無血清凍存液使用方法：1、收集懸浮細胞或貼壁細胞，離心去除上清培養(yǎng)液,。2,、加入適量的細胞凍存液，重懸細胞,，調節(jié)密度至1-5x10*↑/mL,。3、將加有凍存液的細胞懸液分裝至凍存管中,。4,、將凍存管直接轉移至-80C水箱中冷凍保存。5,、儲存條件：2-8C保存,，年有效：-20C保存，兩年有效,。無血清凍存液注意事項：1,、請選擇對數(shù)生長期細胞進行凍存。2,、凍存液加入細胞后,，請盡快放入-80C冰箱凍存。3,、本產(chǎn)品凍存細胞可以在-80°C冰箱保存3年以上,。4,、若需長期凍存細胞,，請轉移至液氮罐中貯存。5,、凍存液中含DMSO成分,，為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套,。1000 rmp離心5分鐘,，去除離心管中的上清液，收集細胞沉淀,。石家莊正規(guī)無血清細胞凍存液生產(chǎn)廠家

產(chǎn)品特性：a.可直接放置于-80℃冰箱,，無需降溫，節(jié)省時間和精力,；b.即用型,，無需現(xiàn)配，操作方便,，可減少實驗中因操作引起的污染,；c.在多種哺乳細胞系中經(jīng)過性能驗證，其復蘇率和活率達90%以上；d.可長期存儲于-80℃冰箱(5年以上),，取用方便,；e.采用成分明確的無血清配方，價格比常規(guī)自配細胞凍存液更為低廉,；保存溫度：2~8℃具體操作步驟：1,、培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中細胞按常規(guī)方法消化，或分離獲得原代細胞后,，收集于離心管中,。2、使用離心機離心,，去除上清,，收集細胞沉淀。3,、根據(jù)細胞生長密度加入適量的細胞凍存液進行重懸,，充分混勻(推薦凍存密度為1-2×106/ml)。4,、將細胞懸液分裝至凍存管中,，直接放置于-80℃冰箱保存。24小時后可移入液氮長期保存(可選),。貴陽無血清細胞凍存液推薦廠家適量地稀釋后,，將細胞混合液移至事先準備好的培養(yǎng)瓶中。

細胞凍存是細胞培養(yǎng)技術中細胞進行保種并長期保存的常用方法,，其中細胞凍存液,，作為細胞凍存時必須使用的一種溶液，不光光是說只是用來進行細胞的保存,，在細胞的購買,、寄贈、交換和運送過程中也起著關鍵作用,，因此選擇一款好的細胞凍存液就尤為重要,。如果不加任何條件直接凍存細胞，細胞內(nèi)和外環(huán)境中的水都會形成冰晶,，能導致細胞內(nèi)發(fā)生機械損傷,、電解質升高、滲透壓改變,、脫水,、pH值改變、蛋白變性等,，從而引起細胞死亡,。而細胞凍存液就相當于細胞的保護劑，在凍存細胞時將細胞懸浮于凍存液中，可使冰點降低,，提高細胞膜對水的通透性,，在緩慢的凍結條件下，能使細胞內(nèi)水份在凍結前透出細胞,，可以防止或減少冷凍冰晶對細胞的損傷作用,。這樣就使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來，在需要時直接復蘇就可恢復細胞活性,。

細胞冷凍的原理：細胞凍存及復蘇的基本原則是慢凍快融,，實驗證明這樣可以比較大限度的保存細胞活力。如今細胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,，這兩種物質能提高細胞膜對水的通透性,，加上緩慢冷凍可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外，減少細胞內(nèi)冰晶的形成,，從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷,。復蘇細胞應采用快速融化的方法，這樣可以保證細胞外結晶在很短的時間內(nèi)即融化,，避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結晶對細胞造成損傷,。細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,，可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來,，這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞,，可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種,，起到了細胞保種的作用。除此之外,，還可以利用細胞凍存的形式來購買,、寄贈,、交換和運送某些細胞,。細胞凍存時向培養(yǎng)基中加入保護劑--終濃度5%．15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO)，可使溶液冰點降低,，加之在緩慢凍結條件下,，細胞內(nèi)水分透出，減少了冰晶形成,，從而避免細胞損傷,。采用"慢凍快融"的方法能較好地保證細胞存活。無血清細胞凍存液的優(yōu)勢：因不含血清,，批次間差異小,。

使用方法：1)細胞超凈臺無菌環(huán)境，1.5mlEP管內(nèi)加入細胞混懸劑均勻混懸細胞，細胞終濃度為5×106個/ml,，混懸液體積為200μl,。細胞凍存劑冰水混合物中預冷，逐滴加入細胞凍存劑800μl,，細胞混懸劑與細胞凍存劑的體積比控制在1:4,。2)開啟程序性降溫，降溫速率為1℃/min,，較后降溫至-80℃以下進行凍存,。將比較例1凍存后細胞的復蘇率與實施例5凍存后細胞的復蘇率進行對比，具體結果如附圖1所示,，可見采用本發(fā)明的凍存方法能夠明顯提高細胞的復蘇率,。其他實施例通過與比較例1進行比較，也得到相同的試驗結果,。本發(fā)明的凍存方法不僅可以明顯提高凍存后細胞復蘇率,，同時還可減少不同批次細胞凍存復蘇率不穩(wěn)定、以及避免由血清中的支原體,，細菌,，朊細菌及其他細菌顆粒引發(fā)的污染。無血清細胞凍存液產(chǎn)品性能：為了避免反復凍融,，傳統(tǒng)的細胞凍存液,，分裝成小管后置于-20℃環(huán)境下保存。成都正規(guī)無血清細胞凍存液直銷廠家

無血清細胞凍存液,，用于各種動物細胞株（tumour細胞和常規(guī)細胞）,，凍存細胞可在-80℃長期保存。石家莊正規(guī)無血清細胞凍存液生產(chǎn)廠家

細胞凍存及復蘇的基本原則是“慢凍快融”,，這樣可以較大限度的保存細胞活力,。目前細胞凍存多用二甲基亞砜（DMSO）作為保護劑，這兩種物質能提高細胞膜對水的通透性,；緩慢冷凍可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,，減少細胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少冰晶對細胞的物理損傷,。復蘇細胞采用快速融化的方法可以保證細胞外結晶在很短的時間內(nèi)融化,，避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結晶對細胞造成損傷。血清完全細胞凍存液,，通用于各種動物細胞株,。特別配方有效提高細胞存活率和活力。不含動物來源性蛋白,，能減少各類病毒,、霉菌和支原體等污染,，確保凍存細胞安全。適合用于無血清培養(yǎng)細胞和蛋白表達細胞,。石家莊正規(guī)無血清細胞凍存液生產(chǎn)廠家