外泌體研究的主要應用：外泌體的功能取決于其所來源的細胞類型，其可參與到機體免疫應答,、抗原提呈、細胞遷移,、細胞分化,、一些病癥侵襲等方方面面。有研究表明一些病癥來源的外泌體參與到一些病癥細胞與基底細胞的遺傳信息的交換,，從而導致大量新生血管的生成,，促進了一些病癥的生長與侵襲。一些病癥,。一些病癥轉移,。來自白血病干細胞的外泌體促進急性骨髓性白血病（AML）細胞的增殖,、遷移和壓制細胞凋亡,。治病靶標。利用外泌體遞送小干擾RNA來沉默KRASG12D,，從而特異性高效靶向至胰腺病細胞,，以明顯降低RAS活化、病細胞增殖和轉移過程,。免疫,。β細胞將含有蛋白質和miRNA的外泌體釋放到細胞外，并可轉移到其他代謝部位或免疫內(nèi)皮細胞,，有利于維持葡萄糖體內(nèi)平衡或造成胰島素抵抗,。心血管。外泌體介導miR-155從平滑肌細胞轉移到內(nèi)皮細胞導致了內(nèi)皮細胞的損傷促進動脈硬化,。分子標記,。疾病診斷。在酒精性肝病,、NASH,、菌類性肝炎、藥物性肝損傷和肝細胞病中發(fā)現(xiàn)循環(huán)EVs的水平上升。預后標志,。色譜法,。這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設備,，應用不普遍,。長沙外泌體提取試劑直銷廠家

外泌體的提取、分離方法：聚合物沉淀法,。聚合物沉淀法用于分離病毒和其他的生物大分子已有50多年歷史,，近幾年，將其作為一種新的方法來分離外泌體,。目前,，市場已經(jīng)有應用聚乙二醇(polyethyleneglycol,PEG)溶液提取外泌體的試劑盒，較常見的是SystemBiosciences公司的ExoQuick?和ExoQuick-TC?kits,，該試劑盒操作簡單不需要特殊的儀器,，但是價格昂貴。提取外泌體的試劑盒主要成分是PEG8000(30%~50%),將試劑盒與體液或細胞培養(yǎng)液4℃孵育過夜,，之后再低速離心,。北京外泌體提取試劑單價通過離心篩選初步去除體液中的細胞成分和細胞碎片，制成體液樣本備用,。

外泌體與神經(jīng)退行性疾?。和饷隗w可能促進或限制大腦中未折疊和異常折疊的蛋白質的聚集。AD病人腦脊液外泌體中均可檢測到Tau和Aβ蛋白,。類似的現(xiàn)象也在PD和ALS疾病中發(fā)現(xiàn),。PD病人腦脊液外泌體可檢測到α-synuclein，ALS病人外泌體中也可以檢測到SOD1或TDP-43,。外泌體與疾病診斷（應用潛能）：外泌體生成機制表明,，通過分析外泌體的組分，可以幫助識別其來源的細胞類型,。這一特性已被應用于開發(fā)心血管疾病,，神經(jīng)系統(tǒng)疾病和一些病癥的分子診斷方法，也在肝腎肺相關疾病中進行研發(fā)測試,。將沉淀物用PBS緩沖液進行懸浮，使外泌體懸浮于液體上層

外泌體的提取主要包括以下幾種方式,。一是超速離心法,，這是目前外泌體提取較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多,，但是純度不足,，電鏡鑒定時發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊，由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標準，也有一些研究認為此種方法得到的是微泡不是外泌體,。二是過濾離心,，這種操作簡單、省時,，不影響外泌體的生物活性,，但同樣存在純度不足的問題。三是密度梯度離心法,，用此種方法分離到的外泌體純度高,，但是前期準備工作繁雜，耗時,，量少,。外泌體檢測作為一種新型的液體活檢熱點技術已被許多臨床科研機構普遍地應用于一些病癥和疾病的無創(chuàng)診斷。使用PBS對膜進行洗脫即得到外泌體濃縮液,。

作為一種分子通斷開關的KRAS發(fā)生突變時會處于“開啟”狀態(tài),。在80%～95%的胰腺導管腺病（PDAC）當中,，這個基因發(fā)生突變,，這也是這種一些疾病中較為常見的突變。這些研究人員證實iExosome能夠運送特異性地靶向KRAS的siRNA和shRNA分子,，并且比他們的合成對應物脂質體（liposome）更加高效,。脂質體不具有外泌體表現(xiàn)出的天然復雜性和優(yōu)勢。德州大學MD安德森一些疾病中心一些疾病生物學助理教授ValerieLeBleu博士說,，“我們的研究提示著與脂質體相比,，外泌體表現(xiàn)出運送siRNA分子和壓制侵襲性胰腺瘤生長的優(yōu)異能力。我們也證實外泌體表面上的CD47存在允許它們躲避來自循環(huán)單核細胞的吞噬作用,。外泌體攜帶大量特異性的蛋白質以及功能性的mRNAs,、miRNAs等生物活性物質。武漢外泌體提取試劑推薦廠家

外泌體在免疫中抗原呈遞,、一些病癥的生長與遷移,、組織損傷的修復等生理病理上起著重要的作用。長沙外泌體提取試劑直銷廠家

外泌體的生物學功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒,，而傳統(tǒng)超速離心方法步驟繁瑣,、硬件要求高、操作難度大,。李記生物自主開發(fā)的外泌體快速提取試劑盒,，組分經(jīng)過優(yōu)化處理，適用于細胞培養(yǎng)上清液,、血清,、血漿,、尿液及其他體液（腦脊液,、腹水,、羊水,、乳汁以及唾液等）中的外泌體提取，并搭配純化過濾裝置,，可快速高效地獲得高純度外泌體顆粒,。注意事項：1.對于待測樣品粘度過大時，可將樣本用4℃預冷的1×PBS緩沖液進行等體積稀釋處理,。2.當血清,、血漿、唾液等樣品收獲的外泌體濃度較高,，收獲的外泌體顆粒無法通過EPF柱純化時,，可用4℃預冷的1×PBS進行稀釋后再通過EPF柱離心。3.針對外泌體標志蛋白（CD63,CD9,CD81等）進行Westernblot檢測,，可以鑒定所提的外泌體,。通過超速離心(120000g/分鐘)20小時以上才能獲得足夠的外泌體量。長沙外泌體提取試劑直銷廠家