鼠尾Ⅰ型膠原:材料與方法:1.主要材料、試劑和儀器鼠尾、鹽酸,、等滲氯化鈉溶液,、鈣液,、磷液均購自上海晶純生化科技股份有限公司,。日立高新TEMHT770(日本日立公司);多功能粉末X射線衍射儀,。2.酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白取大鼠尾巴洗凈,,用75%的乙醇浸泡5min。將尾巴剪開,,去掉皮毛,,并剪成小段,抽出銀色的肌腱,。將肌鍵剪斷置于平皿中,,用無菌等滲氯化鈉溶液浸泡。吸去等滲氯化鈉溶液,,將肌鍵置于平皿中剪碎,,按每克肌鍵50mL的比例加入0.1%的醋酸溶液。搖晃,,將肌鍵分散于醋酸溶液中,,4℃放置一周,然后以2186×g離心20min。在醋酸溶液的酸解下,,肌腱水解成膠凍狀凝膠,,置于冰箱4℃保存。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,,并且制作簡便,成本低廉,。鼠尾膠原,、多聚賴氨酸和明膠作為基質(zhì)包被培養(yǎng)器皿。無錫正規(guī)鼠尾膠原供應(yīng)商
鼠尾膠原凝膠體在皮膚細(xì)胞原代培養(yǎng)中的應(yīng)用:在國外的藥理,毒理和皮膚病學(xué)的研究領(lǐng)域中已得到的限翩,否則培養(yǎng)成功率極低.本文采用鼠尾膠原凝膠體作為滋養(yǎng)層,提高了培養(yǎng)細(xì)胞的材料和方法r1]實驗材料:培養(yǎng)液DEIdE(G皿}ao),表皮細(xì)胞生長因子(EGFSigma),小牛血清(上海祟明生物制品廠),氫化可的松,胰島素(Sigm,青,鏈霉素,胰蛋白酶,]~DTA,細(xì)胞培養(yǎng)皿~35mill(00rningrSA).(2)皮膚基底細(xì)胞的分離和細(xì)胞懸液的制備:2~3d的新生大鼠(wisr),以75%酒精消毒背部皮膚,剪下皮膚后.以消化12h.輕刷表皮面,收集細(xì)胞懸液,加入細(xì)胞培養(yǎng)液.用梯度離心收集細(xì)胞,以3xi0/m]濃度接種平皿.(3)鼠尾膠原凝膠體的制備:具體方法參見文獻(xiàn)c13o(4)培養(yǎng)皿的膠原鋪制:i.0ml的酸溶解膠原滴入~35mm培養(yǎng)皿中,鋪滿平皿底部;將平皿暴露于氨氣中30min,然后置空氣中30rain,散盡剩余氨氣,。開封正規(guī)鼠尾膠原價格鼠尾膠原醋酸溶解:氯仿的量約為膠原溶液的10%,。
生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法,采用酸法與酶法相結(jié)合的工藝,,保持恒低溫?zé)o菌的環(huán)境,,利用同樣濃度的鹽溶液進(jìn)行兩次鹽析與離心,簡化了提純步驟,。所用酸為低濃度酸溶液,,并采用檸檬酸替代醋酸進(jìn)行提純。從提取原料到樣品生成過程中,,進(jìn)行多次真空冷凍干燥,,并經(jīng)進(jìn)一步處理獲得含水率在3%以下的膠原蛋白微粉;較后由滅菌,、無菌包裝,,成品膠原蛋白粉末的純度在98%以上,。本發(fā)明獲得的膠原蛋白降低了蛋白的免疫原性,,提高了產(chǎn)率和生物相容性,降低了成本,,適用于生物醫(yī)用材料,,所得到的膠原蛋白能完整地保留其特有的三股螺旋結(jié)構(gòu)。
鼠尾膠原醋酸溶解:1.將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中,,制備成濃度為0.1%的溶液,。在室溫中攪拌1-3小時直到完全溶解。2.建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中,,并小心的在瓶底鋪上一層氯仿,。氯仿的量約為膠原溶液的10%。不要晃動或攪拌,。在2-8度中放置過夜,。在無菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液。我們不建議用過濾的方法無菌化。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會導(dǎo)致丟失蛋白,。3.稀釋一定數(shù)量的膠原溶液,。4.按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶。在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時或者2-8度過夜,。膠原蛋白是脊椎動物和無脊椎動物支持結(jié)構(gòu)的主要組成,。
