鼠尾膠原醋酸溶解：1．將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中,，制備成濃度為0.1%的溶液,。在室溫中攪拌1-3小時(shí)直到完全溶解,。2．建議將溶液轉(zhuǎn)移到擰口的玻璃瓶中,，并小心的在瓶底鋪上一層氯仿,。氯仿的量約為膠原溶液的10%,。不要晃動(dòng)或攪拌,。在2-8度中放置過夜,。在無菌條件下轉(zhuǎn)移上層的膠原溶液。我們不建議用過濾的方法無菌化,。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)該方法會導(dǎo)致丟失蛋白,。3．稀釋一定數(shù)量的膠原溶液。4．按照6-10ug/cm2的濃度包被培養(yǎng)瓶,。在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時(shí)或者2-8度過夜,。5．從包被表面除去多余的液體。過夜干燥,。如果膠原溶液不是無菌的,，這時(shí)候可以在無菌細(xì)胞操作室中暴光在紫外線下過夜消毒。在接種細(xì)胞前用無菌的水漂洗,。鼠尾I型膠原蛋白系采用方法在無菌下制備,，純度達(dá)到95%以上。金華正規(guī)鼠尾膠原產(chǎn)品介紹

I型鼠尾膠原是借鑒NavneetaRajan,JasonHabermehl法，經(jīng)過乙酸抽提,、離心,、滅菌、透析等步驟制備得到的高純度,、高活性膠原蛋白,，屬于醫(yī)藥級別產(chǎn)品，可用于包被細(xì)胞培養(yǎng)器皿（單分子層包被）,，適合多種類型細(xì)胞的貼壁如肝臟細(xì)胞,、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞、胚胎細(xì)胞,、肌細(xì)胞,、肺細(xì)胞、神經(jīng)鞘細(xì)胞等,。I型膠原蛋白包被細(xì)胞培養(yǎng)板,，規(guī)格為6/24孔板，表面經(jīng)I型膠原蛋白包被,，可以很好的降低蛋白質(zhì)的吸附,。使用這種細(xì)胞培養(yǎng)板培養(yǎng)細(xì)胞，可以獲得良好的細(xì)胞貼壁率,，細(xì)胞增殖速度快,，形態(tài)均一，細(xì)胞培養(yǎng)成功率高,。廈門鼠尾膠原直銷廠家鼠尾膠原醋酸溶解：在室溫或37度結(jié)合數(shù)小時(shí)或者2-8度過夜,。

鼠尾膠原的生物礦化和TEM觀察：果凍樣Ⅰ型膠原蛋白膠體初始浸泡在礦化液中時(shí)呈微白色；礦化2d后,，膠體的顏色逐漸加深至乳白色,；礦化6d后，隨著羥基磷灰石晶體礦化長入膠原纖維內(nèi)部,，膠體顏色加深至純白色,，并在膠體表面沉積了一層薄薄的羥基磷灰石鈣晶體，予鑷子夾起,，其表層羥基磷灰石鈣晶體破碎散落,。TEM表征顯示：礦化2d后，Ⅰ型膠原纖維的明暗相隔周期性條紋結(jié)構(gòu)逐漸模糊,，羥基磷灰石鈣前體滲入膠原纖維內(nèi)部,，膠原纖維部分礦化，沿著膠原纖維生長,，忖度變深,；礦化6d后，Ⅰ型膠原纖維的明暗相隔D-Band結(jié)構(gòu)完全消失，膠原纖維內(nèi)部可以看到黑色羥基磷灰石晶體,，嵌入膠原纖維縱向生長,。當(dāng)鼠尾Ⅰ型膠原纖維完全礦化時(shí)，由于整條膠原纖維都被羥基磷灰石鈣晶體占據(jù),，膠原纖維呈現(xiàn)黑色，選區(qū)衍射斑圖符合羥基磷灰石表征,。

膠原蛋白占人體蛋白質(zhì)總量的三分之一,，不論來源于哪一種動(dòng)物或哪一種組織的膠原都有許多共同特性。膠原蛋白可分為20幾個(gè)亞型,，但為常見的為I,、II、III型膠原蛋白,，即間質(zhì)膠原蛋白,。其中I型為豐富且品質(zhì)優(yōu)良。劃重點(diǎn)：任何動(dòng)物的膠原都有許多共性,，I型膠原蛋白為豐富且品質(zhì)優(yōu)良,，鼠尾膠原蛋白是I型膠原蛋白。于是,，動(dòng)物中心就進(jìn)行了有關(guān)“耗子尾汁”的發(fā)明：一種基于鼠尾膠原蛋白制備的可吸收止血材料及其制備方法并在說明書中給出了原因：“一般的生物體中提取的膠原蛋白多為混合型,，之前多從牛皮、豬皮,、牛腱中提取,，但這類膠原蛋白不僅有油脂等其他雜質(zhì)，鼠尾膠原,、多聚賴氨酸和明膠作為基質(zhì)包被培養(yǎng)器皿,。

實(shí)驗(yàn)應(yīng)用：鼠尾膠原在原代培養(yǎng)耳蝸血管紋邊緣細(xì)胞中的應(yīng)用。目的：建立利用自制的鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法,。方法:制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的效果,。結(jié)果：自制的鼠尾膠原能正常地培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞，細(xì)胞角蛋白18表達(dá)陽性,，免疫組織化學(xué)結(jié)果和掃描電鏡證實(shí)所培養(yǎng)的細(xì)胞具有典型的分泌上皮細(xì)胞特征,。結(jié)論：成功建立了利用自制鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法，并且制作簡便,成本低廉,。將培養(yǎng)器皿在室溫放置20min待膠凝固后,，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi)。廈門鼠尾膠原平均價(jià)格

將鼠尾膠原加入到0.1M的醋酸中,，制備成濃度為0.1%的溶液,。金華正規(guī)鼠尾膠原產(chǎn)品介紹

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