一般是一些小分子物質(zhì),，主要包括甘油,、DMSO、乙二醇,、丙二醇,、乙酰胺、甲醇等,。非滲透性冷凍保護(hù)劑：不能滲透到細(xì)胞內(nèi),，一般是些大分子物質(zhì)，主要包括聚乙烯吡咯烷酮（PVP）,、蔗糖,、聚乙二醇、葡聚糖,、白蛋白以及Hetastarch等,。冷凍保護(hù)劑同溶液中的水分子結(jié)合，發(fā)生水合作用,，弱化水的結(jié)晶過程使溶液的粘性增加從而減少冰晶的形成,，同時冷凍保護(hù)劑可以通過在細(xì)胞內(nèi)外維持一定的摩爾濃度，降低細(xì)胞內(nèi)外未結(jié)冰溶液中電解質(zhì)的濃度,，使細(xì)胞免受溶質(zhì)的損傷,。滲透性冷凍保護(hù)劑的保護(hù)機(jī)制是在細(xì)胞冷凍懸液完全凝固之前，滲透到細(xì)胞內(nèi),，在細(xì)胞內(nèi)外產(chǎn)生一定的摩爾濃度,，降低細(xì)胞內(nèi)外未結(jié)冰溶液中電解質(zhì)的濃度，從而保護(hù)細(xì)胞免受高濃度電解質(zhì)的損傷同時,。細(xì)胞內(nèi)水分也不會過分外滲,，避免了細(xì)胞過分脫水皺縮。無血清凍存液注意事項(xiàng)：凍存液中含DMSO成分,，為了您的安全和健康,，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套,。南京成都無血清細(xì)胞凍存液

待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后,，立即加入1 ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合。無錫開封無血清細(xì)胞凍存液

無血清細(xì)胞凍存液與含血清細(xì)胞凍存液對比：細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中細(xì)胞進(jìn)行保種并長期保存的常用方法，其中細(xì)胞凍存液,，作為細(xì)胞凍存時必須使用的一種溶液,，不光光是說只是用來進(jìn)行細(xì)胞的保存，在細(xì)胞的購買,、寄贈,、交換和運(yùn)送過程中也起著關(guān)鍵作用，因此選擇一款好的細(xì)胞凍存液就尤為重要,。如果不加任何條件直接凍存細(xì)胞,，細(xì)胞內(nèi)和外環(huán)境中的水都會形成冰晶，能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)發(fā)生機(jī)械損傷,、電解質(zhì)升高,、滲透壓改變、脫水,、pH值改變,、蛋白變性等，從而引起細(xì)胞死亡,。而細(xì)胞凍存液就相當(dāng)于細(xì)胞的保護(hù)劑,，在凍存細(xì)胞時將細(xì)胞懸浮于凍存液中，可使冰點(diǎn)降低,，提高細(xì)胞膜對水的通透性,，在緩慢的凍結(jié)條件下，能使細(xì)胞內(nèi)水份在凍結(jié)前透出細(xì)胞,，可以防止或減少冷凍冰晶對細(xì)胞的損傷作用,。這樣就使細(xì)胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來，在需要時直接復(fù)蘇就可恢復(fù)細(xì)胞活性,。無錫開封無血清細(xì)胞凍存液