一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法:膠原蛋白是脊椎動物和無脊椎動物支持結(jié)構(gòu)的主要組成。在人的身體中這是皮膚,、筋,、軟骨、骨骼及結(jié)締組織的較主要的蛋白質(zhì),。膠原蛋白占人體蛋白質(zhì)總量的三分之一,,不論來源于哪一種動物或哪一種組織的膠原都有許多共同特性。氨基酸組成中約有三分之一為甘氨酸,,有脯氨酸和羥脯氨酸,。根據(jù)其遺傳分子結(jié)構(gòu)遺傳基因的差別,膠原蛋白分為20幾個亞型,。但較為常見的為Ι,、Π、ΙΙΙ型膠原蛋白,,即間質(zhì)膠原蛋白,。其中I型較為豐富且品質(zhì)優(yōu)良。I型膠原蛋白分布非常普遍,,是主纖維束的主要成分,,給結(jié)締組織以強(qiáng)度;是較豐富的膠原蛋白類型,,尤其是在皮膚真皮,、骨、筋和腱中,。將黏稠的膠體溶液進(jìn)行高速冷凍離心處理,。南京鼠尾膠原進(jìn)貨價
細(xì)胞培養(yǎng)器皿的表面包被以包被濃度為2μg/cm2為例。無錫正規(guī)鼠尾膠原供應(yīng)商
鼠尾膠原簡介:鼠尾I型膠原蛋白(Collagenfromrattail,TypeI)系采用Birkedal-Hansen方法在無菌下制備,,純度達(dá)到95%以上,,可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于細(xì)胞培養(yǎng)皿的包被,,特別適合普通細(xì)胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細(xì)胞的培養(yǎng),;也可用于制備三維膠原凝膠,使細(xì)胞在模擬的三維環(huán)境中生長,。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn):1,、SDS-PAGE分析純度大于95%。2、無菌檢驗結(jié)果為陰性,。3,、本品2μg/cm2包被細(xì)胞培養(yǎng)皿后培養(yǎng)PC-12細(xì)胞,貼壁及生長正常,。4,、本品濃度1mg/mL,pH7.0時形成具有一定強(qiáng)度的三維膠原凝膠,,NIH-3T3細(xì)胞在三維凝膠內(nèi)生長正常,、PC-12細(xì)胞在三維凝膠表面生長正常。無錫正規(guī)鼠尾膠原供應(yīng)商
蘇州君欣生物科技有限公司是一家集研發(fā),、生產(chǎn),、咨詢、規(guī)劃,、銷售,、服務(wù)于一體的生產(chǎn)型企業(yè)。公司成立于2019-12-16,,多年來在原代細(xì)胞,,無血清細(xì)胞凍存液,干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基,,動物疾病模型行業(yè)形成了成熟,、可靠的研發(fā)、生產(chǎn)體系,。蘇州君欣生物目前推出了原代細(xì)胞,,無血清細(xì)胞凍存液,干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基,,動物疾病模型等多款產(chǎn)品,,已經(jīng)和行業(yè)內(nèi)多家企業(yè)建立合作伙伴關(guān)系,目前產(chǎn)品已經(jīng)應(yīng)用于多個領(lǐng)域,。我們堅持技術(shù)創(chuàng)新,,把握市場關(guān)鍵需求,,以重心技術(shù)能力,,助力精細(xì)化學(xué)品發(fā)展。蘇州君欣生物為用戶提供真誠,、貼心的售前,、售后服務(wù),產(chǎn)品價格實惠,。公司秉承為社會做貢獻(xiàn),、為用戶做服務(wù)的經(jīng)營理念,致力向社會和用戶提供滿意的產(chǎn)品和服務(wù)。原代細(xì)胞,,無血清細(xì)胞凍存液,,干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基,動物疾病模型產(chǎn)品滿足客戶多方面的使用要求,,讓客戶買的放心,,用的稱心,產(chǎn)品定位以經(jīng)濟(jì)實用為重心,,公司真誠期待與您合作,,相信有了您的支持我們會以昂揚的姿態(tài)不斷前進(jìn)、進(jìn)步,。